本文由 上海金穗生物科技有限公司 整理匯編

2018-10-08 10:00 258閱讀次數(shù)

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• 免疫沉淀的實(shí)驗(yàn)過(guò)程

  上海金穗生物公司是一家專業(yè)經(jīng)營(yíng)生物試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、試劑耗材的公司，生物引擎在廣大用戶的幫助和支持下，經(jīng)過(guò)不懈的努力，已成為國(guó)內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一，主要經(jīng)營(yíng)ELISA試劑盒、細(xì)胞、血清、抗體、金標(biāo)試劑盒、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗等產(chǎn)品，產(chǎn)品暢銷國(guó)內(nèi)大部分地區(qū)，銷售額逐年穩(wěn)步提高。上海金穗生物公司擁有雄厚的實(shí)力、合理的價(jià)格和優(yōu)良的服務(wù)，能夠及時(shí)解決和滿足客戶的各方面的需求，公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國(guó)，在同行獲得一致好評(píng)。www.shjsbio.com[詳細(xì)]

  2018-10-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 免疫沉淀實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)

  1.用于一般免染的抗體是否都可以用作免疫沉淀實(shí)驗(yàn)？答：抗體的性質(zhì)對(duì)免疫沉淀實(shí)驗(yàn)影響很大?？贵w不同，和抗原以及ProteinG或ProteinA的結(jié)合能力也就不同。所以一般免染能結(jié)合的抗體未必能用于IP反應(yīng)。一般來(lái)說(shuō)，多抗是沉淀反應(yīng)**的選擇。另外，純化的單抗、腹水和雜交瘤上清液也可用于免疫沉淀。2.為什么溶解抗原的緩沖液中要加入一定量的蛋白酶YZ劑？答：從活性細(xì)胞裂解出來(lái)的樣品中，往往含有一定量的蛋白酶。為防止預(yù)檢測(cè)蛋白的分解，修飾，溶解抗原的緩沖液必須加蛋白每YZ劑，并且在低溫下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。3.溶解抗原的緩沖液的配制需要注意什么？答：多數(shù)的抗原是細(xì)胞構(gòu)成的蛋白，特別是骨架蛋白，緩沖液必須要使其溶解。為此，必須使用含有強(qiáng)表面活性劑的緩沖液，盡管它有可能影響一部分抗原抗體的結(jié)合。另一面，如用弱表面活性劑溶解細(xì)胞，就不能充分溶解細(xì)胞蛋白。即便溶解也產(chǎn)生與其它的蛋白結(jié)合的結(jié)果，抗原決定族被封閉，影響與抗體的結(jié)合。4.免疫沉淀實(shí)驗(yàn)應(yīng)如何把握抗體和緩沖液的比例？答：每次沉淀實(shí)驗(yàn)之前，考慮抗體/緩沖液的比例十分重要?？贵w過(guò)少就不能檢出抗原，過(guò)多則就不能沉降在beads上，殘存在上清；緩沖劑太少則不能溶解抗原，過(guò)多則抗原被稀釋。具體比例視具體情況而定。5.免疫沉淀應(yīng)該如何配制細(xì)胞裂解液？答：適當(dāng)?shù)募?xì)胞裂解液的選擇取決于所要研究蛋白的特性。TritonX-100,NP40是非離子界面活性劑，作用溫和;DOC（sodiumde-oxycholate），SDS是離子性的強(qiáng)活性劑。所以裂解液的配制時(shí)所用去污劑的種類和濃度以及鹽濃度等條件需實(shí)驗(yàn)者進(jìn)行優(yōu)化。注意如果忘記加TritonX-100，只加DOC或SDS，可能使抗體完全失去活性。[詳細(xì)]

  2018-09-02 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 免疫沉淀的改進(jìn)方法

  免疫沉淀的改進(jìn)方法[詳細(xì)]

  2013-11-11 00:00

  其它

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• 免疫沉淀技術(shù)的應(yīng)用

  上海金穗生物公司是一家專業(yè)經(jīng)營(yíng)生物試劑、標(biāo)準(zhǔn)品、試劑耗材的公司，生物引擎在廣大用戶的幫助和支持下，經(jīng)過(guò)不懈的努力，已成為國(guó)內(nèi)生命科學(xué)領(lǐng)域產(chǎn)品的主要供應(yīng)商之一，主要經(jīng)營(yíng)ELISA試劑盒、細(xì)胞、血清、抗體、金標(biāo)試劑盒、生物試劑、耗材、培養(yǎng)基、一抗、二抗等產(chǎn)品，產(chǎn)品暢銷國(guó)內(nèi)大部分地區(qū)，銷售額逐年穩(wěn)步提高。上海金穗生物公司擁有雄厚的實(shí)力、合理的價(jià)格和優(yōu)良的服務(wù)，能夠及時(shí)解決和滿足客戶的各方面的需求，公司的服務(wù)和業(yè)務(wù)網(wǎng)絡(luò)遍及全國(guó)，在同行獲得一致好評(píng)。www.shjsbio.com[詳細(xì)]

  2018-10-08 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 高校/科研機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)過(guò)程氣體分析項(xiàng)目

  在國(guó)家科技自立自強(qiáng)與“雙碳”戰(zhàn)略驅(qū)動(dòng)下，國(guó)產(chǎn)高端科研儀器的性能突破已成為破解“卡脖子”難題、保障科研數(shù)據(jù)安全的關(guān)鍵。[詳細(xì)]

  2025-06-06 11:03

  應(yīng)用文章

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• 環(huán)形細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)--使細(xì)胞侵襲的過(guò)程可視化

  環(huán)形細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)--使細(xì)胞侵襲的過(guò)程可視化[詳細(xì)]

  2016-06-03 00:00

  課件

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• 噴霧干燥實(shí)驗(yàn)過(guò)程濕粉粘壁問(wèn)題的解決方案

  其原因是: 1、進(jìn)料量太大, 不能充分蒸發(fā); 2、噴霧開始前干燥室加熱不足; 3、開始噴霧時(shí), 上樣流量調(diào)節(jié)過(guò)大; 4、加入的料液不穩(wěn)定。[詳細(xì)]

  2022-11-09 10:52

  其它

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• 滬鼎生物免疫沉淀技術(shù)服務(wù)流程

  免疫沉淀反應(yīng)主要用于抗原或者抗體的定性檢測(cè)。其原理是指可溶性抗原與相應(yīng)抗體在有電解質(zhì)存在的情況下，按適當(dāng)比例所形成的可見沉淀物現(xiàn)象。據(jù)此現(xiàn)象設(shè)計(jì)的沉淀實(shí)驗(yàn)主要包括絮狀沉淀試驗(yàn)，環(huán)狀沉淀試驗(yàn)和凝膠內(nèi)的沉淀試驗(yàn)。凝膠內(nèi)的沉淀試驗(yàn)依所用的實(shí)驗(yàn)方法又可分為免疫擴(kuò)散實(shí)驗(yàn)和免疫電泳技術(shù)2類。免疫共沉淀是以抗體和抗原之間的專一性作用為基礎(chǔ)的用于研究蛋白質(zhì)相互作用的經(jīng)典方法。是確定兩種蛋白質(zhì)在完整細(xì)胞內(nèi)生理性相互作用的有效方法。其基本原理是:細(xì)胞裂解液中加入抗體，與抗原形成特異免疫復(fù)合物，經(jīng)過(guò)洗脫，收集免疫復(fù)合物，然后進(jìn)行SDS-PAGE及Westernblotting分析。免疫沉淀操作流程（以ProteinAAgarose方法為例）：一、蛋白樣品的準(zhǔn)備1.對(duì)于10厘米細(xì)胞培養(yǎng)皿中的貼壁細(xì)胞，吸除細(xì)胞培養(yǎng)液，PBS洗滌一次，然后加入500微升至2毫升細(xì)胞裂解液裂解細(xì)胞。2.對(duì)于組織樣品參考貼壁細(xì)胞使用裂解液的比例進(jìn)行裂解。3.對(duì)于懸浮細(xì)胞，離心收集細(xì)胞后，PBS洗滌一次，然后參考貼壁細(xì)胞的裂解方法進(jìn)行裂解。二、去除非特異性結(jié)合1.取200微升至1毫升蛋白樣品，蛋白量約為200微克至1毫克，加入約1微克和免疫沉淀時(shí)使用的IgG種屬相同的普通IgG和20微升充分重懸的ProteinAAgarose，4℃緩慢搖動(dòng)30分鐘至2小時(shí)。2.2500rpm(約1000g)離心5分鐘，取上清用于后續(xù)的免疫沉淀。三、免疫沉淀1.加入0.2-2微克用于免疫沉淀的一抗，4℃緩慢搖動(dòng)放置一個(gè)晚上。2.再加入20微升充分重懸的ProteinAAgarose，4℃緩慢搖動(dòng)1-3個(gè)小時(shí)。3.2500rpm(約1000g)離心5分鐘，或瞬時(shí)高速離心，小心吸除上清，注意寧可留下少量上清也不能吸掉ProteinAAgarose。4.用準(zhǔn)備蛋白樣品時(shí)的裂解液或PBS洗滌沉淀5次，裂解液或PBS的用量每次為0.5-1毫升。洗滌時(shí)離心條件和吸除上清的要求同上面的步驟。5.完成Z后一次洗滌后，去除上清，加入20-40微升1XSDS-PAGE電泳上樣緩沖液Vortex重懸沉淀，瞬時(shí)高速離心把樣品離心至管底。6.100℃或沸水浴處理3-5分鐘，取部分或全部樣品用于SDS-PAGE電泳，暫時(shí)不用的樣品可以-20℃保存。免疫共沉淀：參考免疫沉淀的方法進(jìn)行，但免疫共沉淀(co-IP)通常必須使用未經(jīng)凍存的新鮮蛋白樣品。普通的免疫沉淀雖然可以使用凍存的蛋白樣品，但也宜用新鮮的蛋白樣品為佳。[詳細(xì)]

  2024-10-03 09:26

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 噴霧干燥技術(shù)中實(shí)驗(yàn)過(guò)程濕粉粘壁問(wèn)題的解決方法

  噴霧干燥實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，有些樣品干燥時(shí)主要表現(xiàn)是干燥室內(nèi)到處都有粘著的濕粉。其原因是：[詳細(xì)]

  2024-01-31 10:17

  其它

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• 金屬板料杯凸、凸?fàn)枌?shí)驗(yàn)過(guò)程以及實(shí)驗(yàn)結(jié)果評(píng)估標(biāo)準(zhǔn)-EC130

  杯凸實(shí)驗(yàn)是一種沖壓工藝性能試驗(yàn)，用來(lái)衡量材料的深沖性能的試驗(yàn)方法。深拉沖杯實(shí)驗(yàn)就是薄板成形性能中凸?fàn)枌?shí)驗(yàn)部分，可以評(píng)估板材的延展性、各向異性和油品好壞。[詳細(xì)]

  2018-10-11 10:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 植物染色質(zhì)免疫沉淀分析（CHIP）試劑盒 產(chǎn)品說(shuō)明書

  植物染色質(zhì)免疫沉淀分析（CHIP）試劑盒 產(chǎn)品說(shuō)明書[詳細(xì)]

  2015-01-08 00:00

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 應(yīng)用于過(guò)程和過(guò)程工程的溫度控制系統(tǒng)

  應(yīng)用于過(guò)程和過(guò)程工程的溫度控制系統(tǒng)[詳細(xì)]

  2011-11-25 00:00

  產(chǎn)品樣冊(cè)

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• 黏度法測(cè)試UHMWPE黏均分子量實(shí)驗(yàn)過(guò)程探討

  黏度法測(cè)試UHMWPE黏均分子量實(shí)驗(yàn)過(guò)程探討[詳細(xì)]

  2013-10-16 00:00

  應(yīng)用文章

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• 冷凍研磨儀對(duì)豬皮進(jìn)行粉碎實(shí)驗(yàn)詳細(xì)過(guò)程步驟

  冷凍研磨儀對(duì)豬皮進(jìn)行粉碎實(shí)驗(yàn)詳細(xì)過(guò)程步驟及結(jié)果大揭秘[詳細(xì)]

  2015-04-24 00:00

  選購(gòu)指南

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• 便攜的稱量過(guò)程

  便攜的稱量過(guò)程[詳細(xì)]

  2014-01-28 00:00

  選購(gòu)指南

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• 吸附過(guò)程的熱交換

  吸附過(guò)程的熱交換[詳細(xì)]

  2024-09-28 14:31

  標(biāo)準(zhǔn)

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• 力學(xué)順序分層的泥巖涂抹過(guò)程-自由上表面水飽和模型實(shí)驗(yàn)

  力學(xué)順序分層的泥巖涂抹過(guò)程-自由上表面水飽和模型實(shí)驗(yàn)[詳細(xì)]

  2012-07-07 00:00

  其它

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• 落到傾斜箔片上的液體薄膜流動(dòng)的時(shí)間空間分辨熱傳導(dǎo)過(guò)程的實(shí)驗(yàn)研究

  落到傾斜箔片上的液體薄膜流動(dòng)的時(shí)間空間分辨熱傳導(dǎo)過(guò)程的實(shí)驗(yàn)研究[詳細(xì)]

  2016-08-26 00:00

  專利

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• 幾種改進(jìn)的噴霧干燥過(guò)程

  送些方法的基本原理基本都是一樣的：將原料溶解在某種溶劑當(dāng)中制備出初始溶液，通過(guò)霧化器將初始溶液霧化成小液滴。小液滴受熱溶劑不斷在液滴表面揮發(fā)擴(kuò)散，液滴干燥形成Z后固體產(chǎn)品。反應(yīng)物之間或與周圍氣體是否反應(yīng)要看初始溶液的類型。[詳細(xì)]

  2024-09-27 23:54

  其它

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• GWP? 稱量過(guò)程的質(zhì)量保證

  簡(jiǎn)介 稱量設(shè)備Zda的挑戰(zhàn)是稱取小量樣品時(shí)的準(zhǔn)確度。決定稱量設(shè)備的Z小稱量值可解決此問(wèn)題。另外，定期性能驗(yàn)證可確保稱量結(jié)果持續(xù)有效。Z小稱量值測(cè)定和性能驗(yàn)證是成功保證稱量過(guò)程質(zhì)量的基礎(chǔ)。[詳細(xì)]

  2024-09-20 03:10

  實(shí)驗(yàn)操作

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