本文地址：http://tucsen.net/Html/NewsView.asp?ID=37 決定顯微鏡拍攝熒光照片質(zhì)量的因素主要取決于像的襯度和像的亮度, 像的襯度是由樣品中激發(fā)出的熒光與背景上觀察到的光之比決定的背景光包括透過截止激發(fā)光的濾色片的雜散激發(fā)光, 樣品組織成分的自發(fā)熒光和光學(xué)系統(tǒng)的自發(fā)熒光和雜散光, 在熒光顯微術(shù)中盡全力要解決的是既獲得**的像襯度, 同時又維持像有足夠亮度, 這兩者往往是矛盾的例如用極窄波帶濾色片激發(fā)時僅利用了極少的光能, 背景暗了但熒光亮度也弱了在應(yīng)用時, 只能兼顧, 合理的權(quán)衡以決定取舍 熒光顯微光學(xué)系統(tǒng)需要優(yōu)先考慮的是: (1) 光學(xué)系統(tǒng)組成的材料應(yīng)選用在激發(fā)光波內(nèi)無熒光材料, 不但指光學(xué)系統(tǒng)玻璃也包括膠合制造中的膠合劑切片蓋玻片和浸液以及密封劑若有自發(fā)熒光, 不但會增加背景光, 有時還會混淆觀察熒光圖像 (2) 光學(xué)系統(tǒng)的參數(shù)選擇中, 應(yīng)將獲得Zda光能作為**考慮因素 照明系統(tǒng)中集光鏡應(yīng)選用Zda的包容角; 采用柯勒照明并使燈絲或弧光像充滿入瞳, 以期望獲得GX率的均勻照明 收集熒光成像的物鏡, 因為像面照度與數(shù)值孔徑NA 2 成正式, 為此作為熒光用物鏡應(yīng)有較大的NA值目前10×已達015; 20×達0175; 40×達019; 油鏡40×達113 雙目鏡筒作為熒光用時應(yīng)在可見光譜段有較高的透過率, 采用鍍膜技術(shù)可大大地減少光能的損失, 它可比一般雙目鏡筒透射率提高一倍, 這對弱熒光物質(zhì)觀察是必須的 目鏡放大率不宜選大, 因為象面照度與目鏡放大率平方成反比若其它條件相同, 當(dāng)用613×目鏡時,照度定為1**% , 換上1215×?xí)r, 照度約為25% , 因此常在4×～ 613×之間選用 由此表明, 用不同物鏡和目鏡組合成同一倍率的顯微鏡時, 象面照度和曝光系數(shù)可相差數(shù)倍, 對于熒光觀察**組合是選用低倍率目鏡和NA 大的物鏡Z為合適 (3) 作為熒光光學(xué)系統(tǒng)各組成部件的光譜特性也是至關(guān)重要的, 特別是紫外光要通過的部件, 如照明系統(tǒng), 聚光鏡以及物鏡, 要關(guān)注紫光區(qū)的透射系數(shù)聚光鏡要選用透紫外線的材料照明系統(tǒng)中反光鏡表面鍍鋁比鍍銀好, 因為鋁在UV 和V 區(qū)反射率在90% 以上, 而銀僅達70%加拿大膠吸收紫外線, 在紫外區(qū)通過處不宜用作膠合劑 ........................................................................... 更多信息直接訪問圖森官網(wǎng)：www.tucsen.net 凝膠成像專用CCD相機 500萬彩色CCD制冷顯微相機 顯微攝像頭