GX液相色譜柱切換法測定血液及腹腔液中5-氟尿嘧啶的濃度； 評價GX液相色譜柱切換法在測定體液中5-氟尿嘧啶(5FU)濃度的優(yōu)點方法：GX液相色譜柱切換法測定血及腹腔液中5FU濃度結果：標準曲線的回歸方程為Y=9.69×10-6X-1.33,r=0.999 8,P＜0.000 1；體液測定5FU濃度的RSD為0.2%～5.6%，但是濃度小于或等于0.05 g.mL-1時，RSD為15.7%體液中5FU的回收率為88.87%～116.8%測定的Z小濃度為0.05 g.mL-1結論：GX液相色譜柱切換法有樣品處理簡捷快速，靈敏度高，重復性好等優(yōu)點；在臨床藥物監(jiān)測時，可以起主要的作用 關鍵詞5-氟尿嘧啶GX液相色譜柱切換法體液 在胃腸道惡性腫瘤輔助化療中，5-氟尿嘧啶(5FU)被公認為效果較好的藥物［1，2］其臨床給YF式較多，外周靜脈注射，門靜脈注射，肝動脈注射，腹腔注射，口服，灌腸等各臨床醫(yī)院以經驗為根據(jù)選擇某種給YF式用藥的量及注射藥物的速度也同樣缺少實驗根據(jù)為了確定各給YF法的優(yōu)點及其可行性，研究各種給藥途徑及不同藥量的藥代動力學特點對指導臨床用藥有重要的意義 對5FU的測定報道有GX液相色譜法［3～5］但較為繁瑣為此我們建立了GX液相色譜柱切換法，不經提取，直接測定血液及腹腔液中的5FU濃度本法具有樣品處理簡捷快速，靈敏度高等優(yōu)點特別適應于臨床血液及其他體液藥物濃度的監(jiān)測及藥代動力學研究 1儀器與試藥 GX液相色譜泵：SP8810，Spectra Physics,USA；可變波長紫外線檢測儀：Spectra 200,Spectra Physics,USA；數(shù)據(jù)處理機：Data jet integrator,Spectra Physics,USA 5FU標準品：由Sigma公司提供；10%高氯酸及磷酸二氫鈉：AR級，北京化工廠；去離子水：Millipore-Q 2色譜條件 色譜柱：YWG-C18柱(4.6 mm×250 mm)，北京分析儀器廠；保護柱：Waters Gaund-PAKTM；流動相：0.05 mol.L-1磷酸二氫鈉；流速：1 mL.min-1；紫外檢測波長：256 nm；室溫下操作 儀器操作方法：用六通閥連接3個色譜柱先用被測物的標準品測知其流經**色譜柱的保留時間根據(jù)已知的保留時間，再將小段攜有樣品峰的流動相切換到第二色譜柱上進一步分離并檢測六通閥在標準品保留時間前后40 s切換 3標準液的配制 精密稱取5FU標準品50 mg于50 mL容量瓶中，加去離子水溶解并稀釋至刻度，配成濃度為1 000 g.mL-1的5FU溶液取該液分別配成0.05，0.1,0.2,1.0,2.0,6.0,10,20,40,80,100,500 g.mL-1系列濃度的5FU標準液 4血及腹腔內液標本的處理 靜脈取血，靜置至開始出現(xiàn)血凝現(xiàn)象，用小塑料棍稍微攪拌后，離心5 min(離心力=133×g)取血清0.5 mL，分2次加10%高氯酸0.1 mL每次加后，旋渦混合機中振動5 min，再次離心5 min(離心力=133×g)取上清液經過0.45 m微孔濾膜濾過取20 L進樣 腹腔液的處理同血液 5結果與討論 5.15FU色譜圖5FU標準品以及未經5FUZL的血清添加5FU標準液經過處理后，分別用單柱法及柱切換法HPLC測定的色譜圖見圖1及圖2 圖15FU標準品的色譜圖 A.單柱法B.柱切換法 1. 5FU 圖2血清中添加5FU的色譜圖 A.單柱法B.柱切換法 1. 5FU 5.2線性關系取不同濃度的5FU標準液20 L，進樣以峰面積對濃度作圖，繪制標準曲線得出的回歸方程為： Y=9.69×10-6X-1.33r=0.999 8 P＜0.000 1，因此可知5FU濃度在0.05～500 g.mL-1呈線性關系 5.3回收率試驗取血清0.45 mL，分別加入不同濃度的5FU標準液50 L，配成5FU 1，10，50，100 g.mL-1的血清液經過上述樣品處理方法處理后，取20 L進樣1種濃度作3份平行樣品腹腔液的處理同血清結果血清中5FU的回收率為88.87%～116.8%，RSD＜10.8%；腹腔液中5FU的回收率為96.22%～115.6%，RSD＜12.7% 5.4精密度試驗每種濃度的標準液作3份平行樣品，計 7725i液相色譜手動進樣閥