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LS18平鋪光片顯微鏡成像案例—脂肪組織神經(jīng)和血管的3D重構(gòu)

  • 脂肪組織在機(jī)體能量穩(wěn)態(tài)調(diào)控和體溫調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要的作用。脂肪組織由不同類型的脂肪細(xì)胞以及脂肪細(xì)胞前體、免疫細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、血管和神經(jīng)投射物組成。目前分析脂肪組織的免疫組織化學(xué)和免疫熒光方法主要是基于對具有相對高倍率成像的薄切片。然而,這種方法存在著明顯的局限性。首先,復(fù)雜的絲狀結(jié)構(gòu),如交感神經(jīng)和脈管系統(tǒng),已知在脂肪功能中起著重要的作用,薄切片僅捕獲一小部分組織,這可能導(dǎo)致結(jié)論因分析的組織部分不同而產(chǎn)生差異,很難通過薄切片進(jìn)行評估。其次,由于脂肪組織獨(dú)特的無定形形態(tài)特征,很難僅根據(jù)切片染色來評估脂肪組織的三維結(jié)構(gòu)。鑒于這些因素,非常需要一種可提供整個脂肪組織的三維可視化并且保持高分辨率的方法。

     

    锘海生命科學(xué)自主研發(fā)的平鋪光片顯微鏡具有三維成像速度快、對比度高、低光毒性、低光漂白等諸多優(yōu)點(diǎn)。此外,依托于顯微鏡測樣服務(wù)工作積累的豐富的組織透明化、組織免疫熒光染色及成像經(jīng)驗(yàn),锘海生命科學(xué)自主研發(fā)出了快速高效的锘海組織透明化試劑盒,大大提高樣本組織透明化的效率,為廣大科研工作者提供一套更為專業(yè)、完整的服務(wù)解決方案!

     

    我們使用TH對脂肪組織的神經(jīng)進(jìn)行標(biāo)記,如下圖1、2所示,為小鼠附睪脂肪神經(jīng)成像3D重構(gòu)結(jié)果。該脂肪組織大小為6.0x8.5x2.5 mm,成像分辨率為橫向4 μm,縱向10 μm,成像時長僅4分鐘。

    圖1 小鼠附睪脂肪組織神經(jīng)成像


    圖2 小鼠附睪脂肪組織神經(jīng)成像(局部圖)


    我們使用SM22對脂肪組織的大血管進(jìn)行標(biāo)記,如下圖3、4所示,為小鼠附睪脂肪組織大血管成像3D重構(gòu)結(jié)果。該脂肪組織大小為6.0x8.5x4.0 mm,成像分辨率為橫向2 μm,縱向10 μm,成像時長僅10分鐘。

    圖3 小鼠附睪脂肪組織大血管成像


    圖4 小鼠附睪脂肪組織大血管成像(局部圖)


    參考文獻(xiàn):

    [1] Chi J, Crane A, Wu Z, Cohen P. Adipo-Clear: A Tissue Clearing Method for Three-Dimensional Imaging of Adipose Tissue. J Vis Exp. 2018 Jul 28;(137):58271. doi: 10.3791/58271. PMID: 30102289; PMCID: PMC6126572.

    [2] Wang P, Loh KH, Wu M, Morgan DA, Schneeberger M, Yu X, Chi J, Kosse C, Kim D, Rahmouni K, Cohen P, Friedman J. A leptin-BDNF pathway regulating sympathetic innervation of adipose tissue. Nature. 2020 Jul;583(7818):839-844. doi: 10.1038/s41586-020-2527-y. Epub 2020 Jul 22. PMID: 32699414.

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LS18平鋪光片顯微鏡成像案例—脂肪組織神經(jīng)和血管的3D重構(gòu)

脂肪組織在機(jī)體能量穩(wěn)態(tài)調(diào)控和體溫調(diào)節(jié)中發(fā)揮著重要的作用。脂肪組織由不同類型的脂肪細(xì)胞以及脂肪細(xì)胞前體、免疫細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、血管和神經(jīng)投射物組成。目前分析脂肪組織的免疫組織化學(xué)和免疫熒光方法主要是基于對具有相對高倍率成像的薄切片。然而,這種方法存在著明顯的局限性。首先,復(fù)雜的絲狀結(jié)構(gòu),如交感神經(jīng)和脈管系統(tǒng),已知在脂肪功能中起著重要的作用,薄切片僅捕獲一小部分組織,這可能導(dǎo)致結(jié)論因分析的組織部分不同而產(chǎn)生差異,很難通過薄切片進(jìn)行評估。其次,由于脂肪組織獨(dú)特的無定形形態(tài)特征,很難僅根據(jù)切片染色來評估脂肪組織的三維結(jié)構(gòu)。鑒于這些因素,非常需要一種可提供整個脂肪組織的三維可視化并且保持高分辨率的方法。

 

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圖1 小鼠附睪脂肪組織神經(jīng)成像


圖2 小鼠附睪脂肪組織神經(jīng)成像(局部圖)


我們使用SM22對脂肪組織的大血管進(jìn)行標(biāo)記,如下圖3、4所示,為小鼠附睪脂肪組織大血管成像3D重構(gòu)結(jié)果。該脂肪組織大小為6.0x8.5x4.0 mm,成像分辨率為橫向2 μm,縱向10 μm,成像時長僅10分鐘。

圖3 小鼠附睪脂肪組織大血管成像


圖4 小鼠附睪脂肪組織大血管成像(局部圖)


參考文獻(xiàn):

[1] Chi J, Crane A, Wu Z, Cohen P. Adipo-Clear: A Tissue Clearing Method for Three-Dimensional Imaging of Adipose Tissue. J Vis Exp. 2018 Jul 28;(137):58271. doi: 10.3791/58271. PMID: 30102289; PMCID: PMC6126572.

[2] Wang P, Loh KH, Wu M, Morgan DA, Schneeberger M, Yu X, Chi J, Kosse C, Kim D, Rahmouni K, Cohen P, Friedman J. A leptin-BDNF pathway regulating sympathetic innervation of adipose tissue. Nature. 2020 Jul;583(7818):839-844. doi: 10.1038/s41586-020-2527-y. Epub 2020 Jul 22. PMID: 32699414.

2022-11-03 10:04:33 239 0
LS18光片顯微鏡成像案例--超長脊柱樣本3D重構(gòu)

眾所周知,脊柱是身體的支柱,那么你了解脊柱具體由哪些結(jié)構(gòu)組成嗎?脊柱與脊髓之間又有什么關(guān)聯(lián)呢?



一.脊柱的結(jié)構(gòu)與功能



脊柱分頸椎、胸椎和腰椎,頸椎有生理前曲,胸椎后曲,腰椎前曲。簡單來說,脊柱從側(cè)位看,呈S狀,此形狀可以很好地吸收人體走路、跑跳帶來的沖擊和震蕩。


圖1 脊柱結(jié)構(gòu)圖



脊柱由脊椎骨及椎間盤構(gòu)成,是一相當(dāng)柔軟又能活動的結(jié)構(gòu)。隨著身體的運(yùn)動載荷,脊柱的形狀可有相當(dāng)大的改變。脊柱的活動取決于椎間盤的完整,相關(guān)脊椎骨關(guān)節(jié)突間的和諧。


脊柱具有支持軀干、保護(hù)內(nèi)臟、保護(hù)脊髓進(jìn)行運(yùn)動的功能。 脊柱內(nèi)部自上而下形成一條縱行的脊管,內(nèi)有脊髓。
 



二.脊髓的結(jié)構(gòu)與功能


脊髓(Madulla spinalis)是zhongshu神經(jīng)的低級部分,由胚胎時期神經(jīng)管的后部發(fā)育而成,仍保持節(jié)段性。脊髓發(fā)出脊神經(jīng)分布于軀干和四肢,是軀干和四肢的初級反射zhongshu;內(nèi)含許多上、下行傳導(dǎo)束,與腦部各級神經(jīng)有著廣泛的聯(lián)系,是聯(lián)系軀體和腦部的樞紐,在正常情況下,脊髓的活動總是在腦的控制下進(jìn)行的。
脊髓位于脊柱的椎管內(nèi),上端與腦相連,下端與DY腰椎下緣平齊。脊髓是腦與軀體、內(nèi)臟之間的聯(lián)系通道。
(1)脊髓的結(jié)構(gòu)
從脊髓的橫切面可以看出,脊髓包括灰質(zhì)和白質(zhì)兩部分?;屹|(zhì)在ZY,呈蝶形;白質(zhì)在灰質(zhì)的周圍。白質(zhì)內(nèi)的神經(jīng)纖維在脊髓各部分之問以及脊髓和腦之間,起著聯(lián)系作用。


圖2 脊髓結(jié)構(gòu)圖




(2)脊髓的功能
反射功能:人的脊髓灰質(zhì)里有許多低級反射,可以完成一些基本的反射活動,如膝跳反射、排便反射等。但是,脊髓里的神經(jīng)是受大腦控制的。
傳導(dǎo)功能:脊髓能對外界或體內(nèi)的刺激產(chǎn)生有規(guī)律的反應(yīng),還能將這些刺激的反應(yīng)傳導(dǎo)到大腦。反之,腦的活動也要通過脊髓才能傳遞到身體各部位。因此脊髓是腦與軀干、內(nèi)臟之間聯(lián)系的通道。
 



三.平鋪光片顯微鏡下的脊柱連脊髓樣本3D重構(gòu)
LS18光片顯微鏡不僅可以對腦,心,肝,脾,肺,腎,卵巢等軟的小組織樣本進(jìn)行成像,它同樣可以對超過2cm的超長樣本組織進(jìn)行成像,如連脊髓,小鼠骨架,小鼠小腸,小鼠長脊柱等等。如下圖3所示,為小鼠的脊柱樣本血管成像3D重構(gòu)結(jié)果。該脊柱整體長約6cm,成像分辨率為橫向3.3μm,縱向7μm,整個樣本成像時長約7小時。

 圖 3 小鼠長脊柱血管整體3D重構(gòu)




圖4 局部細(xì)節(jié)展示(XY面層切)




圖5 局部細(xì)節(jié)展示(XZ面層切)



锘海生命科學(xué)不僅自主研發(fā)出專門對大樣本組織成像的平鋪光片顯微鏡,同時還依托于顯微鏡測樣服務(wù)工作積累了豐富的組織透明化、組織免疫熒光染色及成像經(jīng)驗(yàn),甚至我們的工程師還精心優(yōu)化了透明化樣本制備配方,自主研發(fā)出快速GX锘海組織透明化試劑盒,如圖6所示,它可適用于不同的樣本組織類型,大大提高樣本組織透明化的效率,從更專業(yè)的角度為廣大科研工作者制定一套完整的服務(wù)解決方案,助力每一位生命科學(xué)工作者完成使命!锘海生命科學(xué),助力科研人真正地回歸科學(xué)!

圖6 锘海組織透明化試劑盒




锘海一站式科研服務(wù)——讓科研變得更簡單
锘海生命科學(xué)為廣大客戶提供專業(yè)的生物組織透明化、免疫染色、平鋪光片顯微鏡3D熒光成像、數(shù)據(jù)分析、數(shù)據(jù)存儲等一站式科研服務(wù),旨在通過JZ、快速、多樣化的科研服務(wù)為每一位生命科學(xué)工作者提供個體化/定制化的解決方案。



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2021-08-16 15:57:30 527 0

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