轉(zhuǎn)膜儀是用來轉(zhuǎn)印蛋白的儀器。電泳轉(zhuǎn)印為轉(zhuǎn)移蛋白Z常用的方法，該技術(shù)有效、迅速，并且使得蛋白在凝膠中保持高分辨率。在凝膠中向印跡膜載體轉(zhuǎn)印分離的蛋白質(zhì)的過程，即是電泳轉(zhuǎn)印法。因?yàn)榇思夹g(shù)往膜上轉(zhuǎn)印蛋白GX、快速和準(zhǔn)確，并且能夠使得蛋白在凝膠中保持高分辨率。因此在轉(zhuǎn)移印跡技術(shù)中得到廣泛的應(yīng)用。

分類

在轉(zhuǎn)膜儀器制造商的網(wǎng)站上能夠找到轉(zhuǎn)膜流程的詳細(xì)說明，按照系統(tǒng)存在差異而有所不同。然而每種方法的原理均一致。在電場中，SDS提供的帶電荷的蛋白能夠在凝膠中移動(dòng)，由凝膠往膜上轉(zhuǎn)移，將蛋白的“印跡”顯示出來。早期的方法對(duì)于擴(kuò)散有所依賴，如今標(biāo)準(zhǔn)方法即是在電場中進(jìn)行印跡。

轉(zhuǎn)膜包括濕轉(zhuǎn)和半干轉(zhuǎn)。因?yàn)槟じ稍?，濕轉(zhuǎn)濕轉(zhuǎn)更不容易，特別建議大蛋白轉(zhuǎn)膜使用。兩種轉(zhuǎn)膜方法，均是在凝膠旁邊放置放置，在在濾紙中間夾著凝膠和膜，在固體載體之間夾著整個(gè)三明治結(jié)構(gòu)，使得膠與膜之間保持緊密接觸。

半干轉(zhuǎn)

在半干轉(zhuǎn)中，由濾紙、凝膠、濾紙組成三明治，將三明治浸入轉(zhuǎn)膜緩沖液中，在正負(fù)電極之間直接放置，在轉(zhuǎn)膜中，將凝膠和負(fù)極靠近，將膜和正極靠近，非常重要。半干轉(zhuǎn)的轉(zhuǎn)膜緩沖液中Tris和甘氨酸的比例不一定相同于濕轉(zhuǎn)，48 mM Tris39mM甘氨酸、0.04%SDS、20%甲醇為標(biāo)準(zhǔn)配方，應(yīng)當(dāng)對(duì)儀器制造商的實(shí)驗(yàn)方案進(jìn)行參考。

濕轉(zhuǎn)

在濕轉(zhuǎn)中,在海綿和濾紙之間緊緊地夾著在海綿和濾紙。（由下至上依次海綿、濾紙、凝膠、膜、濾紙、海綿）,使氣泡不會(huì)在凝膠與膜之間形成得以確保。在轉(zhuǎn)膜緩沖液中浸泡這三明治結(jié)構(gòu)，對(duì)其施加電場。負(fù)電荷蛋白移向正極，在膜上結(jié)合，并對(duì)其繼續(xù)移動(dòng)進(jìn)行阻止。1tris甘氨酸緩沖液為濕轉(zhuǎn)的標(biāo)準(zhǔn)緩沖液與跑膠緩沖液所使用的緩沖液，然而SDS卻沒有，并且將甲醇加入至終濃度20%，建議在轉(zhuǎn)膜緩沖液中相對(duì)于分子量大于100kd的蛋白來說將終濃度為0.1%的SDS加入。