透射電鏡，全稱透射電子顯微鏡，是用于觀察組織細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)的大型精密電子儀器，已廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等各個研究領(lǐng)域，成為研究細(xì)胞生物學(xué)、組織學(xué)、病理學(xué)、解剖學(xué)以及臨床病理診斷的重要工具之一。

　　一、開機(jī)程序

　　1、首先打開房間空調(diào)，冷卻循環(huán)水房溫度21度，操作室25度;

　　2、開啟冷卻水循環(huán)裝置，一個獨(dú)立的小的控制器，先將開關(guān)打至ON，再將按下POWER鍵;

　　3、啟動穩(wěn)壓電源，穩(wěn)定于220V，查看電壓箱供電指示燈亮;

　　4、用鑰匙啟動主機(jī)，從OFF檔位旋到START位，松開后鑰匙自動回到ON位置。透射電鏡自動抽真空，等待約40分鐘。

　　5、直至DP綠燈亮，HIGH綠燈亮，READY綠燈亮(若不亮的話，將LENS LIGHT打至ON檔位)。

　　二、電子槍合軸

　　1、確認(rèn)READY綠燈亮;

　　2、把樣品撥出，物鏡光欄撥出至0檔位;

　　3、加高壓：按下HT鍵后，依次按下40-60-80-100KV鍵，并注意觀察束流表是否正常，每次都要等電流表顯示穩(wěn)定之后再進(jìn)行下一步，一般調(diào)到80KV就行了。

　　4、加燈絲：將FILAMENT EMIISSION旋鈕緩慢旋至鎖定位置。

　　5、一般在SCAN(5300倍)條件下調(diào)節(jié)，調(diào)節(jié)CONDENSER鈕，得到光斑。

　　6、SPOT SIZE調(diào)到3檔，調(diào)節(jié)CONDENSER鈕聚光，得到Z小Z亮光斑，然后用左右ALIGNMENT：TRANS(小的)將光斑拉至ZZX位置(ZX位置有一黑點)。

　　7、SPOT SIZE調(diào)到1檔，調(diào)節(jié)CONDENSER鈕聚光，得到Z小Z亮光斑，然后用GUN ALIGNMENT：TRANS(X、Y)將光斑拉至ZX位置。

　　8、再重復(fù)6、7步驟，使束流不偏離ZX。

　　三、調(diào)燈絲相

　　1、透射電鏡在SCAN模式下，SPOT SIZE調(diào)到1檔。

　　2、將FILAMENT EMIISSION旋鈕稍稍往回調(diào)，到看到燈絲欠飽和像，即車輪像(魚眼像)，若車輪像不對稱，則進(jìn)行下面調(diào)節(jié)。

　　3、緩慢旋轉(zhuǎn)GUN ALIGNMENT：TILT(X、Y)，使燈絲像對稱。

　　4、然后調(diào)節(jié)FILAMENT EMIISSION旋鈕至燈絲飽和(即剛好全亮，沒有陰影)，并鎖定該位置。

　　四、粗對焦

　　1、透射電鏡關(guān)燈絲(FILAMENT EMIISSION旋鈕至OFF)后，插入樣品，插入物鏡光欄;

　　2、透射電鏡開燈絲(FILAMENT EMIISSION旋鈕至ON)后，放大光斑至滿屏(以免燒壞銅網(wǎng));

　　3、找到樣品，并選中一目標(biāo)為參照。

　　4、將IMAGE WOBBLER打至ON，此時看到樣品會有一定的晃動，調(diào)節(jié)FOCUS旋鈕(有大中小三個，一般只用到中和小)至透射電鏡圖像清晰沒有重影。

　　五、聚光鏡對中調(diào)節(jié)

　　1、透射電鏡關(guān)燈絲后，撥出樣品，撥出光欄，開燈絲，縮小光斑，檢查是否在ZX位置。

　　2、在SCAN模式，SPOT SIZE 1檔情況下，將COND ALIGNMENT打到ON，然后下面一WOBBLER鍵打到X，以調(diào)節(jié)光斑重合，同樣的方法進(jìn)行Y軸對中調(diào)節(jié)，調(diào)節(jié)完畢之后打到中間OFF檔。

　　3、將IMAGE WOBBLER鍵打到ON，調(diào)節(jié)IMAGE WOBBLER旋鈕至重合。

　　六、電流ZX調(diào)節(jié)

　　1、透射電鏡插入樣品，插入光欄，找到一樣品做為參照物，調(diào)節(jié)時放大倍數(shù)小于5萬倍。

　　2、用目鏡觀察，聚焦，找準(zhǔn)參照物，用FOCUS調(diào)焦至Z清晰。

　　3、快速反復(fù)轉(zhuǎn)動FOCUS旋鈕(以Z清晰位置為ZX前后旋轉(zhuǎn))，此時觀察參照物樣品的情況，如有放大縮小的情況(看到樣品是以某點為ZX在旋轉(zhuǎn))那就是正常的，若是樣品有左右或者上下移動的現(xiàn)象，就需要調(diào)節(jié)ALIGNMENT的大旋鈕，TILT鈕直至正常。

　　七、電壓ZX調(diào)節(jié)

　　1、在第六步的基礎(chǔ)上，放大倍數(shù)(大于5萬倍)。

　　2、找到一參照物，調(diào)焦至Z清晰。

　　3、HVWOBBLER置于ON，若參照物不偏離ZX而四周同心振動，則電壓ZX良好，反之，若參照物有漂移，則用左右ALIGNMENT：TILT調(diào)節(jié)。

　　八、光欄的調(diào)節(jié)

　　1、聚光鏡光欄調(diào)節(jié)：判斷透射電鏡光欄是否在中間位置，調(diào)節(jié)CONDENSER時，光斑不在中間，放大時會有很大陰影(電子束被東西擋住)，移動樣品時也沒有改變，此時可以斷定是光欄位置不正確，通過調(diào)節(jié)光欄上兩個旋鈕，使光欄回到ZX位置。

　　2、物鏡光欄調(diào)節(jié)：打開FUNCTION：SADIFF(控制臺D區(qū)，與SCAN一排的一個按鈕)，調(diào)節(jié)SA/HD DIFFRACTION：CAMERA LENGTH(控制臺B區(qū))和物鏡光欄上的兩個旋鈕，使得中間Z亮點周圍的一圈較暗的光斑變得對稱即可。

　　九、聚光鏡像散調(diào)節(jié)

　　透射電鏡在沒有放入樣品的情況下：插入聚光鏡光欄(2檔)，SPOT SIZE調(diào)至3檔，調(diào)節(jié)CONDENSER鈕至光斑Z小Z亮，再調(diào)節(jié)COND STIGMATORX、Y旋鈕，使得光斑變得Z圓，即完成聚光鏡像散調(diào)節(jié)。

　　十、物鏡像散調(diào)節(jié)

　　1、在完成以上調(diào)節(jié)，即確認(rèn)透射電鏡對中狀態(tài)良好，電壓ZX對中，無聚光鏡像散，光欄位置正確的情況下進(jìn)行物鏡像散調(diào)節(jié)。

　　2、插入物鏡光欄，在觀察樣品的時候調(diào)節(jié)，在高倍下(大于10萬倍)找到一樣品作為參照，改變焦距，觀察樣品邊沿系統(tǒng)是否均勻，若有像散，則進(jìn)行以下操作。

　　3、配合調(diào)節(jié)OBJ STIGMATOR：X、Y旋鈕(控制臺E區(qū))和FOCUS旋鈕，消除像散。

　　十一、樣品裝卸操作

　　1、確認(rèn)樣品裝卸時透射電鏡狀態(tài)：放大倍數(shù)調(diào)至較小倍數(shù)，燈絲發(fā)射至OFF。

　　2、右邊的旋轉(zhuǎn)手柄有四個檔位：空檔位、SET、AIRLOCK、ENG，觀察樣品的時候一定在SET檔位，ENG檔位用來換樣品，當(dāng)需要打開左邊的樣品室時，一定要放置在AIRLOCK檔位，空檔位只是做一個過渡。

　　3、左邊的樣品室旋轉(zhuǎn)手柄上有兩種標(biāo)識，一種是數(shù)字(1-6)，另外間于數(shù)字中間的是一些點，當(dāng)數(shù)字對正時，可以用右邊的旋轉(zhuǎn)手柄把相應(yīng)的樣品從樣品室中取出。當(dāng)需要打開樣品室換下一批樣品時，要保證所有的樣品都留在樣品室，這樣就要讓數(shù)字中間的點對正，再將右邊的旋轉(zhuǎn)手柄拉出。

　　4、當(dāng)右邊旋轉(zhuǎn)手柄置于AIRLOCK檔位時可以打開樣品室，左邊有一能上下扳動的把手。

　　十二、關(guān)機(jī)程序

　　1、放大倍數(shù)降至小于1萬倍，光斑滿屏。

　　2、退燈絲至OFF。

　　3、退高壓，可直接按下20KV按扭，再按高壓鍵HT(燈滅)。

　　4、鑰匙旋至OFF，等待約15分鐘，透射電鏡面板上所有的燈都熄滅，機(jī)械泵停止工作，關(guān)冷卻水裝置，關(guān)穩(wěn)壓電源，關(guān)電源開關(guān)。