1976年德國馬普生物物理研究所Neher和Sakmann創(chuàng)建了膜片鉗技術(patch clamp recording technique)。這是一種以記錄通過離子通道的離子電流來反映細胞膜單一的或多個的離子通道分子活動的技術。它和基因克隆技術(gene cloning)并架齊驅,給生命科學研究帶來了巨大的前進動力。下面就讓小編帶你了解一下膜片鉗和其他技術結合應用以及膜片鉗實驗中常見術語
膜片鉗和其他技術結合應用
一、分析單一神經元離子通道表達的體外擴增
這是分子生物學技術和膜片鉗技術結合的一個例子。采用全細胞模式,使用直徑稍大一點的電極以便抽取單個神經元的胞漿內容。抽吸出來的胞漿在PCR后進行基因的分析,DNA的重組,然后與離子通道的功能和結構相結合,使得膜片鉗在生命科學領域的應用范圍極大地拓展了。

二、應用膜片鉗和鈣圖像技術來測定單一活細胞的鈣濃度
使用膜片鉗微電極往細胞內注入指示劑染料,然后使用共聚焦激光掃描顯微鏡搭配高靈敏度的CCD(charge-couple device)圖像記錄系統(tǒng),能夠對鈣的動態(tài)參數(shù)進行分析處理和快速測定。這些年來,此技術在耳鼻喉研究領域的到了廣泛的應用。
膜片鉗實驗中常見術語
1.吉歐封接
吉歐封接(gigant seal)指的是玻璃微電極和細胞的表面接觸緊密,在電學上與細胞膜的其它部分分離。
2.破膜
破膜(rupture)指的是在吉歐封接后,施加一個很小的負壓,使得細胞膜破裂,從而形成全細胞模式。
3.run-down
在全細胞模式破膜后,在負壓的作用下,細胞漿進入到微電極中,細胞很快的萎縮,能夠維持1小時左右的全細胞模式。
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