- 2025-07-14 00:13:26親和色譜柱
- 親和色譜柱是一種基于生物分子間特異性相互作用的色譜分離技術。它利用固定在色譜柱上的配基與目標分子之間的親和作用進行分離純化。當含有目標分子的混合溶液通過親和色譜柱時，只有與目標分子有特異性親和作用的配基才會與之結合，從而實現(xiàn)目標分子的分離純化。該方法在生物化學和制藥領域有廣泛應用，如蛋白質(zhì)、抗體、酶等生物大分子的純化。
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親和色譜柱資訊
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親和色譜柱問答
- 2023-02-21 16:13:51為什么我們要關心色譜柱內(nèi)徑？
- 相信很多色譜分析員都知道，改變色譜柱內(nèi)徑將對許多變量產(chǎn)生直接影響，包括峰高、信噪比、平均柱效、樣品載量、對強注射溶劑的敏感性、壓力、分析物保留次、溶劑用量和/或液體廢物的產(chǎn)生等多方面問題。市面上的液相色譜柱的內(nèi)徑有4.6 毫米、3.0 毫米、2.1 毫米等等多種選擇，那么，為什么會有這么多內(nèi)徑規(guī)格呢，下面恒譜生帶您了解。一：內(nèi)徑對柱色譜有什么影響？ 在柱色譜法中，樣品物質(zhì)在流動相的幫助下穿過柱子。它們根據(jù)與固定相的相互作用進行分離，從而產(chǎn)生不同的保留時間。換句話說，可以根據(jù)流動相和固定相之間相互作用的類型以及它們通過色譜柱所需的時間來分離和檢測分子。那么，柱徑如何符合方程式的呢？可以想象，更大的直徑使流動相更容易通過。相反，較窄的列意味著這樣做需要更長的時間。可以理解為這對敏感性有連鎖反應，花在色譜柱上的時間越少意味著靈敏度越低，而時間越長則靈敏度越高。因此，較寬的直徑通常會導致較低的靈敏度，而較窄的直徑則與較高的靈敏度相關。其實樣本量也會有影響，較寬的色譜柱需要更大的樣品和更多的溶劑才能進行分析，而窄的色譜柱可以使用較小的樣品和較少的溶劑作為流動相。 當然，選擇色譜柱并不是只有內(nèi)徑這一種因素，色譜柱的長度和它們能夠承受的壓力也可能不同。從長度開始，這可以產(chǎn)生與直徑類似的效果。較短的色譜柱可縮短分析時間從而降低靈敏度。而較長的色譜柱會增加分析時間并改善結果。基于以上所述，很顯然長而窄的色譜柱會提供更加優(yōu)越的結果，因為它會增加分析時間、提高靈敏度并且不需要更大的樣品。但是，推動流動相通過色譜柱需要更大的壓力。色譜柱只能承受一定程度的壓力，而泵需要能夠提供足夠的壓力，因此在選擇時也需要考慮這一點。在泵的出口和進樣閥之間可以安裝在線過濾器，是能夠用來過濾流動相中的雜質(zhì)和固體顆粒，保護液相系統(tǒng)的正常運行的一種過濾型色譜耗材。在液相色譜系統(tǒng)中，恒譜生在線過濾器可以很大程度上地減少泵、混合器和管路在流動相中輸送過程中所產(chǎn)生的堵塞、損壞儀器等情況出現(xiàn)。二：為什么要使用不同直徑的色譜柱？ 有兩個主要優(yōu)勢：其一是減少流動相消耗，其二是減少峰體積。如果將流速調(diào)整為恒定線速度，如HPLC柱徑改變時保留時間應相同，因此樣品運行時間將保持不變。如果運行時間相同且流速降低，則將使用較少的流動相。峰體積（以體積表示的峰寬）隨著色譜柱橫截面積的減小或直徑變化的平方而下降。這轉化為成比例的更高的峰，假設相同質(zhì)量的樣品可以加載到色譜柱上，這可能是正確的，也可能不是正確的。因此，假設注入相同質(zhì)量的樣品，從 4.6 毫米內(nèi)徑的色譜柱換成 2.1 毫米的色譜柱應該會將峰寬減少五倍，并將峰高增加相同的量。 當柱直徑發(fā)生變化時，對流速進行必要的改變以保持恒定的線速度是相當簡單的。減小柱徑有助于節(jié)省溶劑和提高檢測限。但是對于較小直徑的色譜柱，可能會觀察到系統(tǒng)性能的下降。從故障排除的角度來看，很容易將系統(tǒng)性能不佳歸咎于色譜柱本身，而真正的罪魁禍首可能是 LC 系統(tǒng)的柱外體積。對柱外效應的相對不敏感是填充直徑 5 μm 顆粒的4.6 mm × 150mm 色譜分析柱可能在未來許多年內(nèi)仍然是常規(guī) LC 工作的主力色譜柱的原因之一。 今天恒譜生分享的知識先到這啦，希望對您的工作有所幫助！
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- 2023-01-10 13:36:08青出于藍，更勝一籌 | InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18 極性保留色譜柱
- 你是否正面臨著大量化合物分析的挑戰(zhàn)？你是否想開發(fā)同時保留極性和非極性化合物的分離方法？你是否在尋找一款色譜柱，在分析物保留和通量之間平衡？全新 Agilent InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18 色譜柱橫空出世，反相模式下使用 100% 水性流動相大幅提高強極性化合物的保留性能，兼顧通量和保留。Agilent InfinityLab Poroshell 120 系列色譜柱，多年來一直是追求效率的分析工作者的利器。除了推出了粒徑為 1.9 μm 和 4 μm 的填料，安捷倫還不斷增加了 Poroshell 120 固定相類型，進一步拓展了應用范圍。目前 Poroshell 120 系列用于小分子化合物分離的色譜固定相有 3 種粒徑、20 種固定相（包括本次新品 Poroshell 120 Aq-C18）。InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18 色譜柱能夠：提高極性化合物的保留兼容 100% 水性流動相無需擔心固定相塌陷或去濕問題批次間高重現(xiàn)性可在所有分析型 HPLC 和 UHPLC 系統(tǒng)間擴展如果您使用普通 C18 色譜柱，在分析方法開發(fā)/確認階段遇到如下問題：化合物保留、分離和峰型有待改善待測組分極性跨度大高水或者純水條件下化合物保留時間漂移安捷倫 InfinityLab Poroshell 120 Aq-C18 將是您的理想之選！
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- 2022-03-08 11:51:31全新MaxPeak Premier SEC色譜柱隆重上市
- 全新MaxPeak Premier SEC色譜柱隆重上市，助力新型抗體藥物分析近日，沃特世公司隆重推出MaxPeak Premier SEC系列色譜柱。這款色譜柱專為ADC/雙抗分析設計，只需簡單的流動相，就能同時分離聚合物和片段。圖1. MaxPeak Premier SEC系列色譜柱MaxPeak Premier SEC采用專 利的Premier柱管，這是沃特世首次將該技術應用于大分子分析的產(chǎn)品線。結合新型PEO鍵合相填料表面修飾，可大大減少次級作用，僅需較少的鹽即可得到對稱峰形。這一特點將使SEC的方法開發(fā)更簡單，即單一 流動相即可滿足不同樣品的分析需求，有利于建立一個高效的SEC分析平臺。圖2. 不同流動相中蛋白混合標準品分離色譜圖（A: MaxPeak Premier SEC色譜圖；B: 傳統(tǒng)SEC色譜圖）。針對ADC/雙抗的分子特性，MaxPeak Premier SEC對填料的孔徑進行了優(yōu)化，孔徑分布更加合理，使ADC/雙抗的聚合物及片段分析都有了明顯的改善。圖3. MaxPeak Premier SEC分析ADC/雙抗的對比色譜圖。
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- 2021-07-26 08:50:46如何恢復hplc色譜柱性能？
- 大家都知道HPLC色譜柱的壽命是有限的，在使用過程中隨著時間的推移，其性能開始下降。你可以通過峰形和峰形之間的分離，柱背壓的不規(guī)律增加以及重影峰的出現(xiàn)來判斷HPLC色譜柱的性能出現(xiàn)了下降。色譜柱是昂貴的色譜耗材，平常使用完畢后需要保養(yǎng)。如果色譜柱真的發(fā)生了性能下降，有什么方法可以恢復呢? 首先，如果色譜柱由于過載或使用不兼容的流動相而結垢，是可以恢復的，但已經(jīng)損壞的色譜柱或已經(jīng)過使用壽命的色譜柱無法恢復，需要更換。 色譜柱還原程序如下，供大家參考： 反相柱 反相分離是大多數(shù)HPLC分離中使用的主要操作模式。填料主要由C18，C4，CN，NH2和苯基固定相組成。建議以水-乙腈-異丙醇-庚烷-異丙醇-乙腈-流動相的順序用10至20倍體積的溶劑洗脫 正相柱（氨基，二醇，硝基，氨基固定相） 用20倍體積的溶劑沖洗，按照庚烷-異丙醇-乙腈- 水-異丙醇-庚烷的順序。 GPC / GFC色譜柱 用5倍體 積且PH值為3的0.1%磷酸鹽緩沖液沖洗。如果使用了保留力強的蛋白質(zhì)，則使用從水到乙腈再到水的60分鐘梯度液沖洗。 色譜柱在使用前都要對其性能進行考察，使用期間或放置一段時間后也要重新檢查，并將結果保存起來，作為今后評價柱性能變化的參考。柱性能指標包括在一定實驗條件下（樣品、流動相、流速、溫度）下的柱壓、理論塔板高度和塔板數(shù)、對稱因子、容量因子和選擇性因子的重復性，或分離度。進行柱效比較時，還要注意柱外效應是否有變化。但要注意：柱性能可能由于所使用的樣品、流動相、柱溫等條件的差異而有所不同；另外，在做柱性能測試時是按照色譜柱出廠報告中的條件進行（出廠測試所使用的條件是zui佳條件），只有這樣，測得的結果才有可比性。 恒譜生色譜柱柱管由不銹鋼制成，不銹鋼柱內(nèi)壁多經(jīng)過拋光，減小管壁效應，提高柱效，柱中填充鍵合硅膠或聚合物填料。色譜柱基于高純硅膠，采用獨特鍵合技術，具有優(yōu)異的峰形，靈敏性好?；|(zhì)金屬含量低，對所有類型的分析物均表現(xiàn)完好峰形。機械強度高，穩(wěn)定性好，質(zhì)控嚴格，確保色譜柱性能和色譜柱的使用壽命。有多種尺寸規(guī)格可供選擇以適應色譜工作者及其使用的不同需求。我們有專業(yè)的技術工程師團隊為您的需求提供解決方案，歡迎前來咨詢了解！
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- 2021-05-07 16:50:54如何正確使用和維護色譜柱？
- 色譜柱作為液相分離系統(tǒng)中的重要儀器之一，其類型決定了色譜系統(tǒng)的性質(zhì)，色譜柱的粒徑和長度影響了分析時間和分析效率。在日常使用的時候需要小心保護，正確的使用和保養(yǎng)方法可以延長色譜柱的使用壽命。 1.要選擇合適的流動相，也可以在進樣器前面接預柱，如果分析柱是鍵合硅膠，預柱為硅膠，這樣流動相進入分析柱之前會被硅膠“飽和”，避免分析柱中的硅膠基質(zhì)被溶解。 2.色譜柱不能反沖，反沖會降低柱效，除非生產(chǎn)商注明了該柱可以反沖。 3.不要將基質(zhì)復雜的樣品直接注入柱內(nèi)，記得對樣品提前處理，要不就加一截保護柱，保護柱可以更換。 4.注意溫度和壓力要保持穩(wěn)定，不要急劇變化，溫度的急劇變化會影響柱內(nèi)的情況，沖動柱內(nèi)填料。 5.使用時遵循色譜柱上標示的流動方向，記住流動相流動的方向，流入端是先污染端，以便維護。 6.反相柱的溶劑基本就是乙腈或甲醇，正相柱既可以適用正相系統(tǒng)，也可以適用反相系統(tǒng)，一定要清楚是否需要置換色譜柱內(nèi)部保存溶劑。 7.用流動相比例的水系和有機系來沖洗色譜柱，也可以使用內(nèi)含10%左右的純水來沖洗。 8.色譜柱內(nèi)部保存液具有揮發(fā)性，可添加5%-10%的水，堵緊堵頭再用封口膜封起來，減少其揮發(fā)速度。如果在一段時間不用后，使用前用小流速的和色譜柱內(nèi)部相同的溶劑沖洗一定的時間。
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