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利用在細胞來源、操作和檢測讀數(shù)方面的創(chuàng)新進展,研究人員可以更好地重現(xiàn)體內環(huán)境,從而推動生物醫(yī)學研究和再生醫(yī)學 的發(fā)展。由于基于細胞的分析方法變得日益復雜,因此從整體動態(tài)上的捕捉以及細微的細胞事件的觀察都至關重要。在細胞 培養(yǎng)工作流程中,活細胞成像可以在不干擾樣品的情況下提供細胞事件的實時成像數(shù)據(jù),從而優(yōu)化高級模型。
高級細胞檢測(如模擬疾病發(fā)展以篩選治療藥物的分析)通常需要耗費大量精力去開發(fā),并且涉及多個階段,在測試前可能 需要較長的時間準備。培養(yǎng)工作需要從患者處獲取的細胞或誘導的多能干細胞(iPSC),然后通過分化、活化或基因調控(如 CRISPR/Cas9 技術)等多個步驟。此外,可能還需要培養(yǎng)更加復雜的細胞組織,如使用異質培養(yǎng)物或形成 3D 結構。
開發(fā)日漸復雜的分析方法為該領域的研究人員帶來了眾多挑戰(zhàn)。例如,在細胞處于動態(tài)變化時,可能會發(fā)生意料之外或不同 的變化,從而影響對分析的解讀以及最終的成功。在細胞培養(yǎng)過程中,細胞交叉污染或傳代增加引起的累積變化也可能導致 不良的表型效應。如果采用常規(guī)的終點檢測方法,我們在研究結束時才能發(fā)現(xiàn)問題,這將難以了解問題的產生原因。
鑒于高級細胞培養(yǎng)檢測方法的開發(fā)需要大量的資金和時間 投入,因此持續(xù)監(jiān)測將有效避免不可再生的珍貴細胞資源 的浪費。根據(jù)細胞培養(yǎng)技術的中心原則,應在細胞培養(yǎng)、 細胞操作以及細胞檢測(圖 1)等各個階段進行細胞質量控 制(QC),而活細胞成像將是這一需求的理想之選。
在細胞培養(yǎng)質量過程中引入活細胞監(jiān)測還可以幫助研究人 員做出更明智的決策,例如了解操作培養(yǎng)物或進行分析的最 佳時間。如果發(fā)生意外的細胞事件,它能實時識別這些事件 并解釋其效果,同時還可以對捕獲的數(shù)據(jù)進行回顧性分析, 以進一步優(yōu)化后續(xù)研究的條件 1 ?;罴毎O(jiān)測可以與功能性 讀數(shù)相結合,增強相關疾病模型和復雜分析的開發(fā)與解釋,從而促進各種細胞培養(yǎng)測試的成功。
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