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摘要/目標:提出一種利用高速相差及亮視場實現(xiàn)的顯微鏡成像方法。該方法在保證圖像質(zhì)量的前提下,實現(xiàn)較傳統(tǒng)方法快30倍的大尺寸細胞培養(yǎng)皿掃描成像。在該方法中,被觀測的樣本被持續(xù)移動,由頻閃光源負責照亮樣品,使該樣本可以被清晰拍攝。頻閃光源較短的閃爍時間,可避免因樣本運動而產(chǎn)生的成像模糊。在掃描的過程中,由先進的自動對焦系統(tǒng)保證對樣品的自動對焦。顯微鏡物鏡的放大率決定視場的大小。由于顯微鏡的視場較小,例如微量滴定板(MTPs)的成像,則需要拍攝大量單張照片,由這些照片去拼接,完成對尺寸較大樣本的完整成像。在傳統(tǒng)的顯微鏡掃描成像中,由步進掃描程序去完成掃描成像。掃描程序會不斷對樣品進行定位、對焦,并拍攝整個樣品的一小部分畫面。對微量滴定板(MTPs)進行上千次的成像定位是非常耗時的。通過在樣品移動過程中持續(xù)拍攝,省去暫停移動拍攝樣品的時間,可大幅提升拍攝的速度。早在10年前,已有論文提出這種被稱為連續(xù)掃描的成像方法,該方法可以基于線或面攝像機實現(xiàn)成像。連續(xù)掃描成像法的關(guān)鍵點在于在樣品的持續(xù)移動中保持對焦,同時需要避免由樣品移動所產(chǎn)生的模糊成像。


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