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電泳儀

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影響電泳的因素

更新時(shí)間:2025-10-23 13:39:01 類(lèi)型:電泳儀的常見(jiàn)故障|注意事項(xiàng) 閱讀量:4351
導(dǎo)讀:利用在電場(chǎng)作用下帶電粒子向極性相反的電極方向移動(dòng)的現(xiàn)象來(lái)實(shí)現(xiàn)多組分物質(zhì)分離、分析的儀器設(shè)備,稱(chēng)為電泳儀。

利用在電場(chǎng)作用下帶電粒子向極性相反的電極方向移動(dòng)的現(xiàn)象來(lái)實(shí)現(xiàn)多組分物質(zhì)分離、分析的儀器設(shè)備,稱(chēng)為電泳儀


影響電泳的因素

1. 溫度

如果溫度過(guò)高,那么可能會(huì)加寬樣本分離帶;使對(duì)流產(chǎn)生,容易導(dǎo)致待分離物的混合;容易造成熱敏感樣本的蛋白質(zhì)變性;可能會(huì)降低介質(zhì)黏度,降低電阻,從而對(duì)電泳效果產(chǎn)生影響。


2. 電滲

電泳過(guò)程中液體對(duì)固體的相對(duì)移動(dòng),稱(chēng)為電滲,若電滲方向和待分離分子電泳方向一致,那么電泳速度加快,反之就減慢。。


12.jpg


3. 支持介質(zhì)

支持介質(zhì)的篩孔,能夠使分子分離,具有分子篩的作用。待分離生物大分子的電泳速度受到篩孔大小的影響明顯。篩孔大的介質(zhì)中,電泳速度快,反之則慢。另外,介質(zhì)的黏性起到吸附作用,會(huì)對(duì)泳動(dòng)阻礙。


4. 電場(chǎng)強(qiáng)度

電場(chǎng)強(qiáng)度越大,電泳速度越快。然而,通過(guò)介質(zhì)的電流強(qiáng)度會(huì)隨著電場(chǎng)強(qiáng)度的增大而增大,導(dǎo)致電泳過(guò)程中產(chǎn)熱過(guò)多,升高了介質(zhì)的溫度,從而對(duì)電泳效果產(chǎn)生影響。降低電流能夠使產(chǎn)生的熱量減少,然而會(huì)使電泳時(shí)間延長(zhǎng),使得待分離生物大分子的擴(kuò)散減慢從而對(duì)分離的效果產(chǎn)生影響。


5. 溶液性質(zhì)

主要在樣本溶液的pH、離子強(qiáng)度和黏度等方面體現(xiàn)。帶電粒子的解離程度受到pH影響,物質(zhì)所帶凈電荷的多少取決于pH。當(dāng)pH為蛋白質(zhì)的等電點(diǎn)時(shí),蛋白質(zhì)所帶凈電荷為零,此時(shí)蛋白質(zhì)在電場(chǎng)中不會(huì)發(fā)生移動(dòng)。

0.02-0.2的離子強(qiáng)度適合電泳。若離子強(qiáng)度過(guò)高,帶電顆粒會(huì)溶液中與其電荷性相反的離子在自己周?chē)纬呻x子擴(kuò)散層,從而使得粒子的電泳遷移速度降低。若離子強(qiáng)度過(guò)低,溶液pH變化會(huì)對(duì)電泳遷移速度產(chǎn)生影響。


基本原理

在正常情況下,物質(zhì)分子所帶正、負(fù)電荷量相等,帶電性不顯示。然而在一定的物理作用或化學(xué)反應(yīng)條件下,某些物質(zhì)分子會(huì)成為帶電的粒子。利用由于帶電性質(zhì)、顆粒形狀、大小及所帶電量差異,帶電粒子移動(dòng)速度及方向也不一樣的性質(zhì),來(lái)分離和分析樣本中不同成分。


分類(lèi)

根據(jù)原理不同分為:等速電泳、等電聚焦電泳、免疫電泳等。

根據(jù)電泳中是否使用支持介質(zhì)分為:自由電泳和區(qū)帶電泳。

根據(jù)自動(dòng)化程度不同分為:半自動(dòng)電泳和全自動(dòng)電泳。

根據(jù)用途不同分為:蛋白電泳、核酸電泳等。


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