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電泳儀

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電泳儀電泳的常用方法

更新時間:2025-10-18 19:08:09 類型:電泳儀的原理 閱讀量:1884
導讀:利用在電場作用下帶電粒子向極性相反的電極方向移動的現(xiàn)象來實現(xiàn)多組分物質(zhì)分離、分析的儀器設備,稱為電泳儀。

利用在電場作用下帶電粒子向極性相反的電極方向移動的現(xiàn)象來實現(xiàn)多組分物質(zhì)分離、分析的儀器設備,稱為電泳儀。


常用方法

1.等速電泳

等速電泳(Isotachophoresis,ITP)采用兩種不同濃度的電解質(zhì),一種是前導電解質(zhì),在整個毛細管柱充滿,另一種是尾隨電解質(zhì),放入一端的電泳槽中。和所有樣品組分相比,前導電解質(zhì)的遷移率要更加的高,而尾隨電解質(zhì)的遷移率則比所有樣品組分更低,被分離的組分根據(jù)其不同的遷移率夾在中間,在強電場的作用下,各被分離組分移動于前導電解質(zhì)與尾隨電解質(zhì)之間的空隙中,從而使得分離實現(xiàn)。


11.jpg


2.雙向凝膠電泳

雙向凝膠電泳又叫做二維凝膠電泳,主要在對混合的蛋白質(zhì)組分分離和分析時使用,對于其能夠連續(xù)地將數(shù)千種蛋白質(zhì)分離,比其他方法更具有優(yōu)勢。

該方法diyi向采用等電聚焦,以復雜的蛋白質(zhì)成分中各個蛋白質(zhì)等電點差異為依據(jù)分離蛋白質(zhì),第二向采用十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳,根據(jù)蛋白質(zhì)分子量的大小使其在垂直方向從而分離,結(jié)果呈現(xiàn)斑點狀。


3.免疫電泳

結(jié)合瓊脂平板電泳和雙向免疫擴散兩種方法,為免疫電泳(Immunoelectrophoresis),首先在瓊脂平板上對抗原樣本進行電泳,分開其中的各種成份,然后將抗體加入做雙向免疫擴散,已分離的各抗原成分與抗體在瓊脂中擴散而相遇,在兩者比例適當?shù)牡胤叫纬蓮秃衔?,有可見的沉淀弧呈現(xiàn)。


4.紙電泳

電泳(Paper Electrophoresis,PE)是Z早使用的區(qū)帶電泳,其為支持介質(zhì)是濾紙的電泳方法。在分離如糖蛋白、脂蛋白等某些蛋白質(zhì)特別是氨基酸混合物時效果非常好。

兩個裝有緩沖溶液的容器之間水平架設濾紙條,在濾紙ZY點上樣品,當緩沖液潤濕濾紙條后,再將絕緣密封罩蓋上,就能夠通過電泳電源輸入直流電壓(100V-1000V)進行電泳。


5.醋酸纖維素薄膜電泳

分離速度快、電泳時間短、樣本用量少這些全是醋酸纖維素薄膜電泳優(yōu)點,醋酸纖維素薄膜電泳對于檢測病理情況下微量異常蛋白尤其合適,其在分離和測定血清蛋白、血紅蛋白、糖蛋白、結(jié)合球蛋白、脂蛋白、同工酶等的臨床醫(yī)學檢驗方面受到廣泛的應用。電泳時經(jīng)過膜的預處理、加樣、電泳、染色、脫色與透明就能夠使得分離效果令人滿意。


6.凝膠電泳

由區(qū)帶電泳派生出的一種用凝膠物質(zhì)作為支持物的電泳方式,稱為凝膠電泳(Gel Electrophoresis)。葡萄糖、交聯(lián)聚丙烯酰胺和瓊脂糖都屬于常用的凝膠。這種介質(zhì)具有多孔性,和分子篩的作用類似,能夠根據(jù)分子的大小逐一分離流經(jīng)凝膠的物質(zhì),所以在對蛋白質(zhì)的分子量測定時被廣泛的使用。


7.等電聚焦電泳

利用有pH梯度的介質(zhì),分離等電點不同的蛋白質(zhì)的一種電泳技術(shù),叫做等電聚焦電泳。往有pH梯度的凝膠介質(zhì)中加入等電點不同的蛋白質(zhì),在電場內(nèi)經(jīng)過一段時間后,各組分將分別在各自等電點相應的pH值位置上聚焦,Z后,一條清晰而穩(wěn)定的窄帶由樣品的各組分在各自的等電點聚焦而成。


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