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2025-05-31 17:45:59組織處理機(jī): 組織處理機(jī)是生物學(xué)或醫(yī)學(xué)領(lǐng)域常用的設(shè)備，用于對(duì)組織樣本進(jìn)行前處理。它采用自動(dòng)化程序，能夠自動(dòng)完成組織樣本的脫水、浸蠟、包埋等步驟，從而提高實(shí)驗(yàn)效率和準(zhǔn)確性。組織處理機(jī)廣泛應(yīng)用于病理學(xué)、組織學(xué)等領(lǐng)域，能夠處理多種類型的組織樣本。相比傳統(tǒng)的手工處理方法，組織處理機(jī)能夠提供更一致、可重復(fù)的處理效果，減少人為誤差，提高實(shí)驗(yàn)質(zhì)量。

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制備煙草葉樣品用于掃描電鏡觀察

本文主要介紹臨界點(diǎn)干燥和冷凍制備方法的實(shí)驗(yàn)流程和實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)比。

徠卡顯微系統(tǒng)(上海)貿(mào)易有限公司 450
2022-06-22
冷凍制備方法徠卡EM TP自動(dòng)組織處理機(jī) 徠卡EM CPD300臨界點(diǎn)干燥儀常溫掃描電鏡

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組織處理機(jī)問(wèn)答

2023-03-24 14:29:50南京試劑組織女工揚(yáng)州游園賞春活動(dòng): 邗溝春水碧如油,到處春風(fēng)足逗留。煙花三月，正是下?lián)P州好時(shí)節(jié)。時(shí)值“3.8婦女節(jié)”來(lái)臨之際，南京試劑組織女工80余人前往揚(yáng)州瘦西湖、東關(guān)街等地游園賞春活動(dòng)。 4日上午9時(shí)許，女工們揣著驛動(dòng)的心乘車抵達(dá)揚(yáng)州，第一站便是瘦西湖。清代錢(qián)塘詩(shī)人汪沆有詩(shī)云：“垂楊不斷接殘蕪，雁齒虹橋儼畫(huà)圖。也是銷金一鍋?zhàn)?，故?yīng)喚作瘦西湖?！笔菸骱纱说妹?。瘦西湖清瘦狹長(zhǎng)，長(zhǎng)十余里，猶如一幅山水畫(huà)卷。女工們跟隨導(dǎo)游的步伐，沿湖行走，路過(guò)冶春、綠楊村、紅園、西園曲水等景點(diǎn)，途經(jīng)大虹橋、長(zhǎng)堤春柳，再到徐園、小金山、釣魚(yú)臺(tái)、蓮性寺、白塔、鳧莊、五亭橋，然后向北至蜀崗平山堂、觀音山。瘦西湖公園內(nèi)柳樹(shù)吐綠，梅花、桃花競(jìng)相開(kāi)放，呈現(xiàn)出桃紅柳綠的春日美景，讓我們體驗(yàn)了一場(chǎng)與春風(fēng)作伴、赴賞花之約的視覺(jué)盛宴。旖旎多姿的園林風(fēng)光，獨(dú)特別致的風(fēng)景建筑接踵而至，令人目不暇接，女工們既見(jiàn)了早春佳景，又賞園林風(fēng)光，正所謂“ 兩岸花柳全依水，一路樓臺(tái)直到山”。中午時(shí)分，在品嘗了揚(yáng)州特色美食后，踏青隊(duì)伍再次出發(fā)前往揚(yáng)州最具有代表性的一條歷史老街——東關(guān)街。東關(guān)街位于揚(yáng)州市中心，全長(zhǎng)1100余米，由一塊塊石板鋪成主街，走在路上，不時(shí)能看到青磚灰瓦的鹽商大院。街上琳瑯滿目的小商鋪將當(dāng)?shù)靥厣朗撑c特產(chǎn)小玩意集中于此，實(shí)在是讓人目不暇接。街上游人熙熙攘攘、摩肩接踵，讓人感受到鮮活的人氣和江南煙火喧然之感。春景賞不盡，轉(zhuǎn)眼是歸程?？鞓?lè)的時(shí)光總是短暫，不經(jīng)意間一天的行程接近尾聲。大家胸中藏著瘦西湖的亭臺(tái)樓閣湖光山景，身上帶著揚(yáng)州古街的濃濃的煙火人情，懷著愉悅的心情踏上了新的工作生活之旅。

2023-02-13 10:39:43組織透明化與點(diǎn)擊化學(xué)相結(jié)合的新技術(shù)CATCH: 在完整組織中觀察藥物靶點(diǎn)相互作用的工具一直是理解體內(nèi)藥物作用的主要障礙。2022年發(fā)表在Cell上的題為“Insitu identification of cellular drug targets in mammalian tissue”的文章有突破性進(jìn)展，作者通過(guò)修改和整合點(diǎn)擊化學(xué)（CC）與組織透明化技術(shù)，開(kāi)發(fā)了一種方法——透明輔助組織點(diǎn)擊化學(xué)（Clearing-Assisted Tissue Click Chemistry，簡(jiǎn)稱CATCH），允許小分子藥物-靶點(diǎn)相互作用在亞細(xì)胞分辨率下進(jìn)行標(biāo)記和成像(圖1A)。該技術(shù)為組織中小分子的體內(nèi)相互作用可視化提供了一個(gè)有價(jià)值的平臺(tái)，并能夠識(shí)別藥物在哺乳動(dòng)物組織中的分布和參與。圖1 CATCH技術(shù)的方法開(kāi)發(fā)1.組織透明化極大地改善了哺乳動(dòng)物組織中的化學(xué)標(biāo)記作者對(duì)小鼠給藥脂肪酸酰胺水解酶（FAAH）緩聚劑PF7845-yne（末端含炔基），通過(guò)CuAAC點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)，炔基與熒光標(biāo)簽的疊氮化物反應(yīng)形成疊氮炔環(huán)，進(jìn)而引入熒光基團(tuán)。初始試圖直接成像藥物結(jié)合的FAAH，但由于信噪比較差，未能顯示細(xì)胞靶標(biāo)。因而猜測(cè)腦組織構(gòu)成復(fù)雜，其致密的脂膜可能影響點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)，作者測(cè)試了基于聚丙烯酰胺的水凝膠組織透明化方法CLARITY，結(jié)果發(fā)現(xiàn)去除脂質(zhì)后顯著提升了成像的信噪比（圖1C、D）。作者同時(shí)也驗(yàn)證了其他的透明化方法也得到了類似的效果（圖1E）。此外，作者還比較了不同的點(diǎn)擊化學(xué)配體（TBTA，BTTAA，BTTP）及不同的銅離子濃度下的反應(yīng)效率，發(fā)現(xiàn)使用BTTP，150 μM硫酸銅條件下可獲得高信噪比且穩(wěn)定的成像（圖1B）。2.CATCH實(shí)現(xiàn)了藥物-靶點(diǎn)接觸的全腦、亞細(xì)胞原位成像為了驗(yàn)證CATCH應(yīng)用的廣泛性，作者對(duì)三種小分子藥物FAAH緩聚劑PF7845-yne、BIA10-2474-yne和單胺氧化酶（MAO）緩聚劑Pargyline-yne進(jìn)行CATCH成像，結(jié)果清晰展示了藥物-靶點(diǎn)在小鼠不同腦區(qū)的分布（圖2A-E）。另外，還可以展示這些分子主要靶向的細(xì)胞類型，F(xiàn)AAH緩聚劑主要靶向新皮質(zhì)和海馬中的神經(jīng)元樣結(jié)構(gòu);而Pargyline-yne主要結(jié)合全腦的血管樣結(jié)構(gòu)，少量下丘腦和腦橋內(nèi)稀疏但特異標(biāo)記的神經(jīng)元樣結(jié)構(gòu)（圖2F）。圖2 全腦藥物結(jié)合的可視化2.CATCH可與熒光標(biāo)記復(fù)合以識(shí)別靶細(xì)胞類型作者在給藥處理后進(jìn)行NeuN免疫染色，發(fā)現(xiàn)PF7845-yne和BIA10-2474-yne主要與新皮質(zhì)、海馬和杏仁核中的NeuN+神經(jīng)元共定位。而在腦橋中發(fā)現(xiàn)了一小群神經(jīng)元樣結(jié)構(gòu)，它們是NeuN陰性但被 pargyline-yne 靶向的（圖3A-D）。隨后作者洗脫NeuN并重新孵育TH抗體驗(yàn)證該推測(cè)，確定了NeuN-，Pargyline-yne陽(yáng)性的細(xì)胞的確是LC-NA神經(jīng)元（圖3E）。由此證明，CATCH可以和熒光標(biāo)記結(jié)合揭示了藥物結(jié)合的細(xì)胞類型，并且可以區(qū)分神經(jīng)元不同部分的藥物靶標(biāo)參與位點(diǎn)，可以支持多輪的藥物靶向細(xì)胞類型鑒定。圖3 藥物靶點(diǎn)的細(xì)胞型鑒定锘海團(tuán)隊(duì)自主研發(fā)的組織透明化試劑盒可以高效地進(jìn)行脫色脫脂，采用親水性溫和環(huán)境的設(shè)計(jì)，在組織熒光保護(hù)、樣本形態(tài)維持、降低自發(fā)熒光等方面表現(xiàn)出比較優(yōu)異的性能，適用范圍廣、操作簡(jiǎn)便、速度快、效率高。

2022-10-18 17:17:45手持式組織研磨器的使用步驟及注意事項(xiàng): 　　手持式組織研磨器按照其功能特性大致可分為：組織研磨器、組織搗碎勻漿機(jī)，可調(diào)高速分散器（勻漿機(jī)），固體樣品粉碎機(jī)。其中手持式組織研磨器是生物、遺傳、病毒、醫(yī)學(xué)、環(huán)保、水產(chǎn)、實(shí)驗(yàn)室、分析室、教育科研的研磨工具，但不適宜用于粘度高的液體和質(zhì)料硬的物體（骨、石等）。今天上海凈信來(lái)為大家介紹手持式組織研磨器的使用說(shuō)明，具體包括使用步驟、使用注意事項(xiàng)和使用范圍等。　　一、手持式組織研磨器使用步驟　　　　1、正確安裝搗碎漿棒，放置搗碎漿杯?！　　　?、將樣品放入搗碎勻漿杯?！　　　?、檢查電源電壓是否符合設(shè)備需求電壓　　　　4、接通電源，指示燈亮?！　　　?、設(shè)定定時(shí)，可將定時(shí)旋鈕調(diào)至“定時(shí)”或“常開(kāi)”位置。　　　　6、設(shè)定轉(zhuǎn)速，緩慢調(diào)節(jié)調(diào)速旋鈕，升至所需轉(zhuǎn)速。　　　　7、工作完畢，將調(diào)速旋鈕置于較為小位置，定時(shí)器置“零”?！　　　?、關(guān)閉開(kāi)關(guān)和電源。　　　　9、擦洗清潔勻漿杯和勻漿棒，然后進(jìn)行烘干，其上不允許有水滴物、積垢和其它異物殘留。　　　　二、手持式組織研磨器使用注意事項(xiàng)　　　　1、設(shè)備必須具有接地安全裝置?！　　　?、設(shè)備使用的電源插座必須是符合要求的三線插座?！　　　?、開(kāi)機(jī)之前，必須注意電源與電機(jī)上電壓是否相符。　　　　4、設(shè)備工作時(shí)應(yīng)將放置平整緊固的臺(tái)面上，以防止振移是用手按住杯蓋?！　　　?、先將刀軸和機(jī)軸配合好，后將聯(lián)接器彈簧性元件向下移至尺槽內(nèi)，機(jī)器才好運(yùn)轉(zhuǎn)?！　　　?、不宜空轉(zhuǎn)，使用時(shí)須加入少量液體或油脂?！　　　?、放入物料時(shí)須緩緩加入，先由慢速逐步調(diào)至高速　　　　8、更換溶液時(shí)，應(yīng)切斷電源后重復(fù)上述操作　　　　9、連軸節(jié)上下滑動(dòng)較困難時(shí)，應(yīng)注入一至二滴機(jī)油，使之潤(rùn)滑?！　　　?0、勻漿機(jī)禁止搗碎骨類，礦砂等較堅(jiān)硬的物質(zhì)?！　　　∪?、手持式組織研磨器具體使用范圍　　　　1、科學(xué)研究：生化、植物、營(yíng)養(yǎng)等研究的搗碎、均質(zhì)用?！　　　?、醫(yī)學(xué)治療：實(shí)驗(yàn)室于藥品搗碎，特別適合于組織治療法藥品搗碎?！　　　?、化工制藥：制造膠質(zhì)乳濁體、液體物質(zhì)之?dāng)嚢杌旌希缰圃煊唾|(zhì)有霉素劑的調(diào)和，制造容縮牛肝搗碎均質(zhì)等?！　　　?、生物制造品：適用于生物制造品過(guò)程中，其液體藥品的攪拌混合及微生物培養(yǎng)基的搗碎均　　　　5、食品行業(yè)：可供制造肉醬、奶酪等使用。

2022-12-23 13:35:42多樣品組織研磨儀對(duì)肺組織研磨操作實(shí)驗(yàn)方法|上海凈信: 此次**中醫(yī)藥大學(xué)需要研磨的實(shí)驗(yàn)樣品是肺組織，根據(jù)貴校要求的研磨效果，我司建議使用高通量組織研磨儀對(duì)肺組織進(jìn)行研磨操作，詳細(xì)如下：**中醫(yī)藥大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院，是全校*大的教學(xué)單位，學(xué)院現(xiàn)有中醫(yī)基礎(chǔ)理論、中醫(yī)診斷學(xué)、中醫(yī)臨床基礎(chǔ)、醫(yī)史文獻(xiàn)、醫(yī)古文、解剖學(xué)、組織學(xué)與胚胎學(xué)、生理學(xué)、藥理學(xué)、生物化學(xué)與分子生物學(xué)、病原微生物與免疫學(xué)、法醫(yī)學(xué)、醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)、預(yù)防醫(yī)學(xué)、食品衛(wèi)生與營(yíng)養(yǎng)學(xué)共15個(gè)教研室，有中醫(yī)學(xué)、機(jī)能學(xué)、形態(tài)學(xué)3個(gè)實(shí)驗(yàn)室，有司法鑒定中心1所。有貴州省中醫(yī)藥方證藥理研究特色重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、中藥民族藥微生物發(fā)酵與生物轉(zhuǎn)化工程中心、法醫(yī)中藥毒理學(xué)特色重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室、中醫(yī)證候?qū)嵸|(zhì)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室等4個(gè)省廳級(jí)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室。生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室是以中西醫(yī)結(jié)合基礎(chǔ)學(xué)科為學(xué)術(shù)內(nèi)涵而建立的，教研室積極開(kāi)展中醫(yī)藥干預(yù)高脂血癥和動(dòng)脈粥樣硬化、肺纖維化、類風(fēng)濕、糖尿病及衰老等分子機(jī)理的科學(xué)研究。主持和參與成立功能性食品研究中心、分子診斷研究中心等，開(kāi)展產(chǎn)學(xué)研創(chuàng)新研發(fā)工作，為后續(xù)相關(guān)科研工作奠定更多研究基礎(chǔ)。實(shí)驗(yàn)方法：1、準(zhǔn)備研磨設(shè)備高通量組織研磨儀一臺(tái)，肺組織樣本適量2、將解凍的肺組織樣品，剪成黃豆粒大小的碎塊3、放入樣品和鋼珠，加入適量裂解液后裝入研磨罐中4、根據(jù)樣品特性及實(shí)驗(yàn)要求設(shè)置研磨參數(shù)及時(shí)間5、啟動(dòng)設(shè)備至研磨結(jié)束后即得到研磨后的樣本實(shí)驗(yàn)效果：研磨前后效果圖對(duì)比客戶之前研缽的研磨方式，此次使用高通量組織研磨儀對(duì)肺組織的研磨實(shí)驗(yàn)效果讓客戶更滿意，研磨儀在同一時(shí)間內(nèi)可高效處理多個(gè)組織樣品，大大節(jié)約了時(shí)間，提高客戶對(duì)樣本的前處理效率。

2022-11-25 11:20:303D組織成像：快速預(yù)覽到高分辨率成像的一鍵切換: 全場(chǎng)景顯微成像分析平臺(tái)MICA集3D采集和AI定量于一體。3D組織成像廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)領(lǐng)域。研究人員利用它來(lái)揭示組織組成和完整性的詳細(xì)信息，或從實(shí)驗(yàn)操作中得出結(jié)論，或比較健康與不健康的樣本。本文介紹了MICA如何幫助研究人員進(jìn)行3D組織成像。3D組織成像模式生物或患者的組織切片可用于分析從組織到細(xì)胞的各種形態(tài)，進(jìn)而發(fā)現(xiàn)健康和非健康樣本以及對(duì)照樣品和實(shí)驗(yàn)樣品之間的差異。例如，是否存在特定細(xì)胞或它們的形態(tài)（即形狀、體積、長(zhǎng)度、面積）都是有意義的參數(shù)。熒光顯微鏡有助于識(shí)別特定標(biāo)記的細(xì)胞或細(xì)胞組分。因此，要么用轉(zhuǎn)熒光標(biāo)記基因生物，要么用免疫熒光染色。此外，某些基因和轉(zhuǎn)錄也可以通過(guò)熒光原位雜交 (Fluorescence in Situ Hybridization, FISH) 進(jìn)行可視化。3D組織成像的一個(gè)示例是，對(duì)腦部神經(jīng)元進(jìn)行成像，以確定它們的長(zhǎng)度、體積或與其它細(xì)胞的連接。例如，可以對(duì)患有局部腦缺血的模式生物制作腦部切片，以了解形態(tài)差異和細(xì)胞數(shù)量。挑戰(zhàn)首要的挑戰(zhàn)之一是使用顯微鏡初步觀察樣本。需要將樣本置于載物臺(tái)上并不斷調(diào)整三維位置以確保對(duì)樣本進(jìn)行正確成像。你從目鏡或屏幕上看到的只是樣本極小的一部分。因此，要將樣本保持在正確的焦距內(nèi)并找到正確位置，以便找到感興趣的區(qū)域，是一個(gè)非常麻煩的過(guò)程。MICA的樣本查找功能通過(guò)將樣本聚焦并生成每個(gè)相關(guān)區(qū)域的低倍率預(yù)覽圖來(lái)自動(dòng)化這個(gè)過(guò)程，這個(gè)功能可以用于整個(gè)成像過(guò)程的定位。下一個(gè)挑戰(zhàn)是設(shè)置成像參數(shù)，因此可以在看到感興趣的信號(hào)下，避免樣本遭受不必要的光漂白。這一步驟通常要同時(shí)選擇激發(fā)和接受檢測(cè)的技術(shù)參數(shù)，因?yàn)槊恳豁?xiàng)參數(shù)都會(huì)對(duì)樣本和獲得的結(jié)果產(chǎn)生不同的影響。使用MICA，您只需輕輕點(diǎn)擊一下“Live”，便可自動(dòng)完成可視化熒光所需的所有參數(shù)設(shè)置?？呻S時(shí)通過(guò)點(diǎn)擊“OneTouch”執(zhí)行這一自動(dòng)化設(shè)置來(lái)優(yōu)化當(dāng)前視圖的參數(shù)。更改顯微鏡的特定技術(shù)參數(shù)前，實(shí)驗(yàn)人員通常需要了解更改參數(shù)將產(chǎn)生的影響，但在MICA中，設(shè)置是輸出驅(qū)動(dòng)型的，也就是說(shuō)，可定義所需的輸出，然后自動(dòng)完成對(duì)應(yīng)的調(diào)整。一般而言，第一步是確定要成像的正確位置。實(shí)驗(yàn)人員需要使用目鏡了解樣本的整體概況，并記住不同的位置。數(shù)字顯微鏡可以生成樣本的概覽，這可以提供一些幫助，但實(shí)驗(yàn)人員仍然需要指出圖像中要進(jìn)一步成像的位置。MICA的Navigator工具可簡(jiǎn)化這一過(guò)程。用戶可以生成低倍或高倍的預(yù)覽，輕松定位感興趣的區(qū)域，并可以使用工具直接在圖像上標(biāo)記出感興趣的樣本區(qū)域。這樣后續(xù)高分辨率圖片就可以保存下來(lái)。高放大倍數(shù)物鏡通常需要使用浸沒(méi)式介質(zhì)，最常見(jiàn)的是水和油。水為水溶液中的成像樣品匹配了最佳的光學(xué)指數(shù)，而油為包埋的成像樣品匹配了最佳的光學(xué)指數(shù)。水浸物鏡也可用于固定式樣本，但會(huì)稍微影響成像質(zhì)量。MICA可同時(shí)滿足兩種需求。水鏡還具有全自動(dòng)化操作的額外優(yōu)勢(shì)，水的浸入可以自動(dòng)建立并維持。為進(jìn)一步提高光學(xué)質(zhì)量，一些物鏡會(huì)通過(guò)校正環(huán)來(lái)補(bǔ)償樣本板的厚度。校正環(huán)可手動(dòng)、也可自動(dòng)操作。MICA配置了自動(dòng)校正環(huán)功能，可實(shí)現(xiàn)自動(dòng)優(yōu)化。相對(duì)厚度是組織切片成像的另一大挑戰(zhàn)。厚切片會(huì)形成較多的散射光，干擾所需信號(hào)。THUNDER可減少背景模糊，為組織成像提供了一種寶貴的計(jì)算成像方法。 MICA集THUNDER于一體，可在合理的時(shí)間范圍內(nèi)確定感興趣的區(qū)域。除了類似于THUNDER的計(jì)算清除方法，共聚焦激光掃描顯微術(shù)(CLSM)等光學(xué)部分也是3D組織玻片成像的一種方法。這種方法中，可獲得性和可用性方面也是挑戰(zhàn)。除了技術(shù)設(shè)置比較復(fù)雜，共聚焦顯微鏡所需的培訓(xùn)時(shí)間一般也更長(zhǎng)。MICA集共聚焦和寬場(chǎng)成像于一體，最大程度減少了成像參數(shù)設(shè)置，縮短了所需的培訓(xùn)時(shí)間，同時(shí)也降低了操作顯微鏡的技能要求。另外，共聚焦和寬場(chǎng)成像模式的圖像設(shè)置有相同的外觀和使用感受，因此，用戶無(wú)需學(xué)習(xí)兩種系統(tǒng)的操作方法。而且，用戶可隨意在寬場(chǎng)和共聚焦兩種模式間切換而無(wú)需在兩種成像系統(tǒng)間轉(zhuǎn)移樣本?？茖W(xué)實(shí)驗(yàn)的一個(gè)關(guān)鍵方面是，改變盡可能少的變量，以確定對(duì)樣本和結(jié)果的任何影響。除了保證樣本處理相同外，另一個(gè)方面是針對(duì)激發(fā)和接收檢測(cè)成像參數(shù)相同。MICA默認(rèn)在不同項(xiàng)目中保持成像參數(shù)不變，用戶僅基于自己的需求進(jìn)行調(diào)整?？筛鶕?jù)參考圖像輕松恢復(fù)成像參數(shù)。方法三個(gè)厚度為250μm的小鼠腦部切片包含下述熒光標(biāo)記物：細(xì)胞核（DAPI，品紅色）神經(jīng)元（細(xì)胞質(zhì)GFP，青色）星形膠質(zhì)細(xì)胞（GFAP-DsRed，紅色）將切片固定于載玻片支架中（圖1）并置于載物臺(tái)上進(jìn)行成像。圖1：用于玻片成像的MICA玻片夾，例如組織切片。在樣本定義中輸入蓋玻片類型和染料等基本信息。利用這一信息，Sample Finder可以識(shí)別蓋玻片并自動(dòng)生成低倍的預(yù)覽。對(duì)整個(gè)蓋玻片的預(yù)覽可以用來(lái)識(shí)別三個(gè)組織切片，然后用Navigator工具進(jìn)行標(biāo)記。隨后無(wú)需手動(dòng)調(diào)整成像參數(shù)，便可以在20倍寬場(chǎng)模式下對(duì)標(biāo)記區(qū)域生成掃描拼接圖像。在這個(gè)放大倍數(shù)和分辨率下，就能在組織切片上識(shí)別出感興趣的區(qū)域，然后用共聚焦顯微鏡成像。此時(shí)，MICA會(huì)在相關(guān)區(qū)域切換為共聚焦模式，記錄高清晰圖像，包括三維立體圖像。定義三維立體圖像時(shí)，可以手動(dòng)或單擊鼠標(biāo)自動(dòng)設(shè)置限制。z Range Finder工具自動(dòng)確定3D圖像掃描開(kāi)始和結(jié)束部分。成像后，可借助MICA Learn & Results工具測(cè)量樹(shù)突棘。為此，使用pixel classifier在疊層投影下識(shí)別棘突。pixel classifier簡(jiǎn)單易用且功能強(qiáng)大，用戶只需使用類似于繪畫(huà)工具的繪圖工具標(biāo)記對(duì)象的示例，在這種情況下為棘突。通過(guò)訓(xùn)練模型，更好地再現(xiàn)輸入，然后提供圖像中其他對(duì)象的預(yù)覽。經(jīng)過(guò)訓(xùn)練后，就可使用模型分析圖像。結(jié)果找到載玻片預(yù)覽上單個(gè)腦部切片，然后使用Magic Wand工具進(jìn)行標(biāo)記以進(jìn)行掃描拼接。Magic Wand自動(dòng)識(shí)別組織切片的邊界并相應(yīng)地定義所需的拼接。圖2：MICA在實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)進(jìn)行完整的玻片預(yù)覽（寬場(chǎng)），便于更輕松地定位。借助該信息的信息，可找到大圖掃描拼接的感興趣區(qū)域。可使用Magic Wand工具自動(dòng)化檢測(cè)感興趣區(qū)域。MICA可同時(shí)采集最多四個(gè)熒光團(tuán)，因此相比基于濾光塊的序列成像的顯微系統(tǒng)，可有效節(jié)約用戶的時(shí)間。在單次掃描拼接中，可找到感興趣區(qū)域，并在共聚焦模式下以更高的放大倍數(shù)觀察更多的細(xì)節(jié)。二維圖像需要借助三維數(shù)據(jù)以獲得更詳細(xì)的信息。為此，z界面中定義了三維立體模式。在CLSM下進(jìn)行立體采集后（120μm厚），可在三維觀察器中可視化數(shù)據(jù)，獲得腦部樣本的更多空間信息。圖3：三維重構(gòu)CLSM。通過(guò)三維采集進(jìn)一步研究組織切片。利用獲得的三維信息，用戶可以更好地了解樣本的空間狀況，例如了解細(xì)胞間的連接。對(duì)于定量來(lái)說(shuō)，可根據(jù)三維采集信息生成最大投影來(lái)測(cè)量樣本樹(shù)突棘的平均面積。pixel classifier識(shí)別棘突，分析工具則確定面積。得到的數(shù)值可繪制成圖，以可視化數(shù)據(jù)和相關(guān)性。圖4顯示了樹(shù)突棘面積的直方圖。這些結(jié)果也可通過(guò)箱線圖的形式顯示，來(lái)比較不同的樹(shù)突棘群落（圖4）。圖4：分析。MICA不僅采集圖像，還可對(duì)它們進(jìn)行分析。為此，可使用基于人工智能技術(shù)的pixel classifier來(lái)識(shí)別相關(guān)的圖像細(xì)節(jié)。隨后，識(shí)別出的對(duì)象可以被量化并顯示在圖形中。在本示例中，樹(shù)突棘的平均面積在最大投影上測(cè)量。結(jié)論MICA是用于三維組織成像的有效工具：使用pixel classifier功能，用戶可以快速了解樣本的整體質(zhì)量，確定進(jìn)一步的操作。隨后，Navigator視圖可對(duì)組織切片進(jìn)行更深入的觀察。Magic Wand等工具用于快速定義感興趣的區(qū)域，加上4個(gè)通道的同時(shí)成像，可加快大圖掃描拼接的速度。使用新的z界面使三維采集更加簡(jiǎn)化，pixel classifier能輔助后續(xù)分析。簡(jiǎn)而言之，MICA集寬場(chǎng)成像和共聚焦成像于一個(gè)系統(tǒng)中。它可以幫助用戶在一個(gè)系統(tǒng)中完成從圖像預(yù)覽到三維細(xì)節(jié)成像再到分析的整個(gè)工作流程。參考資料：Efficient Long-term Time-lapse Microscopy, Science Lab (2022) Leica Microsystems.