本文由 東莞市譜標(biāo)實驗器材科技有限公司 整理匯編

2013-11-11 00:00 823閱讀次數(shù)

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• 免疫沉淀的改進(jìn)方法

  免疫沉淀的改進(jìn)方法[詳細(xì)]

  2013-11-11 00:00

  其它

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• 免疫沉淀技術(shù)的應(yīng)用

  上海金穗生物公司是一家專業(yè)經(jīng)營生物試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、試劑耗材的公司，生物引擎在廣大用戶的幫助和支持下，經(jīng)過不懈的努力，已成為國內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一，主要經(jīng)營ELISA試劑盒、細(xì)胞、血清、抗體、金標(biāo)試劑盒、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗等產(chǎn)品，產(chǎn)品暢銷國內(nèi)大部分地區(qū)，銷售額逐年穩(wěn)步提高。上海金穗生物公司擁有雄厚的實力、合理的價格和優(yōu)良的服務(wù)，能夠及時解決和滿足客戶的各方面的需求，公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國，在同行獲得一致好評。www.shjsbio.com[詳細(xì)]

  2018-10-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 免疫沉淀的實驗過程

  上海金穗生物公司是一家專業(yè)經(jīng)營生物試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、試劑耗材的公司，生物引擎在廣大用戶的幫助和支持下，經(jīng)過不懈的努力，已成為國內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一，主要經(jīng)營ELISA試劑盒、細(xì)胞、血清、抗體、金標(biāo)試劑盒、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗等產(chǎn)品，產(chǎn)品暢銷國內(nèi)大部分地區(qū)，銷售額逐年穩(wěn)步提高。上海金穗生物公司擁有雄厚的實力、合理的價格和優(yōu)良的服務(wù)，能夠及時解決和滿足客戶的各方面的需求，公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國，在同行獲得一致好評。www.shjsbio.com[詳細(xì)]

  2018-10-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 免疫沉淀實驗注意事項

  1.用于一般免染的抗體是否都可以用作免疫沉淀實驗？答：抗體的性質(zhì)對免疫沉淀實驗影響很大。抗體不同，和抗原以及ProteinG或ProteinA的結(jié)合能力也就不同。所以一般免染能結(jié)合的抗體未必能用于IP反應(yīng)。一般來說，多抗是沉淀反應(yīng)**的選擇。另外，純化的單抗、腹水和雜交瘤上清液也可用于免疫沉淀。2.為什么溶解抗原的緩沖液中要加入一定量的蛋白酶YZ劑？答：從活性細(xì)胞裂解出來的樣品中，往往含有一定量的蛋白酶。為防止預(yù)檢測蛋白的分解，修飾，溶解抗原的緩沖液必須加蛋白每YZ劑，并且在低溫下進(jìn)行實驗。3.溶解抗原的緩沖液的配制需要注意什么？答：多數(shù)的抗原是細(xì)胞構(gòu)成的蛋白，特別是骨架蛋白，緩沖液必須要使其溶解。為此，必須使用含有強表面活性劑的緩沖液，盡管它有可能影響一部分抗原抗體的結(jié)合。另一面，如用弱表面活性劑溶解細(xì)胞，就不能充分溶解細(xì)胞蛋白。即便溶解也產(chǎn)生與其它的蛋白結(jié)合的結(jié)果，抗原決定族被封閉，影響與抗體的結(jié)合。4.免疫沉淀實驗應(yīng)如何把握抗體和緩沖液的比例？答：每次沉淀實驗之前，考慮抗體/緩沖液的比例十分重要?？贵w過少就不能檢出抗原，過多則就不能沉降在beads上，殘存在上清；緩沖劑太少則不能溶解抗原，過多則抗原被稀釋。具體比例視具體情況而定。5.免疫沉淀應(yīng)該如何配制細(xì)胞裂解液？答：適當(dāng)?shù)募?xì)胞裂解液的選擇取決于所要研究蛋白的特性。TritonX-100,NP40是非離子界面活性劑，作用溫和;DOC（sodiumde-oxycholate），SDS是離子性的強活性劑。所以裂解液的配制時所用去污劑的種類和濃度以及鹽濃度等條件需實驗者進(jìn)行優(yōu)化。注意如果忘記加TritonX-100，只加DOC或SDS，可能使抗體完全失去活性。[詳細(xì)]

  2018-09-02 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 乳制品中三聚氰胺檢測方法的改進(jìn)

  乳制品中三聚氰胺檢測方法的改進(jìn)[詳細(xì)]

  2014-11-13 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 引伸計的測量原理及其改進(jìn)方法

  引伸計的測量原理及其改進(jìn)方法[詳細(xì)]

  2024-09-21 20:04

  其它

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• 鹽酸林可霉素滴眼液測定方法的改進(jìn)

  鹽酸林可霉素滴眼液測定方法的改進(jìn)[詳細(xì)]

  2024-09-24 00:17

  產(chǎn)品樣冊

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• 大鼠非酒精性脂肪肝造模方法的改進(jìn)

  大鼠非酒精性脂肪肝造模方法的改進(jìn)[詳細(xì)]

  2014-08-19 00:00

  操作手冊

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• 植物類食品中粗纖維測定方法的改進(jìn)

  植物類食品中粗纖維測定方法的改進(jìn)[詳細(xì)]

  2008-07-25 00:00

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• 改進(jìn)的消解和冷卻方法測定COD.

  改進(jìn)的消解和冷卻方法測定COD.[詳細(xì)]

  2012-10-12 00:00

  其它

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• 污水中氨氮測定方法的改進(jìn)

  污水中氨氮測定方法的改進(jìn)[詳細(xì)]

  2024-09-11 17:56

  報價單

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• 滬鼎生物免疫沉淀技術(shù)服務(wù)流程

  免疫沉淀反應(yīng)主要用于抗原或者抗體的定性檢測。其原理是指可溶性抗原與相應(yīng)抗體在有電解質(zhì)存在的情況下，按適當(dāng)比例所形成的可見沉淀物現(xiàn)象。據(jù)此現(xiàn)象設(shè)計的沉淀實驗主要包括絮狀沉淀試驗，環(huán)狀沉淀試驗和凝膠內(nèi)的沉淀試驗。凝膠內(nèi)的沉淀試驗依所用的實驗方法又可分為免疫擴散實驗和免疫電泳技術(shù)2類。免疫共沉淀是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。其基本原理是:細(xì)胞裂解液中加入抗體，與抗原形成特異免疫復(fù)合物，經(jīng)過洗脫，收集免疫復(fù)合物，然后進(jìn)行SDS-PAGE及Westernblotting分析。免疫沉淀操作流程（以ProteinAAgarose方法為例）：一、蛋白樣品的準(zhǔn)備1.對于10厘米細(xì)胞培養(yǎng)皿中的貼壁細(xì)胞，吸除細(xì)胞培養(yǎng)液，PBS洗滌一次，然后加入500微升至2毫升細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞。2.對于組織樣品參考貼壁細(xì)胞使用裂解液的比例進(jìn)行裂解。3.對于懸浮細(xì)胞，離心收集細(xì)胞后，PBS洗滌一次，然后參考貼壁細(xì)胞的裂解方法進(jìn)行裂解。二、去除非特異性結(jié)合1.取200微升至1毫升蛋白樣品，蛋白量約為200微克至1毫克，加入約1微克和免疫沉淀時使用的IgG種屬相同的普通IgG和20微升充分重懸的ProteinAAgarose，4℃緩慢搖動30分鐘至2小時。2.2500rpm(約1000g)離心5分鐘，取上清用于后續(xù)的免疫沉淀。三、免疫沉淀1.加入0.2-2微克用于免疫沉淀的一抗，4℃緩慢搖動放置一個晚上。2.再加入20微升充分重懸的ProteinAAgarose，4℃緩慢搖動1-3個小時。3.2500rpm(約1000g)離心5分鐘，或瞬時高速離心，小心吸除上清，注意寧可留下少量上清也不能吸掉ProteinAAgarose。4.用準(zhǔn)備蛋白樣品時的裂解液或PBS洗滌沉淀5次，裂解液或PBS的用量每次為0.5-1毫升。洗滌時離心條件和吸除上清的要求同上面的步驟。5.完成Z后一次洗滌后，去除上清，加入20-40微升1XSDS-PAGE電泳上樣緩沖液Vortex重懸沉淀，瞬時高速離心把樣品離心至管底。6.100℃或沸水浴處理3-5分鐘，取部分或全部樣品用于SDS-PAGE電泳，暫時不用的樣品可以-20℃保存。免疫共沉淀：參考免疫沉淀的方法進(jìn)行，但免疫共沉淀(co-IP)通常必須使用未經(jīng)凍存的新鮮蛋白樣品。普通的免疫沉淀雖然可以使用凍存的蛋白樣品，但也宜用新鮮的蛋白樣品為佳。[詳細(xì)]

  2024-10-03 09:26

  產(chǎn)品樣冊

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• 氟離子檢測方法的改進(jìn)及離子色譜法的應(yīng)用

  氟離子檢測方法的改進(jìn)及離子色譜法的應(yīng)用[詳細(xì)]

  2008-12-12 00:00

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• 微量季銨鹽的改進(jìn)方法測定與研究

  微量季銨鹽的改進(jìn)方法測定與研究[詳細(xì)]

  2015-08-21 00:00

  操作手冊

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  室內(nèi)空氣中TVOC檢測方法的問題與改進(jìn)[詳細(xì)]

  2012-03-13 00:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 室內(nèi)空氣中TVOC檢測方法的問題與改進(jìn)

  室內(nèi)空氣中TVOC檢測方法的問題與改進(jìn)[詳細(xì)]

  2012-09-07 00:00

  選購指南

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  氧化法檢驗鋼奧氏體晶粒度方法的改進(jìn)[詳細(xì)]

  2015-08-19 00:00

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• 高錳酸鹽指數(shù)測定方法改進(jìn)前后的比對分析

  高錳酸鹽指數(shù)測定方法改進(jìn)前后的比對分析[詳細(xì)]

  2024-10-09 16:59

  其它

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  淺談高錳酸鹽指數(shù)監(jiān)測方法及其改進(jìn)[詳細(xì)]

  2014-11-13 00:00

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  織物耐摩擦色牢度影響因素和改進(jìn)方法[詳細(xì)]

  2015-06-18 00:00

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