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2025-01-21 09:30:22分光光度法
分光光度法是一種通過測定被測物質(zhì)在特定波長處或一定波長范圍內(nèi)光的吸收度，對該物質(zhì)進行定性和定量分析的方法。它基于朗伯-比爾定律，即溶液的吸光度與溶液中吸光物質(zhì)的濃度及液層厚度的乘積成正比。該方法具有靈敏度高、選擇性好、準確度高、操作簡便、快速等優(yōu)點，廣泛應(yīng)用于各種領(lǐng)域，如化學、生物學、醫(yī)學、環(huán)境監(jiān)測等，用于測定金屬離子、有機物、生物大分子等的濃度。

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2021-12-02 17:26:53分光光度法助力研究堿蓬紅色素的理化性質(zhì)
堿蓬又稱為翅堿蓬，俗稱“鹽蒿”，堿蓬幼苗俗稱龍須菜，為藜科堿蓬，屬一年生草本植物[1-3]。堿蓬綠色天然，幼嫩的堿蓬味道鮮美，富含脂肪、蛋白質(zhì)、維生素、氨基酸和微量元素[1,4]。堿蓬還可入藥，中醫(yī)認為堿蓬具有清熱、消食之功效，常入藥治療發(fā)熱、積食。堿蓬提取物具有抗 癌、抗衰老、抗炎、降血糖、降血壓、調(diào)節(jié)內(nèi)分泌等多種功能[3,4]。目前，從安全性、藥理性等方面考慮，天然色素越來越受到人們的青睞，但天然色素越來越受到人們的青睞，但天然色素容易受外界條件的影響而穩(wěn)定性較差。該研究探討了經(jīng)過AB-8打孔吸附樹脂純化的堿蓬紅色素的吸收光譜、理化性質(zhì)，為堿蓬的開發(fā)利用提供理論依據(jù)。一、材料與分析儀器1、實驗材料堿蓬：將采來的堿蓬快速用自來水沖洗干凈，然后用蒸餾水快速沖洗2遍，用干凈的干紗布吸干表面的水珠，放入30-50℃干燥箱中烘干，過篩備用。2、分析儀器UV-5500紫外可見分光光度計（上海元析儀器有限公司）3、 試劑無水乙醇、95%乙醇、甲醇、鹽酸、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、氯化鎂、氯化鋅、氯化銅、氯化亞鐵、三氯化鐵、維生素Ｃ、亞硫酸鈉，均為分析純。 二、實驗方法1、堿蓬紅色素的制備（1）堿蓬紅色素的提取：稱取80目堿蓬粉末30g按固液比1:20加入去離子水，在25 ℃下超聲提取10min，取出，抽濾，將濾液置于干燥潔凈的棕色瓶中，濾渣按固液比1:10反復(fù)提取3~4次，直到濾液無色，合并濾液。（2）堿蓬紅色素提取液的濃縮：將濾液于40 ℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀中濃縮至濾液略粘稠。（3）堿蓬紅色素的分離純化：首先將AB-8大孔樹脂用95％乙醇浸泡24h后，用蒸餾水沖洗2遍，進行濕法裝柱，裝柱時注意避免柱中氣泡的產(chǎn)生，而后繼續(xù)用蒸餾水沖洗至中性，即可使用。將濃縮后的濾液緩慢倒入大孔樹脂柱上，待完全被吸附后，以2倍樹脂體積的蒸餾水洗脫雜質(zhì)，當水的顏色變?yōu)闇\紅色時，以30%乙醇作為洗脫液洗脫色素，控制流速為2L/min，收集洗脫液，直到大孔樹脂中無紅色素。（4）洗脫液的濃縮、干燥：洗脫液于40℃旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至濃稠。而后在冷凍干燥儀的多歧管進行干燥，提前打開冷凍干燥儀，當溫度降低到-40℃時，將色素溶液放入瓶中，進行預(yù)凍，然后在-60℃溫度下進行冷凍干燥，最 終得到暗紅色粉末。于4℃冰箱中避光保存。2、堿蓬紅色素的光譜特性稱取0.0100g堿蓬紅色素粉末，溶于10ml去離子水中，用去離子水定容至100ml，配制成0.1mg/ml的堿蓬紅色素溶液。在350~600nm波長下，每隔2nm掃描其吸收光譜，確定最 大吸收波長。3、堿蓬紅色素的理化性質(zhì)分析稱取0.2000g堿蓬紅色素粉末，溶于100ml去離子水中，并定容至1000ml，配制成0.2mg/ml堿蓬紅色素溶液，于暗處避光保存，以備下列實驗所用。（1）溫度對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響取上述色素溶液7份各10ml于7支試管中，分別置于40℃、50℃、60℃、70℃、80℃、90℃、100℃下保溫1h，取出，觀察記錄顏色變化。冷卻至室溫后，在最 大波長下測定其吸光值。（2）酸堿性對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響取上述色素溶液8份各5ml于8支試管中，分別加入5ml，pH值為5.7、6.0、6.3、6.8、7.0、7.3、7.7、8.0的磷酸鹽緩沖溶液，充分混合均勻，室溫避光放置1h，觀察記錄顏色變化。在最 大波長下測定其吸光值。（3）金屬離子對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響配制濃度為0.02%的氯化鈉、氯化鉀、氯化鈣、氯化鎂、氯化鋅、氯化銅、氯化亞鐵、三氯化鐵溶液。取色素溶液8份各5ml于8支試管中，分別加入5ml上述不同金屬離子溶液，充分混合均勻，室溫避光放置1h，觀察記錄顏色變化。在最 大波長下測定其吸光值。（4）氧化劑對堿蓬紅色素的影響將亞硫酸鈉配制成濃度為0%、0.01%、0.02%、0.03%、0.04%、0.05%的溶液。取色素溶液6份各5ml于6支試管中，分別加入5ml上述不同濃度的亞硫酸鈉溶液，室溫避光放置1h，觀察記錄顏色變化。在最 大波長下測定吸光值。（5）還原劑對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響將維生素C配制成濃度為0%、0.02%、0.04%、0.08%、0.16%、0.32%、0.64%的溶液。取色素溶液7份各5ml于7支試管中，分別加入5ml上述不同濃度的維生素C溶液，室溫避光放置1h，觀察記錄顏色變化。在最 大波長下測定其吸光值。 三、結(jié)果與分析1、堿蓬紅色素的光譜特性分析圖1  堿蓬紅色素的吸收光譜由圖1可以看出，堿蓬紅色素在波長540nm處具有最 高吸收峰。因此，確定堿蓬紅色素的最 大吸收波長為540nm[5]。2、堿蓬紅色素的理化性質(zhì)（1）溫度對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響圖2  溫度對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響（2）光照對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響圖3  光照對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響（3）pH對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響圖4  pH對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響（4）金屬離子對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響圖5  金屬離子對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響（5）氧化劑對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響圖6  氧化劑對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響（6）還原劑對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響圖7  還原劑對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響 四、結(jié)論（1）堿蓬紅色素在波長540nm處有最 大吸收峰，通過紅外光譜分析確定堿蓬紅色素為酚類化合物。堿蓬紅色素易溶于水，為水溶性色素。（2）高溫能破壞堿蓬紅色素的穩(wěn)定性，氧化劑、還原劑對堿蓬紅色素的穩(wěn)定性有一定影響，但在一定濃度范圍內(nèi)，濃度大小對其影響不明顯。金屬離子Na+ 、K+ 、Ca2+ 、Mg2+ 對堿蓬紅色素的影響較小，而Zn2+、Cu2+、Fe2+、Fe3+ 對堿蓬紅色素的影響較大。 
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2021-12-02 17:20:03分光光度法助力探究食品添加劑對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響
堿蓬綠色天然，幼嫩的堿蓬味道鮮美，富含脂肪、蛋白質(zhì)、維生素、氨基酸和微量元素。本文利用分光光度法探究食品添加劑檸檬酸、蔗糖、山梨酸鉀、亞硝酸鈉對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響，為天然色素在食品中應(yīng)用提供理論依據(jù)。                        一、材料與儀器堿蓬紅色素UV-5500紫外可見分光光度計 二、實驗方法1、檸檬酸影響實驗將檸檬酸配制成濃度為0%、0.1%、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%的溶液。取色素溶液7份各5ml于7支試管中，分別加入5ml上述不同濃度的檸檬酸溶液，室溫避光放置1h，觀察記錄顏色變化。在540nm處測定其吸光值。 2、蔗糖影響實驗將蔗糖配制成濃度為0%、0.1%、0.2%、0.4%、0.6%、0.8%、1.0%的溶液。取色素溶液7份各5ml于7支試管中，分別加入5ml上述不同濃度的蔗糖溶液，室溫避光放置1h，觀察記錄顏色變化。在540nm處測定其吸光值。 3、山梨酸鉀影響實驗將山梨酸鉀配制成濃度為0%、0.05%、0.1%、0.15%、0.2%、0.25%的溶液。取色素溶液6份各5ml于6支試管中，分別加入5ml上述不同濃度的山梨酸鉀溶液，室溫避光放置1h，觀察記錄顏色變化。在540nm處測定其吸光值。 4、亞硝酸鈉影響實驗將亞硝酸鈉配制成濃度為0%、0.01%、0.02%、0.03%、0.04%、0.05%、0.06%的溶液。取色素溶液7份各5ml于7支試管中，分別加入5ml上述不同濃度的亞硝酸鈉溶液，室溫避光放置1h，觀察記錄顏色變化。在540nm處測定其吸光值。 三、結(jié)果與分析1、檸檬酸對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響圖1  檸檬酸對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響2、蔗糖對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響圖2  蔗糖對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響3、山梨酸鉀對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響圖3  山梨酸鉀對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響4、亞硝酸鈉對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響圖4  亞硝酸鈉對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響 四、結(jié)論利用分光光度法探究食品添加劑檸檬酸、蔗糖、山梨酸鉀、亞硝酸鈉對堿蓬紅色素穩(wěn)定性的影響，實驗結(jié)果表明，檸檬酸、蔗糖、山梨酸鉀對堿蓬紅色素無明顯影響，亞硝酸鈉對堿蓬紅色素穩(wěn)定性有一定的影響。
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2021-07-02 14:45:25HJ970-2018水質(zhì)石油類測定 紫外分光光度法，正己烷的透光率到底多少合格？
HJ970-2018標準規(guī)定，225nm，正己烷透光率需要大于90%以上才合格，否則需要對正己烷進行脫芳處理。實際上，用1cm比色皿，正己烷透光率大于90%，用2cm比色皿，正己烷透光率大于81%即可滿足預(yù)期用途。壇墨質(zhì)檢色譜級正己烷在225nm，1cm比色皿測定透光率如圖所示：文章來源：標準物質(zhì)ZX（https://www.gbw-china.com/)
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2021-08-11 11:43:142分鐘教你做實驗—納氏試劑分光光度法測氨氮空白值偏高的原因探討
納氏試劑分光光度法測氨氮空白值偏高的原因探討一、檢測原理以游離態(tài)的氨或銨根離子等形式存在的氨氮與納氏試劑反應(yīng)生成淡紅棕色絡(luò)合物，該絡(luò)合物的吸光度與氨氮含量成正比，于420nm波長處測量。二、實驗步驟1移取標準溶液、待測溶液定容至50毫升2分別加入1.0mL酒石酸鉀鈉或礦物質(zhì)穩(wěn)定劑2滴3加入以二LV化汞為原料的納氏試劑1.5mL或以DIAN化汞為原料的納氏試劑1.0mL4混勻后靜置10min510mm比色皿，在420nm波長下，以水作參比測試吸光度三、線性空白值偏高的常見問題原因分析及解決方案1、用1cm比色皿時的空白吸光度空白值偏高，大于0.030，導致線性不好或截距偏大。原因分析：(1)試劑純度（所用試劑含銨鹽，如酒石酸鉀鈉）；(2)試驗用水被污染，引入氨或者銨鹽。解決方案：(1)用礦物質(zhì)穩(wěn)定劑代替酒石酸鉀鈉；(2)在無氨條件下制水并密封儲存，或者使用高質(zhì)量新鮮的蒸餾水代替無氨水，并且在實驗前測試空白吸光度低于0.030方可使用。2.顯色溫度的控制冬季室溫往往較低，如室溫介于5-10℃時顯色會不完全；而溫度在20-25℃時顯色最完全且較穩(wěn)定；溫度超過30℃，顯色不穩(wěn)定且極易褪色，導致吸光度偏低。所以顯色溫度應(yīng)控制在20-25℃之間。3.顯色時間的控制3.1  納氏反應(yīng)時間小于10min，反應(yīng)不充分；10-30min反應(yīng)相對穩(wěn)定；30-45min顯色會相應(yīng)加深；大于45min，顯色會處于減退狀態(tài)。因此應(yīng)控制反應(yīng)時間在10-30min。3.2  顯色完全后應(yīng)盡快測定，防止顏色加深或褪色影響吸光度。 4.比色皿的尺寸選擇和吸附4.1  根據(jù)樣品的濃度可以選擇10mm或者20mm的比色皿，選擇10mm比色皿時，空白吸光度應(yīng)該小于0.03，相應(yīng)地，選擇20mm比色皿時，空白吸光度應(yīng)該小于0.06。4.2  高濃度在比色皿中的吸附尤其明顯，可能導致測定結(jié)果偏高。盡量按濃度從低到高的順序測定，尤其是測標曲時；4.3  為了準確測定，測樣前用蒸餾水沖洗比色皿3遍以上再測定，以減少吸附產(chǎn)生的誤差；4.4  測定完成后，比色皿上壁上如仍有吸附物，應(yīng)將比色皿放在鉻酸洗液或稀硝酸中浸泡片刻，再進行沖洗后備用。5.顯色劑用量對測定結(jié)果的影響表1  納氏試劑加入量(LV化汞)對空白值和2mg/L標液吸光度的影響從表1可知，隨著納氏試劑加入量增大，空白值會變高。應(yīng)按照國標方法要求加入合適體積的納氏試劑。6.納氏試劑的使用與儲存6.1納氏試劑使用前需恒溫至室溫，且使用前不可搖勻，應(yīng)吸取上清液使用。納氏試劑在生產(chǎn)配制后也需靜置進行沉淀。6.2納氏試劑的使用選擇，根據(jù)HJ 535-2009，市面上LV化汞和DIAN化汞兩種原料的納氏試劑均可使用，如圖1所示。圖1  HJ 535-2009方法中對納氏試劑選擇的規(guī)定6.3納氏試劑應(yīng)冷藏避光保存。文章來源：標準物質(zhì)ZX（https://www.gbw-china.com/)
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2020-09-03 14:05:51【儀電分析】PHMB含量的測定-紫外分光光度法
聚六亞甲基雙胍鹽酸鹽（PHMB）是一款廣譜、su效殺菌劑，具有持久的殺菌能力，應(yīng)用范圍十分廣泛。PHMB用于配制消毒劑和清潔劑，適合醫(yī)用、隱形眼鏡護理液、個人護理用品、食品、飲料和家用消毒。本實驗用紫外分光光度法測定樣品中PHMB的含量。1、方法原理：PHMB分子在236nm處有紫外吸收，吸收強度與PHMB含量成正比。根據(jù)朗伯-比爾定律對其進行定量分析。2、主要儀器及試劑1）紫外可見光分光光度計：上海儀電分析儀器有限公司；2）分析天平：萬分之一；3）容量瓶：100mL、1000mL；4）PHMB標準品：Vantocil ⅠB，20% w/w；5）PHMB待測樣。3、實驗步驟3.1樣品制備：稱取樣品0.50±0.02g（精確到0.1mg）于100mL容量瓶中，用純水稀釋至刻度，搖勻。再移取此溶液1mL于100mL容量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻。測定步驟同上。待測樣品測得的吸光度，根據(jù)標準曲線計算得出待測樣品中PHMB的濃度含量。3.2標準曲線繪制（1）100 ppm標準儲備液：精密稱取PHMB標準品0.50±0.02g（精確到0.1mg）于1000mL容量瓶中，用純水稀釋至刻度，搖勻。（2）標準工作液系列：2、5、10、15、20ppm；（3）在236nm波長處，用10mm比色皿，以蒸餾水為參比，一一測定對應(yīng)的吸光度，以PHMB的濃度對吸光度繪制曲線。3.3標準系列及曲線4、分析結(jié)果的計算4.1 樣品中有效成分計算公式ω=ρ*v/m*100%式中：ω——樣品中有效成分PHMB的質(zhì)量分數(shù)，%；          m——樣品的稱取量，mg；          ρ——從標準曲線上得到待測溶液的質(zhì)量濃度，μg/mL；          V——待測樣品的定容體積，mL。4.2 樣品含量檢測結(jié)果稱取樣品0.5118g，超純水定容至100mL。再取1.0mL，超純水定容至100mL。上機測定，檢測結(jié)果為8.027μg/mL。即15.68%。
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5月20日