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2024-05-30 09:33 98閱讀次數(shù)

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  FH0338-小鼠肝細(xì)胞；AML12[詳細(xì)]

  2024-05-30 09:33

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  FH0334-小鼠正常肝細(xì)胞；NCTC1469[詳細(xì)]

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  FH1006-小鼠胚胎肝細(xì)胞；BNL CL.2[詳細(xì)]

  2024-05-30 09:33

  應(yīng)用文章

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• 小鼠肝細(xì)胞生長因子（HGF）ELISA試劑盒說明書

  小鼠肝細(xì)胞生長因子（HGF）ELISA試劑盒（用于血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液和其它生物體液內(nèi)）原理本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。用抗小鼠HGF單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)準(zhǔn)品和樣品中的HGF與單抗結(jié)合，加入生物素化的抗小鼠HGF，形成免疫復(fù)合物連接在板上，辣根過氧化物酶標(biāo)記的Streptavidin與生物素結(jié)合，加入底物工作液顯藍(lán)色，Z后加終止液，在450nm處測OD值，HGF濃度與OD值成正比，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中HGF濃度。試劑盒組成（2-8℃保存）酶標(biāo)板（CoatedWells）96孔酶標(biāo)抗體工作液（EnzymeConjugate）12ml10×標(biāo)本稀釋液（SampleBuffer）12ml20×濃縮洗滌液（WashBuffer）50ml標(biāo)準(zhǔn)品（Standards）：8ng/瓶2瓶底物工作液（TMBSolution）12ml**抗體工作液（BiotinylatedAntibody）12ml終止液（StopSolution）12ml準(zhǔn)備試劑與收集血樣1.收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測，2-8℃保存48小時；更長時間須冷凍（-20℃或-70℃）保存，避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml蒸餾水混勻，配成16000pg/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管，每管加入標(biāo)本稀釋液300ul。在**管中加入16000pg/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液300ul混勻后用加樣器吸出300ul，移至第二管。如此反復(fù)作對倍稀釋，從第七管中吸出300ul棄去。第八管為空白對照。3.10×標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作1:10倍稀釋（示例：1ml濃稀釋液+9ml蒸餾水）。4.洗滌液：用重蒸水1:20稀釋（示例：1ml濃縮洗滌液加入19ml的重蒸水）檢測程序1.加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100ul，將反應(yīng)板充分混勻后置37℃120分鐘。2.洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌4-6次，向?yàn)V紙上印干。3.每孔中加入**抗體工作液100ul。將反應(yīng)板充分混勻后置37℃60分鐘。4.洗板：同前。5.每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul。將反應(yīng)板置37℃30分鐘。6.洗板：同前。7.每孔加入底物工作液100ul，置37℃暗處反應(yīng)15分鐘。8.每孔加入100ul終止液混勻。9.30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在450nm處測吸光值。結(jié)果計(jì)算與判斷1.所有OD值都應(yīng)減除空白值后再行計(jì)算。2.以標(biāo)準(zhǔn)品8000、4000、2000、1000、500、250、125、0pg/ml為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上作圖，畫出標(biāo)準(zhǔn)曲線。3.根據(jù)樣品OD值在該曲線圖上查出相應(yīng)HGF含量。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的HGF檢測濃度小于60pg/ml。2.特異性：可同時檢測重組或天然的小鼠HGF。不與小鼠其它細(xì)胞因子有交叉反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板見變異系數(shù)均小于10％。注意事項(xiàng)1.以上標(biāo)準(zhǔn)孔及待測樣品均建議做復(fù)孔，每次測定應(yīng)同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線。2.洗滌過程很關(guān)鍵。洗滌不充分將導(dǎo)致極ng確度誤差及OD值錯誤地升高。3.板條開封后剩余板條要再封好，保持板條干燥。4.本試劑盒宜置4oC冰箱保存。5.本試劑盒僅用于科研，不能用于臨床診斷！[詳細(xì)]

  2018-09-13 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 小鼠肝細(xì)胞生長因子 （HGF） ELISA 檢測試劑盒

  小鼠肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用試驗(yàn)原理：HGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知HGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將HGF和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中HGF的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品：1600pg/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進(jìn)行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶（4.0ml）1瓶（2.0ml）即用型生物素標(biāo)記的抗HGF抗體1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進(jìn)行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標(biāo)本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料蒸餾水。加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：1600pg/ml（6號標(biāo)準(zhǔn)品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。800pg/ml（5號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液400pg/ml（4號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200pg/ml（3號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100pg/ml（2號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50pg/ml（1號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0pg/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度（pg/ml）A16001600樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的HGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的HGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍：0-1600pg/ml4、敏感度：1.0pg/ml[詳細(xì)]

  2018-09-14 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 小鼠（Mouse）肝細(xì)胞生長因子（HGF）檢測試劑盒

  小鼠(Mouse)肝細(xì)胞生長因子(HGF)檢測試劑盒本試劑僅供研究使用試驗(yàn)原理：HGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知HGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將HGF和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中HGF的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品：1600pg/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進(jìn)行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶（4.0ml）1瓶（2.0ml）即用型生物素標(biāo)記的抗HGF抗體1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進(jìn)行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標(biāo)本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料蒸餾水。加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：1600pg/ml（6號標(biāo)準(zhǔn)品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。800pg/ml（5號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液400pg/ml（4號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200pg/ml（3號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100pg/ml（2號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50pg/ml（1號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0pg/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度（pg/ml）A16001600樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的HGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的HGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍：0-1600pg/ml4、敏感度：1.0pg/ml[詳細(xì)]

  2018-10-31 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 小鼠肝細(xì)胞生長因子ELISA檢測試劑盒說明書

  小鼠肝細(xì)胞生長因子ELISA檢測試劑盒說明書試驗(yàn)原理：HGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知HGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將HGF和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中HGF的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品：1600pg/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進(jìn)行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶（4.0ml）1瓶（2.0ml）即用型生物素標(biāo)記的抗HGF抗體1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進(jìn)行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標(biāo)本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料1．蒸餾水。2．加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。3．振蕩器及磁力攪拌器等。安全性1．避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。2．實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。3．不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)1．試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。2．實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。3．不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4．使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。5．使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6．洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7．底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。8．加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。9．按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。3、細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。4、組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液5、保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備1．標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：1600pg/ml（6號標(biāo)準(zhǔn)品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。800pg/ml（5號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液400pg/ml（4號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200pg/ml（3號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100pg/ml（2號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50pg/ml（1號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0pg/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。2．洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。小鼠肝細(xì)胞生長因子ELISA檢測試劑盒說明書操作步驟1．使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。2．根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。3．加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。4．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。5．每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。6．甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。7．每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。8．取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。9．在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度（pg/ml）A16001600樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。小鼠肝細(xì)胞生長因子ELISA檢測試劑盒說明書結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的HGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的HGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍：0-1600pg/ml4、敏感度：1.0pg/ml[詳細(xì)]

  2018-11-05 10:00

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• 小鼠 （Mouse） 肝細(xì)胞生長因子 （HGF） ELISA 檢測試劑盒

  小鼠(Mouse)肝細(xì)胞生長因子(HGF)ELISA檢測試劑盒本試劑僅供研究使用試驗(yàn)原理：HGF試劑盒是固相夾心法酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)（ELISA）.已知HGF濃度的標(biāo)準(zhǔn)品、未知濃度的樣品加入微孔酶標(biāo)板內(nèi)進(jìn)行檢測。先將HGF和生物素標(biāo)記的抗體同時溫育。洗滌后，加入親和素標(biāo)記過的HRP。再經(jīng)過溫育和洗滌，去除未結(jié)合的酶結(jié)合物，然后加入底物A、B，和酶結(jié)合物同時作用。產(chǎn)生顏色。顏色的深淺和樣品中HGF的濃度呈比例關(guān)系。試劑盒內(nèi)容及其配制試劑盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶標(biāo)板1塊板（96T）半塊板（48T）即用型塑料膜板蓋1塊半塊即用型標(biāo)準(zhǔn)品：1600pg/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按說明書進(jìn)行稀稀空白對照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型標(biāo)準(zhǔn)品稀釋緩沖液1瓶（4.0ml）1瓶（2.0ml）即用型生物素標(biāo)記的抗HGF抗體1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型親和鏈酶素-HRP1瓶（8.0ml）1瓶（4.0ml）即用型洗滌緩沖液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按說明書進(jìn)行稀釋底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型終止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型標(biāo)本稀釋液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自備材料蒸餾水。加樣器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振蕩器及磁力攪拌器等。安全性避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。操作注意事項(xiàng)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄，不可保存。實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實(shí)驗(yàn)完成后應(yīng)立即讀取OD值。加入試劑的順序應(yīng)一致，以保證所有反應(yīng)板孔溫育的時間一樣。按照說明書中標(biāo)明的時間、加液的量及順序進(jìn)行溫育操作。樣品收集、處理及保存方法血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后，1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。細(xì)胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘，取上清液保存------如果樣品不立即使用，應(yīng)將其分成小部分-70℃保存，避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒，檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。試劑的準(zhǔn)備標(biāo)準(zhǔn)品：標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋應(yīng)在實(shí)驗(yàn)時準(zhǔn)備，不能儲存。稀釋前將標(biāo)準(zhǔn)品振蕩混勻。稀釋比例按下表中進(jìn)行：1600pg/ml（6號標(biāo)準(zhǔn)品）原倍濃度不用稀釋直接加入50ul。800pg/ml（5號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液400pg/ml（4號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的5號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液200pg/ml（3號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的4號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液100pg/ml（2號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的3號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液50pg/ml（1號標(biāo)準(zhǔn)品）100ul的2號標(biāo)準(zhǔn)品加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液0pg/ml（空白對照）原始濃度不用稀釋直接加入50ul。洗滌緩沖液（50×）的稀釋：蒸餾水50倍稀釋。操作步驟使用前，將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫，以免加樣時加入大量的氣泡，產(chǎn)生加樣上的誤差。根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個樣品根據(jù)自己的數(shù)量來定，能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。標(biāo)本用標(biāo)本稀釋液1：1稀釋后加入50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板，輕輕振蕩混勻，37℃溫育1小時。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入60ul的親和鏈酶素-HRP，輕輕振蕩混勻，37℃溫育30分鐘。甩去孔內(nèi)液體，每孔加滿洗滌液，振蕩30秒，甩去洗滌液，用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌，洗滌次數(shù)增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，輕輕振蕩混勻，37℃溫育10分鐘。避免光照。取出酶標(biāo)板，迅速加入50ul終止液，加入終止液后應(yīng)立即測定結(jié)果。在450nm波長處測定各孔的OD值。建議使用的實(shí)驗(yàn)方案標(biāo)準(zhǔn)品濃度（pg/ml）A16001600樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品B800800樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品C400400樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品D200200樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品E100100樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品F5050樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品G00樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品H樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品樣品局限6號標(biāo)準(zhǔn)品以上的結(jié)果為非線性的，根據(jù)此標(biāo)準(zhǔn)曲線無法得到極ng確的結(jié)果。試劑盒性能1.靈敏度：Z小的檢測濃度小于1號標(biāo)準(zhǔn)品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預(yù)期濃度相關(guān)系數(shù)R值為0.990。2.特異性：不與其它細(xì)胞因子反應(yīng)。3.重復(fù)性：板內(nèi)、板間變異系數(shù)均小于10%。結(jié)果判斷與分析1、儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)（Y），相應(yīng)的HGF標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)（X），做得相應(yīng)的曲線，樣品的HGF含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線換算出相應(yīng)的濃度。3、檢測值范圍：0-1600pg/ml4、敏感度：1.0pg/ml[詳細(xì)]

  2018-09-14 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 大鼠肝細(xì)胞瘤

  大鼠肝細(xì)胞瘤[詳細(xì)]

  2015-10-23 00:00

  課件

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• 大鼠肝細(xì)胞ELISA試劑盒

  大鼠肝細(xì)胞生長因子（HGF）酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中肝細(xì)胞生長因子（HGF）含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠肝細(xì)胞生長因子（HGF）水平。用純化的大鼠肝細(xì)胞生長因子（HGF）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入肝細(xì)胞生長因子（HGF），再與HRP標(biāo)記的肝細(xì)胞生長因子（HGF）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肝細(xì)胞生長因子（HGF）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠肝細(xì)胞生長因子（HGF）濃度。試劑盒組成130倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7終止液6ml×1瓶2酶標(biāo)試劑6ml×1瓶8標(biāo)準(zhǔn)品（1600ng/L）0.5ml×1瓶3酶標(biāo)包被板12孔×8條9標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.5ml×1瓶4樣品稀釋液6ml×1瓶10說明書1份5顯色劑A液6ml×1瓶11封板膜2張6顯色劑B液6ml×1/瓶12密封袋1個計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo)，OD值為縱坐標(biāo)，在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度；再乘以稀釋倍數(shù)；或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計(jì)算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數(shù)，即為樣品的實(shí)際濃度。注意事項(xiàng)1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。3．各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時間**控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4．請每次測定的同時做標(biāo)準(zhǔn)曲線，**做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔**孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計(jì)算時請Z后乘以總稀釋倍數(shù)（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物請避光保存。7．嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行，試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn).8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。9．本試劑不同批號組分不得混用。10.如與英文說明書有異，以英文說明書為準(zhǔn)。保存條件及有效期1．試劑盒保存：；2-8℃。2．有效期：6個月[詳細(xì)]

  2018-09-14 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• 大鼠肝細(xì)胞的分離

  實(shí)驗(yàn)試劑鈉60mg/kg鏈蛋白酶E灌注液含Ⅳ型膠原酶的灌注液Histodenz液RPMI1640液胎牛血清碘酒乙醇實(shí)驗(yàn)設(shè)備高速離心機(jī)平皿硅化三角燒瓶“0”號絲線針管一次性輸液管恒溫振蕩器120目、300目鋼網(wǎng)50ml聚丙烯離心管實(shí)驗(yàn)材料實(shí)驗(yàn)室大鼠實(shí)驗(yàn)步驟1.大鼠以3％鈉60mg/kg麻醉后，依次碘酒、乙醇消毒；2.以十字型切口打開腹腔，暴露內(nèi)臟，將腸管推向腹腔的左側(cè)，暴露出下腔靜脈和門靜脈，首先游離出下腔靜脈，將膽總管結(jié)扎。然后分離門靜脈，將其分支一一結(jié)扎，并在門靜脈的近端和遠(yuǎn)端分別預(yù)置“0”號絲線一根，用針管內(nèi)預(yù)先吸有肝素的l8號套管針穿刺門靜脈，退出針芯，見門靜脈有回血后結(jié)扎固定，迅速接通灌注系統(tǒng)，并剪開下腔靜脈建立流出道，以20ml/min的速率灌注預(yù)灌注液（37℃），同時將肝臟完整地分離下來，置入一平皿中；3.灌注約10min后，肝臟完全變?yōu)榈S褐色，關(guān)閉預(yù)灌注液三通開關(guān)，以15ml／min速率灌注50ml（25mg）鏈蛋白酶E灌注液，然后再以15ml／min速率灌注含Ⅳ型膠原酶的灌注液（37℃）；4.將一根一次性輸液管一端浸入培養(yǎng)皿液面以下，另一端插入膠原酶溶液瓶，建立膠原酶的循環(huán)灌注；5.20～25min后，當(dāng)肝臟組織完全變軟，撕去肝包膜，去除結(jié)締組織，鈍性粉碎肝組織制備細(xì)胞懸液；6.將細(xì)胞懸液倒入一預(yù)先裝有100ml、37℃預(yù)熱的振蕩消化液硅化三角燒瓶中，將三角燒瓶放恒溫振蕩器中振蕩消化30min（200r／min，37℃），振蕩消化后的細(xì)胞懸液依次經(jīng)120目、300目鋼網(wǎng)過濾，收集于2個50ml聚丙烯離心管中；7.1700r／min離心5min（4℃），吸棄上清液。每管加入40mlRPMI1640液，反復(fù)吹打，使細(xì)胞充分懸??；8.200r/min離心2min（20℃）2次，使細(xì)胞懸液中剩余的肝細(xì)胞沉淀，去除肝細(xì)胞；9.上清液l700r／min離心5min（4℃），沉淀肝的非實(shí)質(zhì)細(xì)胞，吸棄上清液，用RPMI1640液1700r／min離心5min（4℃）再沖洗2～3次；10.將33％的Histodenz液以RPMI1640液稀釋成為11％Histodenz液，加入l1％Histodenz液重懸細(xì)胞沉淀，反復(fù)輕柔吹打，使細(xì)胞充分懸?。?1.配制15％的Histodenz液，在10ml離心管的底部先小心地鋪4ml15％的Histodenz，然后將l1％Histodenz細(xì)胞懸液小心地鋪在15％的Histodenz液上，上面再小心地滴加一層無血清的RPMI1640細(xì)胞培養(yǎng)液。在這一過程中一定要避免各層液體混合；12.兩離心管3000r／min離心30min（4℃），垂直位小心取下離心管，可以看到明顯的細(xì)胞分層，將11％Histodenz液與15％Histodenz液交界面間的細(xì)胞仔細(xì)地吸出，用無血清RPMI1640液1700r／min離心5min（4℃）沖洗2次；13.培養(yǎng)：用含體積分?jǐn)?shù)20％胎牛血清的RPMI1640培養(yǎng)液將細(xì)胞懸浮，移人培養(yǎng)瓶，于37℃、CO2體積分?jǐn)?shù)為5％的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)30min，計(jì)數(shù)，以1×106個／ml的濃度接種于新瓶中培養(yǎng)，24h后洗去未貼壁的細(xì)胞，即可獲得純化的大鼠肝細(xì)胞。[詳細(xì)]

  2018-10-08 10:01

  產(chǎn)品樣冊

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• FH0080-人肝細(xì)胞；QSG-7701

  FH0080-人肝細(xì)胞；QSG-7701[詳細(xì)]

  2024-05-30 09:33

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• FH0403-大鼠肝細(xì)胞；BRL

  FH0403-大鼠肝細(xì)胞；BRL[詳細(xì)]

  2024-05-30 09:33

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• FH1265-大鼠肝細(xì)胞；IAR20

  FH1265-大鼠肝細(xì)胞；IAR20[詳細(xì)]

  2024-05-30 09:33

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• 人肝細(xì)胞生長因子ELISA檢測

  人肝細(xì)胞生長因子ELISA檢測本試劑僅供研究使用標(biāo)本：血清人肝細(xì)胞生長因子ELISA檢測二、注意事項(xiàng)此試劑為體外檢測試劑，效期內(nèi)使用，試劑應(yīng)視為傳染物，不同總批號的試劑不能混用。使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出，室溫放置至少30分鐘。保存于2-8℃，請勿冷凍，有效期請見盒內(nèi)標(biāo)示。濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后，請于37℃孵育15分鐘人肝細(xì)胞生長因子ELISA檢測三、操作步驟每孔分別加入已稀釋的樣品、標(biāo)準(zhǔn)品各100ul。將板置于37℃溫育30分鐘。甩盡板中液體，用應(yīng)用洗滌液進(jìn)行洗滌，每次停留30秒，在紙上拍干。重復(fù)操作5次。每孔加入酶標(biāo)偶合液100ul。將板置于37℃溫育30分鐘。甩盡板中液體，用應(yīng)用洗滌液進(jìn)行洗滌，每次停留30秒，在紙上拍干。重復(fù)操作5次。每孔加底物A、底物B各50ul，置37℃恒溫箱反應(yīng)15分鐘。8．每孔加終止液50ul，于450nm波長讀O.D.值。人肝細(xì)胞生長因子ELISA檢測四、結(jié)果判斷儀器值：于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值。檢測值范圍：0800pg/ml敏感度：1.0pg/mlKLH血藍(lán)蛋白抗體0.2mlKLH小鼠抗血藍(lán)蛋白抗體0.2mlLamininalpha5層粘蛋白α5抗體0.1mlIntegrinβ3/CD61（Integrinbeta3）整合素β3抗體0.2mlJAK1（Tyrosine-proteinkinaseJAK1;Januskinase1）蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-1抗體0.2mlJAK2（Tyrosine-proteinkinaseJAK2;Januskinase2;JAK-2）蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-2抗體0.1mlJAK2（Tyrosine-proteinkinaseJAK2;Januskinase2;JAK-2）蛋白質(zhì)酪氨酸激酶JAK-2抗體0.2mlphosphoJAK2（phospho-Tyr1007+Tyr1008）磷酸化蛋白酪氨酸激酶JAK-2抗體0.2mlJNK1/3（c-Junamino-terminalkinase1/3）c-Jun氨基末端激酶1/3抗體0.2mlJab1（c-Junactivationdomain-bindingprotein1）Jun激活區(qū)域-連接蛋白1抗體0.2mlphospho-JNK1/2/3（pThr183/pTyr185）抗磷酸化氨基末端激酶1/2/3抗體0.2mlJNK1/2/3抗氨基末端激酶1/2/3抗體0.2mlKCNA5（Potassiumvoltage-gatedchannelsubfamilyAmember5）鉀電壓閥門通道混合器相關(guān)亞家族成員5抗體0.2mlKi-67Ki-67Antigen抗體0.2mlKi-67（AntigenidentifiedbymonoclonalantibodyKi67）Ki67抗體0.1mlKif14protein驅(qū)動蛋白家族Member14蛋白抗體0.2mlKiss-1（Metastasis-suppressorKiSS-1precursor）腫瘤轉(zhuǎn)移YZ基因抗體0.2mlKlf4（Kruppellikefactor4）腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子/上皮鋅指蛋白4抗體0.2mlphospho-Klf5/CKLF/Kruppellikefactor5（pSer272）磷酸化腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子5抗體0.2mlKLF6（Kruppel-likefactor6）轉(zhuǎn)染抑癌基因KLF6抗體0.2mlKLF13/RFLAT-1（Kruppellikefactor13）腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子130.2mlKLK1（Kallikrein1）激肽釋放酶1抗體0.2mlκOR（kappaOpioidreceptor）kappa型受體抗體0.2mlKLK3（Kallikrein3）激肽釋放酶3/舒血管素3抗體0.2mlRabbitIgG/AlexaFluor350AlexaFluor350標(biāo)記兔IgG（細(xì)胞流式同型對照）0.1mlMouseIgG/AlexaFluor350AlexaFluor350標(biāo)記小鼠IgG（細(xì)胞流式同型對照）0.1mlGoatIgG/AlexaFluor350AlexaFluor350標(biāo)記羊IgG（細(xì)胞流式同型對照）0.1mlKLK4（Kallikrein4）激肽釋放酶4抗體0.2mlKLK7（Kallikrein7）激肽釋放酶7抗體0.2mlKLK9（Kallikrein9）激肽釋放酶9抗體0.2mlKLK10（Kallikrein10）激肽釋放酶10抗體0.2mlKLK14（Kallikrein14）激肽釋放酶14抗體0.2mlK-ras原癌基因K-ras抗體0.1mlK-ras原癌基因K-ras抗體0.2mlKu70（ATPdependentDNAhelicase2subunit1）DNA修復(fù)酶Ku70抗體0.1mlGoatanti-rabbitIgG/AlexaFluor488AlexaFluor488標(biāo)記山羊抗兔IgG（H+L）0.1mlGoatanti-mouseIgG/AlexaFluor488AlexaFluor488標(biāo)記山羊抗小鼠IgG（H+L）0.1mlRabbitanti-mouseIgG/AlexaFluor488AlexaFluor488標(biāo)記兔抗小鼠IgG（H+L）0.1mlGoatanti-humanIgG/AlexaFluor488AlexaFluor488標(biāo)記山羊抗人IgG0.1mlKu70（ATPdependentDNAhelicase2subunit1）DNA修復(fù)酶Ku70抗體0.2mlKu-80DNA修復(fù)酶Ku-80抗體0.2mlKv1.3/PCN3（PotassiumChannelKv1.3）離子通道蛋白Kv1.3抗體0.2mlKv3.3/Kcnc3（potassiumvoltagegatedchannel,Shaw-relatedsubfamily,member3）離子通道蛋白Kv3.3抗體0.2mlLAMA3/Laminin5alpha3（Lamininalpha3）層粘蛋白α3抗體0.2mlβ-lactoglobulin（bovine）牛β-乳球蛋白抗體0.2mlLAG-3/CD223（Lymphocyteactivationgene3）淋巴細(xì)胞活化基因-3抗體0.2mlLangerin/CD207/CLEC4K（C-typelectindomainfamily4memberK）白細(xì)胞分化抗原CD207抗體0.2mlGoatanti-bovineIgG/AlexaFluor488AlexaFluor488標(biāo)記羊抗牛IgG0.1mlGoatanti-bovIgM/AlexaFluor488AlexaFluor488標(biāo)記羊抗牛IgM0.1mlGoatanti-chiIgG/AlexaFluor488AlexaFluor488標(biāo)記羊抗雞IgG0.1mlGoatanti-humanIgA/AlexaFluor488AlexaFluor488標(biāo)記羊抗人IgA0.1mlLAP18/stathmin（leukemiaassociatedprotein18）白血病相關(guān)蛋白18/癌蛋白18抗體0.2mlLAT/LAT1（LinkerforactivationofTcell1）T細(xì)胞活化連接蛋白0.2mlLAIR-1/CD305（Leukocyte-associatedimmunoglobulin-likereceptor1）白細(xì)胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體1抗體0.2mlLayilin透明質(zhì)酸受體抗體0.2mlgoatanti-mouseIgG（beads）兔抗小鼠IgG免疫磁珠2mlLAIR-2/CD306（Leukocyte-associatedimmunoglobulin-likereceptor2）白細(xì)胞相關(guān)免疫球蛋白樣受體2抗體0.2mlLCAT（lecithincholesterolacyltransferase）卵磷膽固醇酰基轉(zhuǎn)移酶抗體0.2mlLDL-R（Low-densitylipoproteinreceptorprecursor）低密度脂蛋白受體抗體0.2mlox-LDL（oxidizedlowdensitylipoprotein）抗氧化低密度脂蛋白抗體0.2ml[詳細(xì)]

  2018-09-14 10:01

  產(chǎn)品樣冊

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• 大鼠肝細(xì)胞生長因子酶聯(lián)免疫分析

  大鼠肝細(xì)胞生長因子酶聯(lián)免疫分析試劑盒使用說明書本試劑盒僅供研究使用。檢測范圍：96T25ng/L-900ng/L使用目的：本試劑盒用于測定大鼠血清、血漿及相關(guān)液體樣本中肝細(xì)胞生長因子（HGF）含量。實(shí)驗(yàn)原理本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大鼠肝細(xì)胞生長因子（HGF）水平。用純化的大鼠肝細(xì)胞生長因子（HGF）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入肝細(xì)胞生長因子（HGF），再與HRP標(biāo)記的肝細(xì)胞生長因子（HGF）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色。顏色的深淺和樣品中的肝細(xì)胞生長因子（HGF）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中大鼠肝細(xì)胞生長因子（HGF）濃度。[詳細(xì)]

  2018-10-03 10:00

  產(chǎn)品樣冊

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• FH0109-人肝細(xì)胞；HL-7702[L-02]

  FH0109-人肝細(xì)胞；HL-7702[L-02][詳細(xì)]

  2024-05-30 09:33

  應(yīng)用文章

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• FH1140-人正常肝細(xì)胞；WRL68

  FH1140-人正常肝細(xì)胞；WRL68[詳細(xì)]

  2024-05-30 09:33

  應(yīng)用文章

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• 利用iPSC衍生的肝細(xì)胞進(jìn)行多參數(shù)高內(nèi)涵肝細(xì)胞毒性檢測

  細(xì)胞活性染料(例如 Calcein AM)可以用來檢測活細(xì)胞中的化合物毒性。首先用各種化合物對肝細(xì)胞進(jìn)行 72小時處理并染色。通過ImageXpress Micro 系統(tǒng)的 10倍物鏡可以得到肝細(xì)胞的圖像，然后我們用 MetaXpress 軟件的 Multi-Wavelength Cell Scoring 應(yīng)用模塊對活細(xì)胞的整個核區(qū)域 (Hoechst 復(fù)染色)和細(xì)胞質(zhì)區(qū)域(Calcein AM)進(jìn)行分析([詳細(xì)]

  2021-02-19 13:46

  應(yīng)用文章

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• HBx蛋白通過調(diào)控原代小鼠肝細(xì)胞周期促進(jìn)HBV復(fù)制的分子機(jī)

  HBx蛋白通過調(diào)控原代小鼠肝細(xì)胞周期促進(jìn)HBV復(fù)制的分子機(jī)[詳細(xì)]

  2013-03-07 00:00

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