核酸提取儀是應(yīng)用配套的核酸提取試劑來使得樣本核酸提取工作自動完成的儀器。其在環(huán)境微生物檢測、食品安全檢測、輸血安全、法醫(yī)學(xué)鑒定、疾病控制ZX、臨床疾病診斷、生物學(xué)研究以及畜牧業(yè)等多種領(lǐng)域得到廣泛地應(yīng)用。下面就讓小編帶你了解一下TRIZOL配置方法以及使用方法。

配制方法

將以下物質(zhì)加入到2000ml的燒杯中，混合均勻：

17.6mL 0.75M 檸檬酸鈉溶液（pH≥7）

26.4mL 10%sarcosy（十二烷基肌氨酸鈉）溶液

50mL 2M NaAc溶液（pH≥4）

500ml重蒸苯酚

250g異硫氰酸胍

293mL蒸餾水

應(yīng)當(dāng)在4℃低溫下保存TRIzol。

注意：

1.NaAc等鹽類的作用是提供緩沖環(huán)境

2.水和苯酚部分互溶，Trizol中苯酚被水飽和，使均勻溶液形成。

使用方法

此方法用于提取細(xì)胞中的RNA，使用勻漿器磨碎組織，將TRIzol加入進(jìn)行組織的處理。5min中以后將氯仿加入，以12000r/min離心5min，樣品被分成有機(jī)層、中間層以及水樣層。RNA在水樣層中，收集水樣層后，RNA可以利用異丙醇沉淀獲取。

在將水樣層去除以后，也可以通過沉淀的方式相繼獲取中間層中的DNA和蛋白質(zhì)。中間層的DNA可以通過乙醇沉淀析出，將異丙醇加入到中間層可以將蛋白質(zhì)沉淀出來。

每100ml TRIzol能夠?qū)?00個50-80mg的組織樣品或100個六孔板中的樣品抽提出來。不管樣品來自于何處，使用該方法分離少量的組織（50-100mg)和細(xì)胞（約五百萬個）及大量的組織（≥1g）和細(xì)胞（超過一千萬個）的效果都比較好。

TRIzol操作上的簡便性使多個樣品的同時處理得到允許，能夠在一小時內(nèi)完成所有的操作。

TRIZOL抽提的總RNA可以使DNA和蛋白的污染得以避免。所以可以用于分子克隆、RNA酶保護(hù)分析、體外翻譯、poly(A)+ 選擇、斑點雜交、RNA印跡分析。

若用于PCR，當(dāng)在單一外顯子內(nèi)有兩條引物時，總RN的處理抽提使用級聯(lián)擴(kuò)大的DNase I(Cat. No. 18068）。