- 2025-01-21 09:35:37酵母雜交文庫構(gòu)建
- 酵母雜交文庫構(gòu)建是一種基于酵母細(xì)胞的分子生物學(xué)技術(shù),用于高通量篩選基因間相互作用。該技術(shù)通過將感興趣的基因或基因片段克隆到酵母表達(dá)載體中,構(gòu)建成文庫,然后通過特定的雜交方法,使文庫中的基因與誘餌基因在酵母細(xì)胞內(nèi)表達(dá)并相互作用。通過篩選互作陽性的酵母克隆,可以快速鑒定出與目標(biāo)基因相互作用的候選基因,為后續(xù)的基因功能研究和藥物開發(fā)提供重要線索。
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酵母雜交文庫構(gòu)建產(chǎn)品
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酵母雜交文庫構(gòu)建問答
- 2025-10-15 17:04:30數(shù)字化轉(zhuǎn)型下,各類實驗室軟件如何構(gòu)建高效合規(guī)的智能生態(tài)?
- 在數(shù)字化轉(zhuǎn)型浪潮下,實驗室軟件已成為現(xiàn)代實驗室提升運營效率、規(guī)范作業(yè)流程、挖掘數(shù)據(jù)深層價值的核心支撐,不同類型的軟件聚焦特定環(huán)節(jié)痛點,協(xié)同構(gòu)建起覆蓋實驗室全場景的數(shù)字化生態(tài)體系。以下為幾種主流實驗室軟件及其核心功能詳解:?1. King's LIMS(實驗室信息管理系統(tǒng))?嚴(yán)格遵循 ISO 17025 等國際標(biāo)準(zhǔn)與行業(yè)規(guī)范,構(gòu)建樣品全生命周期的閉環(huán)管理體系。核心功能包括檢驗流程標(biāo)準(zhǔn)化管控、人機料法環(huán)全要素資源管理、合規(guī)性校驗與質(zhì)量風(fēng)險防控,以及檢測報告的自動生成。且系統(tǒng)配備多級數(shù)據(jù)審核機制與深度統(tǒng)計分析能力,確保實驗室運營合規(guī)、高效且數(shù)據(jù)全程可追溯。2. King's ELN(電子實驗記錄本)?以結(jié)構(gòu)化數(shù)字化形式全面替代傳統(tǒng)紙質(zhì)記錄,支持實驗數(shù)據(jù)直接錄入、公式自動計算、實驗步驟與結(jié)果電子化追溯,有效避免紙質(zhì)記錄易丟失、難檢索、易篡改等問題。該系統(tǒng)可與 King's LIMS 無縫集成,實現(xiàn)實驗數(shù)據(jù)與檢驗流程數(shù)據(jù)的互聯(lián)互通,進一步提升實驗室數(shù)據(jù)流轉(zhuǎn)效率。?3. King's SDMS(科學(xué)數(shù)據(jù)管理系統(tǒng))?專注于實驗室原始數(shù)據(jù)的高效管理,能夠自動采集、精準(zhǔn)存儲各類儀器生成的原始數(shù)據(jù),支持對結(jié)果數(shù)據(jù)與文件進行分類管理,打破數(shù)據(jù)孤島,為后續(xù)數(shù)據(jù)復(fù)用、深度分析與合規(guī)審計奠定堅實基礎(chǔ)。?4. King's Bl 高性能敏捷分析系統(tǒng)?聚焦實驗室數(shù)據(jù)價值挖掘,可滿足用戶在報表、數(shù)據(jù)可視化、自助探索分析、數(shù)據(jù)挖掘建模、智能分析等方面的多樣化需求,幫助用戶打破信息孤島有效整合數(shù)據(jù),提供敏捷開發(fā)能力同時快速響應(yīng)業(yè)務(wù)和管理層的數(shù)據(jù)需求,幫助實驗室實現(xiàn)數(shù)字化運營,并全流程支持。?5. King's IOT 實驗室設(shè)備及環(huán)境物聯(lián)監(jiān)控預(yù)警系統(tǒng)?依托物聯(lián)網(wǎng)技術(shù)構(gòu)建實驗室安全與環(huán)境智能管控體系,可實時采集實驗室關(guān)鍵環(huán)境參數(shù)與設(shè)備運行狀態(tài)數(shù)據(jù),通過穩(wěn)定的無線傳輸硬件將數(shù)據(jù)實時上傳至監(jiān)控平臺。平臺具備數(shù)據(jù)實時顯示、存儲與分析功能,當(dāng)監(jiān)控參數(shù)超出預(yù)設(shè)安全范圍時,可自動觸短信通知等預(yù)警機制,為科研與檢測活動提供穩(wěn)定、安全的環(huán)境保障。 數(shù)字化生態(tài)系統(tǒng)的成功運行,依賴于各模塊之間的深度互聯(lián)與數(shù)據(jù)流的閉環(huán)整合。實驗室藉此構(gòu)建出“可視、可控、可預(yù)測”的數(shù)字孿生體,在合規(guī)、效率與創(chuàng)新之間達(dá)成最優(yōu)平衡。上述系統(tǒng)各司其職又緊密協(xié)同,共同構(gòu)建起高效、合規(guī)、智能的數(shù)字化實驗室新生態(tài),推動實驗室運營邁向智能化與高效化的新階段。
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- 2023-06-16 14:28:25構(gòu)建表達(dá)載體想降本增效?看這一篇就夠了
- 想要開發(fā)有穩(wěn)定生產(chǎn)能力的細(xì)胞株,除了在細(xì)胞開發(fā)中對于細(xì)胞表達(dá)能力的評估篩選以外,前期的表達(dá)載體的構(gòu)建過程也非常重要。使用納升移液技術(shù)可以顯著提高細(xì)胞株過程基因合成,表達(dá)載體構(gòu)建以及轉(zhuǎn)染篩選等實驗的實驗效率,降低實驗成本。聲波移液展示Echo?移液系統(tǒng)依靠專 利技術(shù)(U.S. Patent 6938995)和創(chuàng)新方法改變移液操作在整個生命科學(xué)領(lǐng)域中的應(yīng)用。它采用動態(tài)液體分析(Dynamic Fluid Analysis?, DFA)技術(shù)和聲波移液(Acoustic Droplet Ejection,ADE)技術(shù),讓研究人員能夠移取多種不同類型的液體,完成微量小體積(2.5/25nL)的移液工作。全流程無需槍頭耗材,無交叉風(fēng)險。納升移液技術(shù)讓細(xì)胞株構(gòu)建更快、更準(zhǔn)、更經(jīng)濟更快—— Echo快速任意孔到任意孔移液,極速基因組裝在質(zhì)粒構(gòu)建前期,需要非常多的準(zhǔn)備實驗,如基因組裝中將不同的DNA片段混合,在檢測反應(yīng)中將不同的樣本組合,在NGS文庫構(gòu)建過程中將多個文庫pooling到一起,在CRISPr基因編輯中構(gòu)建sgRNA文庫等等,這些實驗都需要進行快速、靈活的加樣移液,就算使用高通量的移液工作站,往往也要好幾小時才能完成。納升移液技術(shù)Echo的任意孔到任意孔的快速移液特點則讓此類應(yīng)用簡單、快速化,每次轉(zhuǎn)移花費更少時間更短。這為基因組裝節(jié)省了高達(dá)82%的時間。從母板任意孔轉(zhuǎn)移任意體積樣品到目標(biāo)板任意孔中,實現(xiàn)快速挑選、樣品混合和組合。有效縮短實驗周期更準(zhǔn)—— Echo加樣精 準(zhǔn),提高克隆效率利用質(zhì)粒上含有的抗性選擇進行篩選,需要對篩選結(jié)果進行鑒定, 而qPCR也是常用的鑒定方法之一。使用Echo納升移液技術(shù)進行微量化克隆篩選鑒定,可以以更少的實際成本精 準(zhǔn)完成實驗。使用Echo完成 qPCR的反應(yīng)體系構(gòu)建,通過減少每個組件的體積,并使用不使用tips的Echo,將反應(yīng)體積縮小10倍,從10 μL減少到1 μL,成本降低了8倍。精 準(zhǔn)減小實驗體積更經(jīng)濟—— Echo微量化,縮小反應(yīng)體系,讓新技術(shù)更經(jīng)濟系統(tǒng)化的設(shè)計必然會帶來更大的樣本量,從而導(dǎo)致更高的費用, Echo采用聲波的能量進行無接觸式移液,且每滴液滴僅為2.5nL或25nL,因此可以直接省去吸頭耗材的消耗,也可以將檢測反應(yīng)體系降低4-100倍,使成本急劇下降。有效縮減試劑成本Gibson and Golden Gate Assembly實驗:不同反應(yīng)體積的成本效益和組裝效率比較產(chǎn)品信息“僅用于科研,不用于臨床診斷”
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- 2023-01-10 12:42:52貝克曼庫爾特Biomek NGeniuS與IDT文庫制備自動化解決方案
- 隨著基因組測序和數(shù)據(jù)分析方法的廣泛普及,越來越多的實驗室正在探索下一代測序(Next-Generation Sequencing,NGS)作為研究工具的可行性。然而,NGS文庫的手動制備過程單調(diào)乏味,根據(jù)所構(gòu)建文庫的類型而異,耗時從數(shù)小時到數(shù)天時間不等,并且操作過程中必須小心謹(jǐn)慎,以避免人工出錯導(dǎo)致的制備失敗,浪費寶貴樣本。Biomek NGeniuS系統(tǒng)是一款全自動文庫制備系統(tǒng),幫助我們從第 一步即確保正確無誤。DNA樣品上機,撥動轉(zhuǎn)盤,按下按鈕,運行過程無需值守,每批次可支持運行4-24任意數(shù)量的樣品,是實驗室追求靈活性和自動化的理想之選。圖1 Biomek NGeniuS全自動文庫制備系統(tǒng)IDT xGen cfDNA & FFPE DNA Library Prep Kit 便是一款支持自動化的試劑盒。該試劑盒提供高一致性的文庫制備方法,獨特的兩步連接法能夠有效抑 制接頭二聚體和模板DNA自連,因而可有效提高文庫轉(zhuǎn)換率,尤其適用于cfDNA和FFPE等低質(zhì)量樣品,有助于研究人員發(fā)現(xiàn)和表征腫瘤樣品中出現(xiàn)的低頻變異位點。圖2 IDT xGen cfDNA & FFPE DNA Library Prep Kit工作流程我們使用Biomek NGeniuS系統(tǒng)對三種不同類型的樣品,cfDNA、FFPE和gDNA,分別構(gòu)建24個、10個和4個文庫。cfDNA 樣品所得文庫平均濃度為16.67ng/μL。cfDNA樣品連接后擴增片段平均長度為362bp,長度分布一致且呈正態(tài)。與參考基因組相比,該樣品組從NGeniuS實驗中獲得的所有文庫比對率為99.49%,配對的reads比對到參考基因組的比對率為99.84%。23份樣品中reads平均重復(fù)率為0.46%。圖3 以cfDNA為起始樣品,在Biomek NGeniuS 系統(tǒng)上使用IDT xGen cfDNA & FFPE DNA Library Prep Kit所制備文庫的分析結(jié)果。FFPE樣品構(gòu)建的文庫平均片段長度為378 bp,長度呈正態(tài)分布。與參考基因組相比,該樣品組從NGeniuS實驗中獲得的所有文庫比對率為99.8%,配對的reads比對到參考基因組的比對率為99.84%。10份樣品中reads平均重復(fù)率為0.37%。圖4 以FFPE DNA為起始樣品,在Biomek NGeniuS 系統(tǒng)上使用IDT xGen cfDNA & FFPE DNA Library Prep Kit所制備文庫的分析結(jié)果。gDNA樣品制備的文庫平均片段長度為391bp,長度分布與 IDT xGen cfDNA & FFPE DNA Library Prep Kit 的預(yù)期一致。與參考基因組相比,該樣品組從 NGeniuS實驗中獲得的所有文庫的比對率為99.2%,配對的reads比對到參考基因組的比對率為99.3%。3份樣品中reads平均重復(fù)率為0.56%。圖5 以gDNA為起始樣品,在Biomek NGeniuS 系統(tǒng)上使用IDT xGen cfDNA & FFPE DNA Library Prep Kit所制備文庫的分析結(jié)果。在Biomek NGeniuS全自動文庫制備系統(tǒng)上使用IDT xGen cfDNA & FFPE DNA Library Prep kit構(gòu)建文庫,所得文庫片段大小分布一致,并符合IDT xGen cfDNA & FFPE DNA Library Prep Kit說明書建議的文庫大小范圍。對三種不同濃度的樣品重復(fù)進行測序,結(jié)果表明,平均文庫大小為362~391bp。所獲文庫比對率>99.2%,配對的reads比對到參考基因組的比對率>99.3%,重復(fù)率
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- 2022-11-21 10:19:06“沃”的實驗 | 13份動物模型構(gòu)建方法系列資料上新,造模不再難!
- 在做基礎(chǔ)研究時加入動物實驗不僅會使研究工作更完善,也會提高投稿的命中率,但是想把實驗做成功卻不是件容易的事兒,因為在動物造模中總遇到各種難題:搞不清動物建模標(biāo)準(zhǔn)化的流程,做起實驗磕磕絆絆造模需要注意的細(xì)節(jié)多,反復(fù)摸索十幾遍才造模成功明明按照文獻(xiàn)中的實驗方法造模,卻還老是不成功“沃”的實驗全網(wǎng)最全的生命科學(xué)研究線上學(xué)習(xí)平臺第二期內(nèi)容:常見疾病動物模型——構(gòu)建方法系列2幫助大家解決造模中遇到的難題第二期內(nèi)容有什么?“沃”的實驗——全網(wǎng)最全的生命科學(xué)研究線上學(xué)習(xí)平臺第二期內(nèi)容,為大家分享常見疾病動物模型構(gòu)建方法,涵蓋8大視頻課程+2大實驗手冊+3大建模的標(biāo)準(zhǔn)操作流程。5位老師線上為你講解不同動物模型的背景、造模方法等內(nèi)容,理論結(jié)合實踐,希望能給大家的動物建模帶來更多新思路和新靈感。點擊鏈接,即可進入學(xué)習(xí) 8大視頻課程 2大實驗手冊 3大建模的標(biāo)準(zhǔn)操作流程歡迎大家收藏「“沃”的實驗」線上學(xué)習(xí)平臺學(xué)習(xí)平臺,內(nèi)容將持續(xù)更新下期內(nèi)容預(yù)告: 實驗動物手術(shù)操作-手術(shù)方法
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- 2022-04-18 13:45:53Neuron:北大李毓龍課題組構(gòu)建一種全新的ATP熒光探針
- 文章概述三磷酸腺苷(Adenosine 50-triphosphate,ATP)是一種廣泛存在于體內(nèi)的能量存儲分子。除了參與細(xì)胞內(nèi)的能量代謝功能外,越來越多的證據(jù)表明,釋放到細(xì)胞外空間的ATP可以作為一種分子信號(嘌呤能遞質(zhì)),能夠結(jié)合并激活離子型P2X受體以及代謝型P2Y受體。在神經(jīng)系統(tǒng)中,釋放的ATP參與了多中生理病理過程,包括痛覺感受、機械/化學(xué)感知信號轉(zhuǎn)導(dǎo)、突觸傳遞、損傷、炎癥等。對于ATP在這些生理過程中的作用,目前的研究并未完全闡明。為了進一步研究ATP的生理功能,2021年12月22日,北京大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院李毓龍教授團隊發(fā)表在《Neuron》期刊上發(fā)表題為“A sensitive GRAB sensor for detecting extracellular ATP in vitro and in vivo”的研究論文,該項工作展示了團隊最新開發(fā)的一種可遺傳編碼的熒光分子探針——GRABATP1.0(簡稱ATP1.0;GRAB:G protein-coupled receptor activation-based sensors),該探針以P2Y受體作為ATP的結(jié)合支架,能夠?qū)?xì)胞外的ATP進行高靈敏度、高選擇性以及高時空分辨率的實時測量。該項工作是李毓龍教授團隊在相繼開發(fā)了乙酰膽堿、多巴胺、去甲腎上腺素、血清素和腺苷等一系列分子探針之后的后又一重要成果,對于我們深入研究并理解ATP的生理功能具有重要意義。核心觀點1、ATP1.0是一個可遺傳編碼的細(xì)胞外ATP感受器;2、ATP1.0對于細(xì)胞外ATP具有高敏感性和高時空分辨率;3、ATP1.0可用于離體以及在體ATP釋放的實時監(jiān)測。研究結(jié)果分析1. ATP1.0表現(xiàn)出卓越的細(xì)胞外ATP檢測性能為了開發(fā)一個遺傳編碼的ATP熒光探針,研究者首先系統(tǒng)地篩選了能夠被ATP激活的G蛋白耦合受體(G protein-coupled receptors, GPCRs),包括人源的P2Y1、P2Y2、P2Y4、P2Y11、P2Y12和P2Y13等。以這些GPCRs作為支架,研究者將結(jié)構(gòu)敏感的綠色熒光蛋白(circularly permuted enhanced GFP, cpEGFP)插入到這些受體結(jié)構(gòu)中。其中hP2Y1在插入cpEGFP后表現(xiàn)出最佳的膜轉(zhuǎn)運和對ATP的響應(yīng)性,因此隨后研究者選擇了基于hP2Y1的嵌合體ATP0.1進行進一步優(yōu)化,并且最終得到了對ATP熒光響應(yīng)性最 好的ATP1.0。當(dāng)ATP1.0在HEK293T細(xì)胞中表達(dá)時,它能夠很好的被運輸?shù)郊?xì)胞膜上表達(dá),并對細(xì)胞外100mM的ATP產(chǎn)生一個~500%的dF/F0峰值。在特異性方面,ATP1.0對細(xì)胞外ATP的反應(yīng)能夠被P2Y1的拮抗劑MRS-2500阻斷。ATP1.0對其它遞質(zhì)不會產(chǎn)生反應(yīng),包括谷氨酸、GABA、甘氨酸、多巴胺、去甲腎上腺素、血清素、組胺和乙酰膽堿等,對二磷酸腺苷(Adenosine Diphosphate, ADP)的反應(yīng)與ATP類似,但是對于其它結(jié)構(gòu)類似的嘌呤能分子或衍生物,如一磷酸腺苷、腺苷、二磷酸尿核苷等幾乎不產(chǎn)生反應(yīng)。ATP1.0的反應(yīng)具有快速動力學(xué)的特征,其反應(yīng)平均上升時間常數(shù)約為28 ms,平均衰減時間常數(shù)約為283 ms。在熒光強度上,ATP1.0被ATP激活時的亮度達(dá)到了直接表達(dá)hP2Y1-EGFP融合蛋白熒光強度的64%,并且ATP1.0在單光子激發(fā)下的光譜與EGFP相似,激發(fā)峰在500 nm,發(fā)射峰在520 nm。在與其它細(xì)胞外ATP分子探針的比較中,ATP1.0表現(xiàn)出更大的動態(tài)檢測范圍、更強的熒光反應(yīng)、以及更低的信噪比。接下來,研究者探討了ATP1.0在原代培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元中的表達(dá)能力以及反應(yīng)性。ATP1.0能夠廣泛的表達(dá)到星形膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元的細(xì)胞上,包括胞體、突起等部位。表達(dá)到星形膠質(zhì)細(xì)胞和神經(jīng)元上的ATP1.0對細(xì)胞外ATP均有較好的反應(yīng),其平均dF/F0峰值分別約為1000%和780%。此外,ATP誘導(dǎo)的熒光反應(yīng)也能夠被P2Y1、受體拮抗劑MRS-2500阻斷。此外,與HEK293T中結(jié)果相似,神經(jīng)元中表達(dá)的ATP1.0對ATP和ADP均有反應(yīng),但對一磷酸腺苷、腺苷、二磷酸尿核苷均無反應(yīng)。更重要的是,ATP1.0在細(xì)胞表面非常穩(wěn)定,在給予10mM 的ATP 兩小時后,表達(dá)ATP1.0的神經(jīng)元的熒光沒有出現(xiàn)明顯下降。綜上所述,ATP1.0能夠適用于多種類型的細(xì)胞,對細(xì)胞外的ATP產(chǎn)生高靈敏度、高選擇性和高穩(wěn)定性的熒光增強反應(yīng)。2. ATP1.0可用于監(jiān)測體外培養(yǎng)細(xì)胞外的ATP水平接下來,研究者測試了ATP1.0是否能夠用于檢測神經(jīng)-膠質(zhì)共培養(yǎng)細(xì)胞中內(nèi)源性ATP的釋放。在大腦中,機械刺激和細(xì)胞腫脹均能誘發(fā)胞內(nèi)ATP被釋放。在表達(dá)ATP1.0的細(xì)胞中,給予細(xì)胞機械刺激(利用玻璃微電極按壓某個細(xì)胞),能夠引起一個快速、局部增強的dF/F0信號,反映了ATP的釋放。為了誘導(dǎo)細(xì)胞腫脹,研究者將細(xì)胞浸泡在低滲溶液(130 mOsm/kg)中;在1min內(nèi),dF/F0信號顯著增加。并且在應(yīng)用MRS-2500后,這兩種刺激引起的反應(yīng)都被完全抑制。研究者還發(fā)現(xiàn),低滲刺激誘導(dǎo)的ATP釋放可能不需要依賴經(jīng)典的SNARE囊泡釋放機制,因為細(xì)胞表達(dá)了破傷風(fēng)毒素輕鏈(tetanus toxin light chain, TeNT,可以切割突觸短肽并阻止胞外分泌過程),但是對低滲刺激誘導(dǎo)的反應(yīng)沒有影響;而作為對照,表達(dá)TeNT阻斷了低滲刺激誘發(fā)的谷氨酸釋放。除了刺激誘發(fā)的ATP釋放外,研究者還觀察到,即使在沒有外部刺激的情況下,神經(jīng)-膠質(zhì)共培養(yǎng)細(xì)胞中也存在自發(fā)、局部、以及短暫的ATP1.0信號。在1.6mm2成像視野中,這些自發(fā)事件以1.2次/min的速率出現(xiàn),其dF/F0的平均峰值約為210%。ATP自發(fā)釋放的平均上升時間約為11s,衰減時間約為43s,其釋放范圍的平均直徑約為32mm。為了確保ATP1.0信號反映了細(xì)胞外的ATP動態(tài)變化,研究者利用三磷酸腺苷雙磷酸酶(ATP的水解酶)對細(xì)胞進行處理并成像,觀察到三磷酸腺苷雙磷酸酶能夠顯著阻斷自發(fā)事件的發(fā)生。與以前的檢測手段相比,ATP1.0具備更高的靈敏度,能夠在普通條件下特異性的檢測ATP的釋放。3. ATP1.0可用于監(jiān)測斑馬魚幼體中ATP的動態(tài)變化在證明了ATP1.0可用于體外ATP的檢測后,研究者接著探討了它是否可以用于監(jiān)測體內(nèi)(如斑馬魚中)ATP的動態(tài)變化。在斑馬魚幼體神經(jīng)元中特異性地表達(dá)ATP1.0后,利用ATP局部處理會引起視頂蓋中dF/ F0信號出現(xiàn)強烈的瞬時增加,這些信號能夠被MRS-2500阻斷。在驗證了ATP1.0能夠?qū)ν庠碅TP做出反應(yīng)后,研究者進一步探討了ATP1.0是否能夠用于檢測活斑馬魚內(nèi)源性ATP的釋放。ATP信號在促進小膠質(zhì)細(xì)胞向損傷部位遷移中發(fā)揮關(guān)鍵作用。在表達(dá)ATP1.0的斑馬魚中,研究者發(fā)現(xiàn)激光消融誘導(dǎo)視頂蓋損傷后會導(dǎo)致熒光增強,其反應(yīng)從損傷部位向外呈放射狀傳播。損傷后11s和64s釋放ATP的范圍,其平均直徑分別為~23mm和~34mm。接下來,研究者通過在斑馬魚的視頂葉中表達(dá)ATP1.0,同時監(jiān)測ATP的釋放和小膠質(zhì)細(xì)胞的遷移,斑馬魚的小膠質(zhì)細(xì)胞用紅色熒光蛋白DsRed標(biāo)記。研究者們發(fā)現(xiàn),在激光消融后,小膠質(zhì)細(xì)胞沿著ATP傳播路徑逐漸遷移到損傷部位。因此,ATP1.0非常適用于活體斑馬魚幼蟲ATP監(jiān)測,并且具有較高的時空分辨率。4. ATP1.0可用于監(jiān)測小鼠全身炎癥引起的ATP局部釋放ATP是應(yīng)對機體急慢性炎癥反應(yīng)的關(guān)鍵細(xì)胞外信使,但是在全身炎癥期間ATP釋放的模式還不清楚。研究者在小鼠腹腔注射細(xì)菌脂多糖(lipopolysaccharides, LPS)誘導(dǎo)全身炎癥,并通過雙光子顯微鏡來觀察直接觀察視覺皮層ATP1.0的熒光反應(yīng)。注射LPS 24小時后,研究者觀察到皮質(zhì)內(nèi)多次ATP局部釋放事件,在記錄的20min內(nèi),其發(fā)生頻率約為5 – 10次/min。在星形膠質(zhì)細(xì)胞中,ATP釋放的上升時間相對較快(
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