本文由 美谷分子儀器（上海）有限公司 整理匯編

2021-02-19 13:46 713閱讀次數

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• 利用iPSC衍生的肝細胞進行多參數高內涵肝細胞毒性檢測

  細胞活性染料(例如 Calcein AM)可以用來檢測活細胞中的化合物毒性。首先用各種化合物對肝細胞進行 72小時處理并染色。通過ImageXpress Micro 系統(tǒng)的 10倍物鏡可以得到肝細胞的圖像，然后我們用 MetaXpress 軟件的 Multi-Wavelength Cell Scoring 應用模塊對活細胞的整個核區(qū)域 (Hoechst 復染色)和細胞質區(qū)域(Calcein AM)進行分析([詳細]

  2021-02-19 13:46

  應用文章

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• 使用多能誘導干細胞(iPSC)來源的肝細胞球進行高內涵3D毒性分析

  利用多種肝毒素處理細胞球，觀察細胞球表型和細胞含量的顯著變化。許多細胞球失去了球狀結構，球體發(fā)生崩解，細胞球變得松散、扁平、不規(guī)則。細胞從主體結構中脫離，或出現凝結核，表明細胞已經死亡。 當化合物濃度超過一定范圍，細胞表型就會出現上述變化[詳細]

  2021-02-19 13:49

  應用文章

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• 利用高內涵成像系統(tǒng)進行心肌細胞毒性分析

  JC-10聚集在活細胞線粒體中，發(fā)出570 nm的橙紅色熒光。部分化合物通過干擾線粒體膜電位，產生直接毒性作用。一旦線粒體膜通透性增大，JC-10單體便分散于細胞質當中發(fā)出530 nm熒光.通過檢測每個細胞中橙色線粒體數量或細胞中570 nm/530nm的熒光強度的比值即可定量檢測線粒體膜變化。[詳細]

  2021-02-19 13:55

  應用文章

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• 人肝細胞生長因子ELISA檢測

  人肝細胞生長因子ELISA檢測本試劑僅供研究使用標本：血清人肝細胞生長因子ELISA檢測二、注意事項此試劑為體外檢測試劑，效期內使用，試劑應視為傳染物，不同總批號的試劑不能混用。使用前應將盒內各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。保存于2-8℃，請勿冷凍，有效期請見盒內標示。濃縮洗滌液出現結晶后，請于37℃孵育15分鐘人肝細胞生長因子ELISA檢測三、操作步驟每孔分別加入已稀釋的樣品、標準品各100ul。將板置于37℃溫育30分鐘。甩盡板中液體，用應用洗滌液進行洗滌，每次停留30秒，在紙上拍干。重復操作5次。每孔加入酶標偶合液100ul。將板置于37℃溫育30分鐘。甩盡板中液體，用應用洗滌液進行洗滌，每次停留30秒，在紙上拍干。重復操作5次。每孔加底物A、底物B各50ul，置37℃恒溫箱反應15分鐘。8．每孔加終止液50ul，于450nm波長讀O.D.值。人肝細胞生長因子ELISA檢測四、結果判斷儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值。檢測值范圍：0800pg/ml敏感度：1.0pg/mlKLH血藍蛋白抗體0.2mlKLH小鼠抗血藍蛋白抗體0.2mlLamininalpha5層粘蛋白α5抗體0.1mlIntegrinβ3/CD61（Integrinbeta3）整合素β3抗體0.2mlJAK1（Tyrosine-proteinkinaseJAK1;Januskinase1）蛋白質酪氨酸激酶JAK-1抗體0.2mlJAK2（Tyrosine-proteinkinaseJAK2;Januskinase2;JAK-2）蛋白質酪氨酸激酶JAK-2抗體0.1mlJAK2（Tyrosine-proteinkinaseJAK2;Januskinase2;JAK-2）蛋白質酪氨酸激酶JAK-2抗體0.2mlphosphoJAK2（phospho-Tyr1007+Tyr1008）磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗體0.2mlJNK1/3（c-Junamino-terminalkinase1/3）c-Jun氨基末端激酶1/3抗體0.2mlJab1（c-Junactivationdomain-bindingprotein1）Jun激活區(qū)域-連接蛋白1抗體0.2mlphospho-JNK1/2/3（pThr183/pTyr185）抗磷酸化氨基末端激酶1/2/3抗體0.2mlJNK1/2/3抗氨基末端激酶1/2/3抗體0.2mlKCNA5（Potassiumvoltage-gatedchannelsubfamilyAmember5）鉀電壓閥門通道混合器相關亞家族成員5抗體0.2mlKi-67Ki-67Antigen抗體0.2mlKi-67（AntigenidentifiedbymonoclonalantibodyKi67）Ki67抗體0.1mlKif14protein驅動蛋白家族Member14蛋白抗體0.2mlKiss-1（Metastasis-suppressorKiSS-1precursor）腫瘤轉移YZ基因抗體0.2mlKlf4（Kruppellikefactor4）腸道內富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白4抗體0.2mlphospho-Klf5/CKLF/Kruppellikefactor5（pSer272）磷酸化腸道內富含的Kruppel樣因子5抗體0.2mlKLF6（Kruppel-likefactor6）轉染抑癌基因KLF6抗體0.2mlKLF13/RFLAT-1（Kruppellikefactor13）腸道內富含的Kruppel樣因子130.2mlKLK1（Kallikrein1）激肽釋放酶1抗體0.2mlκOR（kappaOpioidreceptor）kappa型受體抗體0.2mlKLK3（Kallikrein3）激肽釋放酶3/舒血管素3抗體0.2mlRabbitIgG/AlexaFluor350AlexaFluor350標記兔IgG（細胞流式同型對照）0.1mlMouseIgG/AlexaFluor350AlexaFluor350標記小鼠IgG（細胞流式同型對照）0.1mlGoatIgG/AlexaFluor350AlexaFluor350標記羊IgG（細胞流式同型對照）0.1mlKLK4（Kallikrein4）激肽釋放酶4抗體0.2mlKLK7（Kallikrein7）激肽釋放酶7抗體0.2mlKLK9（Kallikrein9）激肽釋放酶9抗體0.2mlKLK10（Kallikrein10）激肽釋放酶10抗體0.2mlKLK14（Kallikrein14）激肽釋放酶14抗體0.2mlK-ras原癌基因K-ras抗體0.1mlK-ras原癌基因K-ras抗體0.2mlKu70（ATPdependentDNAhelicase2subunit1）DNA修復酶Ku70抗體0.1mlGoatanti-rabbitIgG/AlexaFluor488AlexaFluor488標記山羊抗兔IgG（H+L）0.1mlGoatanti-mouseIgG/AlexaFluor488AlexaFluor488標記山羊抗小鼠IgG（H+L）0.1mlRabbitanti-mouseIgG/AlexaFluor488AlexaFluor488標記兔抗小鼠IgG（H+L）0.1mlGoatanti-humanIgG/AlexaFluor488AlexaFluor488標記山羊抗人IgG0.1mlKu70（ATPdependentDNAhelicase2subunit1）DNA修復酶Ku70抗體0.2mlKu-80DNA修復酶Ku-80抗體0.2mlKv1.3/PCN3（PotassiumChannelKv1.3）離子通道蛋白Kv1.3抗體0.2mlKv3.3/Kcnc3（potassiumvoltagegatedchannel,Shaw-relatedsubfamily,member3）離子通道蛋白Kv3.3抗體0.2mlLAMA3/Laminin5alpha3（Lamininalpha3）層粘蛋白α3抗體0.2mlβ-lactoglobulin（bovine）牛β-乳球蛋白抗體0.2mlLAG-3/CD223（Lymphocyteactivationgene3）淋巴細胞活化基因-3抗體0.2mlLangerin/CD207/CLEC4K（C-typelectindomainfamily4memberK）白細胞分化抗原CD207抗體0.2mlGoatanti-bovineIgG/AlexaFluor488AlexaFluor488標記羊抗牛IgG0.1mlGoatanti-bovIgM/AlexaFluor488AlexaFluor488標記羊抗牛IgM0.1mlGoatanti-chiIgG/AlexaFluor488AlexaFluor488標記羊抗雞IgG0.1mlGoatanti-humanIgA/AlexaFluor488AlexaFluor488標記羊抗人IgA0.1mlLAP18/stathmin（leukemiaassociatedprotein18）白血病相關蛋白18/癌蛋白18抗體0.2mlLAT/LAT1（LinkerforactivationofTcell1）T細胞活化連接蛋白0.2mlLAIR-1/CD305（Leukocyte-associatedimmunoglobulin-likereceptor1）白細胞相關免疫球蛋白樣受體1抗體0.2mlLayilin透明質酸受體抗體0.2mlgoatanti-mouseIgG（beads）兔抗小鼠IgG免疫磁珠2mlLAIR-2/CD306（Leukocyte-associatedimmunoglobulin-likereceptor2）白細胞相關免疫球蛋白樣受體2抗體0.2mlLCAT（lecithincholesterolacyltransferase）卵磷膽固醇?；D移酶抗體0.2mlLDL-R（Low-densitylipoproteinreceptorprecursor）低密度脂蛋白受體抗體0.2mlox-LDL（oxidizedlowdensitylipoprotein）抗氧化低密度脂蛋白抗體0.2ml[詳細]

  2018-09-14 10:01

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• 大鼠肝細胞的分離

  實驗試劑鈉60mg/kg鏈蛋白酶E灌注液含Ⅳ型膠原酶的灌注液Histodenz液RPMI1640液胎牛血清碘酒乙醇實驗設備高速離心機平皿硅化三角燒瓶“0”號絲線針管一次性輸液管恒溫振蕩器120目、300目鋼網50ml聚丙烯離心管實驗材料實驗室大鼠實驗步驟1.大鼠以3％鈉60mg/kg麻醉后，依次碘酒、乙醇消毒；2.以十字型切口打開腹腔，暴露內臟，將腸管推向腹腔的左側，暴露出下腔靜脈和門靜脈，首先游離出下腔靜脈，將膽總管結扎。然后分離門靜脈，將其分支一一結扎，并在門靜脈的近端和遠端分別預置“0”號絲線一根，用針管內預先吸有肝素的l8號套管針穿刺門靜脈，退出針芯，見門靜脈有回血后結扎固定，迅速接通灌注系統(tǒng)，并剪開下腔靜脈建立流出道，以20ml/min的速率灌注預灌注液（37℃），同時將肝臟完整地分離下來，置入一平皿中；3.灌注約10min后，肝臟完全變?yōu)榈S褐色，關閉預灌注液三通開關，以15ml／min速率灌注50ml（25mg）鏈蛋白酶E灌注液，然后再以15ml／min速率灌注含Ⅳ型膠原酶的灌注液（37℃）；4.將一根一次性輸液管一端浸入培養(yǎng)皿液面以下，另一端插入膠原酶溶液瓶，建立膠原酶的循環(huán)灌注；5.20～25min后，當肝臟組織完全變軟，撕去肝包膜，去除結締組織，鈍性粉碎肝組織制備細胞懸液；6.將細胞懸液倒入一預先裝有100ml、37℃預熱的振蕩消化液硅化三角燒瓶中，將三角燒瓶放恒溫振蕩器中振蕩消化30min（200r／min，37℃），振蕩消化后的細胞懸液依次經120目、300目鋼網過濾，收集于2個50ml聚丙烯離心管中；7.1700r／min離心5min（4℃），吸棄上清液。每管加入40mlRPMI1640液，反復吹打，使細胞充分懸?。?.200r/min離心2min（20℃）2次，使細胞懸液中剩余的肝細胞沉淀，去除肝細胞；9.上清液l700r／min離心5min（4℃），沉淀肝的非實質細胞，吸棄上清液，用RPMI1640液1700r／min離心5min（4℃）再沖洗2～3次；10.將33％的Histodenz液以RPMI1640液稀釋成為11％Histodenz液，加入l1％Histodenz液重懸細胞沉淀，反復輕柔吹打，使細胞充分懸浮；11.配制15％的Histodenz液，在10ml離心管的底部先小心地鋪4ml15％的Histodenz，然后將l1％Histodenz細胞懸液小心地鋪在15％的Histodenz液上，上面再小心地滴加一層無血清的RPMI1640細胞培養(yǎng)液。在這一過程中一定要避免各層液體混合；12.兩離心管3000r／min離心30min（4℃），垂直位小心取下離心管，可以看到明顯的細胞分層，將11％Histodenz液與15％Histodenz液交界面間的細胞仔細地吸出，用無血清RPMI1640液1700r／min離心5min（4℃）沖洗2次；13.培養(yǎng)：用含體積分數20％胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液將細胞懸浮，移人培養(yǎng)瓶，于37℃、CO2體積分數為5％的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)30min，計數，以1×106個／ml的濃度接種于新瓶中培養(yǎng)，24h后洗去未貼壁的細胞，即可獲得純化的大鼠肝細胞。[詳細]

  2018-10-08 10:01

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• 大鼠肝細胞瘤

  大鼠肝細胞瘤[詳細]

  2015-10-23 00:00

  課件

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• 大鼠肝細胞生長因子（HGF）酶聯免疫檢測

  大鼠肝細胞生長因子（HGF）酶聯免疫檢測試劑盒使用說明書使用前仔細閱讀本說明書。本酶聯免疫試劑盒是基于雙抗體夾心技術原理，來檢測大鼠肝細胞生長因子（HGF），只能用于研究用途，不得用于醫(yī)學診斷。用途：用于大鼠血清、血漿及相關液體樣本中肝細胞生長因子（HGF）測定。工作原理本試劑盒采用的是生物素雙抗體夾心酶聯免疫吸附法（ELISA）測定樣品中大鼠肝細胞生長因子（HGF）水平。向預先包被了大鼠肝細胞生長因子（HGF）單克隆抗體的酶標孔中加入大鼠肝細胞生長因子（HGF），溫育；溫育后，加入生物素標記的抗HGF抗體。再與鏈霉親和素-HRP結合，形成免疫復合物，再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶，然后加入底物A、B，產生藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺與樣品中大鼠肝細胞生長因子（HGF）的濃度呈正相關。試劑盒組成試劑盒組成48孔配置96孔配置保存說明書1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1個1個酶標包被板1×481×962-8℃保存標準品1280ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存標準品稀釋液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存鏈霉親和素-HRP3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存生物素標記的抗HGF抗體0.5ml×1瓶1ml×1瓶2-8℃保存顯色劑A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存顯色劑B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存終止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存濃縮洗滌液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存需要而未提供的試劑和器材1．37℃恒溫箱。2．標準規(guī)格酶標儀。3．精密移液器及一次性吸頭4．蒸餾水，5．一次性試管6．吸水紙注意事項1．從2-8℃取出的試劑盒，在開啟試劑盒之前要室溫平衡至少30分鐘。酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差3．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.4．為避免交叉污染，要避免重復使用手中的吸頭和封板膜。5．不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。6．底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。洗板方法手工洗板方法：甩掉酶標板內的液體；在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙，酶標板朝下用力拍幾次；將稀釋后的洗滌液至少0.35ml注入孔內，浸泡1-2分鐘。根據需要，重復此過程數次。自動洗板：如果有自動洗板機，應在熟練使用后再用到正式實驗過程中標本要求1．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。2．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融。操作程序1.標準品的稀釋：（本試劑盒提供原倍標準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。）640ng/L5號標準品120μl的原倍標準品加入120μl標準品稀釋液320ng/L4號標準品120μl的5號標準品加入120μl標準品稀釋液160ng/L3號標準品120μl的4號標準品加入120μl標準品稀釋液80ng/L2號標準品120μl的3號標準品加入120μl標準品稀釋液40ng/L1號標準品120μl的2號標準品加入120μl標準品稀釋液2.根據代測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。3.加樣：1）空白孔，空白對照孔不加樣品，生物素標記的抗HGF抗體，鏈霉親和素-HRP，只加顯色劑A&B和終止液，其余各步操作相同；2）標準品孔：加入標準品50ul，鏈霉親和素-HRP50ul（標準品中已事先整合好生物素抗體，故不加）；3）代測樣品孔：加入樣本40ul，然后各加入抗HGF抗體10ul、鏈霉親和素-HRP50ul，蓋上封板膜，輕輕震蕩混勻，37℃溫育60分鐘。4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.顯色：每孔先加入顯色劑A50ul，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色10分鐘.7.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。8.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后10分鐘以內進行。9.根據標準品的濃度及對應的OD值計算出標準曲線的直線回歸方程，再根據樣品的OD值在回歸方程上計算出對應的樣品濃度。也可以使用各種應用軟件來計算。操作程序總結：準備試劑，樣品和標準品加入準備好的樣品和標準品，生物素標記的二抗和酶標試劑，37℃反應60分鐘洗板5次，加入顯色液A、B，37℃顯色15分鐘加入終止液15分鐘內讀OD值計算檢測范圍：20ng/L→640ng/L。保存：2-8℃。有效期：6個月（2-8℃）。Rathepatocytegrowthfactor（HGF）ELISAKitInstructionThiskitisonlyforscientificresearch,andshallnotbeusedasaclinicaldiagnosisofuse.PurposeThiskitallowsforthedeterminationofHGFconcentrationsinRatserum,cellculturesupernatant,andotherbiologicalfluids.PrincipleThekitassayRatHGFlevelinthesample，addRatHGFantibodytomicrotiterplatewells,afterIncubating,addBiotinylatedantiHGF-antibody,thenCombinedStreptavidin-HRP,becomecomplex,afterIncubatingandwashingCompletely,AddTMBsubstratesolution,TMBsubstratebecomesbluecolor,reactionisterminatedbytheadditionofasulphuricacidsolutionandthecolorchangeismeasuredspectrophotometricallyatawavelengthof450nm.TheconcentrationofHGFinthesamplesisthendeterminedbycomparingtheO.D.ofthesamplestothestandardcurve.MaterialsprovidedwiththekitMaterialsprovidedwiththekit48determinations96determinationsStorageUsermanual11Closureplatemembrane22Sealedbags11Microelisastripplate112-8℃Standard：1280ng/L0.5ml×1bottle0.5ml×1bottle2-8℃Standarddiluent3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃Streptavidin-HRP3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃BiotinylatedantiHGF-antibody0.5ml×1bottle1ml×1bottle2-8℃ChromogenSolutionA3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃ChromogenSolutionB3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃StopSolution3ml×1bottle6ml×1bottle2-8℃washsolution（20ml×20fold）×1bottle（20ml×30fold）×1bottle2-8℃Materialsrequiredbutnotsupplied1.37℃incubator2.Standardmicroplatereader（450nm）3.PrecisionpipettesandDisposablepipettetips.4.deionizedwater.5.DisposableTesttube6AbsorbentpaperImportantnotes1.Thekittakesoutfromtherefrigerationenvironment首ldbebalanced15-30minutesintheroomtemperature,ELISAplatescoatedifhasnotuseupafteropened,theplate首ldbestoredinSealedbag.2.addSamplewithsamplerEachstep,Andproofreaditsaccuracyfrequently,avoidstheexperimentalerror.3.Pleaseaccordingtouseinstructionstrictly,Thetestresultdeterminationmusttakethemicrotiterplatereaderasastandard.4.UsenewdisposalplasticpipettetipsandClosureplatemembraneforeachstandard,inordertoavoidcrosscontamination.5.Donotmixreagentswiththosefromotherlots.6.Thesubstrateevadethelightpreservation.Specimenrequirements1.extractassoonaspossibleafterSpecimencollection,andaccordingtotherelevantliterature,and首ldbeexperimentassoonaspossibleaftertheextraction.Ifitcan’t,specimencanbekeptin-20℃topreserve,Avoidrepeatedfreeze-thawcycles.2.Can’tdetectthesamplewhichcontainNaN3,becauseNaN3inhibitsHRPactive.Assayprocedure1.Diluteandaddsample:DiluteOriginaldensityStandardasfollowtable:640ng/L5Standard120μlOriginaldensityStandard+120μlStandarddiluent320ng/L4Standard120μl5Standard+120μlStandarddiluent160ng/L3Standard120μl4Standard+120μlStandarddiluent80ng/L2Standard120μl3Standard+120μlStandarddiluent40ng/L1Standard120μl2Standard+120μlStandarddiluent2.accordingtestingSamplenumberstodefinehowmanywellsnedd,StandardandblanksuggestedDoholes.3.addsample：1）blankwells:（blankcomparisonwellsdon’taddsample,BiotinylatedantiHGF-antibodyandStreptavidin-HRP,othereachstepoperationissame）;2）Standardwells:addStandard50μlandStreptavidin-HRP50μl;3）testingSamplewells:addsample40μl,thenaddantiHGF-antibody10μl,Streptavidin-HRP50μl.closingplatewithClosureplatemembrane,incubatefor60minat37℃.4.Configurateliquid:30-fold（or20-fold）washsolutiondiluted30-fold（or20-fold）withdistilledwaterandreserve.5.washing：UncoverClosureplatemembrane,discardLiquid,drybyswing,addwashingbuffertoeverywell,stillfor30sthendrain,repeat5times,drybypat.6.color：AddChromogenSolutionA50ulandChromogenSolutionBtoeachwell,evadethelightpreservationfor10minat37℃7.Stopthereaction：AddStopSolution50μltoeachwell,Stopthereaction（thebluecolorchangetoyellowcolor）.8.assay：takeblankwellaszero,Readabsorbanceat450nmafterAddingStopSolutionandwithin10min.9.CalculateofresultStepsdescriptionStandard,SamplediluentAddStandard,Samplediluent,BiotinylatedandHRP,incubatefor60minat37℃.Wash5times,AddChromogenSolutionAandB,incubatefor15minat37℃.AddStoppSolutionReadabsorbanceat450nmwithin15mincalculateAssayrange20ng/L→640ng/LStorageandvalidity1．Storage：2-8℃.2．validity：sixmonths.[詳細]

  2018-09-21 10:01

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• 人肝細胞生長因子(HGF)檢測試劑盒

  人肝細胞生長因子(HGF)檢測試劑盒[詳細]

  2024-09-29 09:37

  報價單

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• 大鼠肝細胞ELISA試劑盒

  大鼠肝細胞生長因子（HGF）酶聯免疫分析試劑盒使用說明書使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中肝細胞生長因子（HGF）含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠肝細胞生長因子（HGF）水平。用純化的大鼠肝細胞生長因子（HGF）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入肝細胞生長因子（HGF），再與HRP標記的肝細胞生長因子（HGF）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肝細胞生長因子（HGF）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠肝細胞生長因子（HGF）濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標試劑6ml×1瓶8標準品（1600ng/L）0.5ml×1瓶3酶標包被板12孔×8條9標準品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個計算以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。注意事項1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標準曲線，**做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請Z后乘以總稀釋倍數（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細]

  2018-09-14 10:00

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• FH0080-人肝細胞；QSG-7701

  FH0080-人肝細胞；QSG-7701[詳細]

  2024-05-30 09:33

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• FH0338-小鼠肝細胞；AML12

  FH0338-小鼠肝細胞；AML12[詳細]

  2024-05-30 09:33

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• FH0403-大鼠肝細胞；BRL

  FH0403-大鼠肝細胞；BRL[詳細]

  2024-05-30 09:33

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• FH1265-大鼠肝細胞；IAR20

  FH1265-大鼠肝細胞；IAR20[詳細]

  2024-05-30 09:33

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• 小鼠肝細胞生長因子 （HGF） ELISA 檢測試劑盒

  小鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用試驗原理：HGF試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知HGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將HGF和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中HGF的濃度呈比例關系。試劑盒內容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品：1600pg/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標準品稀釋緩沖液1瓶（4.0ml）1瓶（2.0ml）即用型生物素標記的抗HGF抗體1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料蒸餾水。加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：1600pg/ml（6號標準品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。800pg/ml（5號標準品）100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液400pg/ml（4號標準品）100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液200pg/ml（3號標準品）100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液100pg/ml（2號標準品）100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液50pg/ml（1號標準品）100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0pg/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標準品濃度（pg/ml）A16001600樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到極ng確的結果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。2.特異性：不與其它細胞因子反應。3.重復性：板內、板間變異系數均小于10%。結果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的HGF標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的HGF含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍：0-1600pg/ml4、敏感度：1.0pg/ml[詳細]

  2018-09-14 10:00

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• 人肝細胞生長因子（HGF）ELISA檢測試劑盒

  人肝細胞生長因子（HGF）樣本處理及要求：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。2.血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心。3.尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。4.細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應再次離心。5.組織標本：切割標本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。標本融化后仍然保?-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。6.標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融.7.不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性。人肝細胞生長因子（HGF）操作步驟1.標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在**、第二孔中分別加標準品100μl，然后在**、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從**孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為1200ng/L，800ng/L，400ng/L，200ng/L，100ng/L）。2.加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品Z終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4.配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。6.加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。7.溫育：操作同3。8.洗滌：操作同5。9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。11.測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。[詳細]

  2018-09-19 10:00

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• 小鼠（Mouse）肝細胞生長因子（HGF）檢測試劑盒

  小鼠(Mouse)肝細胞生長因子(HGF)檢測試劑盒本試劑僅供研究使用試驗原理：HGF試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知HGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將HGF和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中HGF的濃度呈比例關系。試劑盒內容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品：1600pg/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標準品稀釋緩沖液1瓶（4.0ml）1瓶（2.0ml）即用型生物素標記的抗HGF抗體1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料蒸餾水。加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：1600pg/ml（6號標準品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。800pg/ml（5號標準品）100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液400pg/ml（4號標準品）100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液200pg/ml（3號標準品）100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液100pg/ml（2號標準品）100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液50pg/ml（1號標準品）100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0pg/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標準品濃度（pg/ml）A16001600樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到極ng確的結果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。2.特異性：不與其它細胞因子反應。3.重復性：板內、板間變異系數均小于10%。結果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的HGF標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的HGF含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍：0-1600pg/ml4、敏感度：1.0pg/ml[詳細]

  2018-10-31 10:00

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• 小鼠肝細胞生長因子ELISA檢測試劑盒說明書

  小鼠肝細胞生長因子ELISA檢測試劑盒說明書試驗原理：HGF試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗（ELISA）.已知HGF濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將HGF和生物素標記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌，去除未結合的酶結合物，然后加入底物A、B，和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中HGF的濃度呈比例關系。試劑盒內容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標準品：1600pg/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標準品稀釋緩沖液1瓶（4.0ml）1瓶（2.0ml）即用型生物素標記的抗HGF抗體1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料1．蒸餾水。2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。2．實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項1．試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。2．實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。3．不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6．洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。7．底物A應揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。8．加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。9．按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液5、保存------如果樣品不立即使用，應將其分成小部分-70℃保存，避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準備1．標準品：標準品的系列稀釋應在實驗時準備，不能儲存。稀釋前將標準品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進行：1600pg/ml（6號標準品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。800pg/ml（5號標準品）100ul的原倍標準品加入100ul的標準品稀釋液400pg/ml（4號標準品）100ul的5號標準品加入100ul的標準品稀釋液200pg/ml（3號標準品）100ul的4號標準品加入100ul的標準品稀釋液100pg/ml（2號標準品）100ul的3號標準品加入100ul的標準品稀釋液50pg/ml（1號標準品）100ul的2號標準品加入100ul的標準品稀釋液0pg/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。小鼠肝細胞生長因子ELISA檢測試劑盒說明書操作步驟1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產生加樣上的誤差。2．根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定，能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應孔內。3．加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的生物素標記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。4．甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。5．每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。6．甩去孔內液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌，洗滌次數增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。8．取出酶標板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應立即測定結果。9．在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實驗方案標準品濃度（pg/ml）A16001600樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標準品以上的結果為非線性的，根據此標準曲線無法得到極ng確的結果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。2.特異性：不與其它細胞因子反應。3.重復性：板內、板間變異系數均小于10%。小鼠肝細胞生長因子ELISA檢測試劑盒說明書結果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標（Y），相應的HGF標準品濃度為橫坐標（X），做得相應的曲線，樣品的HGF含量可根據其OD值由標準曲線換算出相應的濃度。3、檢測值范圍：0-1600pg/ml4、敏感度：1.0pg/ml[詳細]

  2018-11-05 10:00

  產品樣冊

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• 利用高內涵技術分析人類胚胎干細胞

  利用高內涵技術分析人類胚胎干細胞[詳細]

  2024-09-20 15:25

  操作手冊

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• 大鼠肝細胞生長因子酶聯免疫分析

  大鼠肝細胞生長因子酶聯免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T25ng/L-900ng/L使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關液體樣本中肝細胞生長因子（HGF）含量。實驗原理本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠肝細胞生長因子（HGF）水平。用純化的大鼠肝細胞生長因子（HGF）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入肝細胞生長因子（HGF），再與HRP標記的肝細胞生長因子（HGF）抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肝細胞生長因子（HGF）呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中大鼠肝細胞生長因子（HGF）濃度。[詳細]

  2018-10-03 10:00

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• FH0109-人肝細胞；HL-7702[L-02]

  FH0109-人肝細胞；HL-7702[L-02][詳細]

  2024-05-30 09:33

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