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制備方法:
1、對(duì)照品溶液:
莫諾苷對(duì)照品、馬錢(qián)苷對(duì)照品、芍藥苷對(duì)照品及丹皮酚對(duì)照品適量,精密稱(chēng)定,加甲醇制成每1ml含莫諾苷20μg、馬錢(qián)苷20μg、芍藥苷40μg、丹皮酚40μg的混合溶液,即得。
2、樣品溶液:
取本品水蜜丸或小蜜丸,切碎,取約1g,精密稱(chēng)定;或取重量差異項(xiàng)下的本品大蜜丸,剪碎,取約1g,精密稱(chēng)定,置具塞錐形瓶中,精密加入50%甲醇25ml,密塞,稱(chēng)定重量,加熱回流1小時(shí),放冷,再稱(chēng)定重量,用50%甲醇補(bǔ)足減失的重量,搖勻,濾過(guò),取續(xù)濾液,即得。
色譜柱: Sliversil C18 250*4.6 mm,5 μm(99202)
流動(dòng)相: A:乙腈 B: 0.3% 磷酸
流速: 1.0 mL/min
柱溫: 30 ℃
檢測(cè)器: 莫諾苷、馬錢(qián)苷、芍藥苷UV 240 nm,丹皮酚UV 274 nm
進(jìn)樣量: 10 μL
參照2015藥典公示方法進(jìn)行歸芍地黃丸中莫諾苷、馬錢(qián)苷、芍藥苷、丹皮酚的檢測(cè)
梯度:
? ? ? ? ? ? 時(shí)間 | A% | B% |
0-5 | 5-8 | 95-92 |
5-20 | 8 | 92 |
20-35 | 8-20 | 92-80 |
35-45 | 20-60 | 80-40 |
45-55 | 60 | 40 |
對(duì)照品溶液:

?峰號(hào) | 保留時(shí)間 min | 峰面積 μV*s | 峰高 μV | 理論塔板數(shù) N | USP拖尾因子 | 分離度 |
1 | 21.525 | 370126 | 7884 | 4619.270 | 1.049 | -- |
2 | 34.110 | 245675 | 23524 | 230963.246 | 0.997 | 16.231 |
3 | 37.341 | 408339 | 24487 | 159754.621 | 1.852 | 9.829 |

?峰號(hào) | 保留時(shí)間 min | 峰面積 μV*s | 峰高 μV | 理論塔板數(shù) N | USP拖尾因子 | 分離度 |
1 | 49.737 | 1425662 | 203486 | 1027514.143 | 1.130 | -- |
供試品溶液:

?峰號(hào) | 保留時(shí)間 min | 峰面積 μV*s | 峰高 μV | 理論塔板數(shù) N | USP拖尾因子 | 分離度 |
1 | 21.718 | 212788 | 4940 | 5473.379 | 1.166 | -- |
2 | 34.158 | 257953 | 25358 | 241641.248 | 1.117 | 17.133 |
3 | 37.439 | 618796 | 44760 | 193129.770 | 1.576 | 10.605 |

?峰號(hào) | 保留時(shí)間 min | 峰面積 μV*s | 峰高 μV | 理論塔板數(shù) N | USP拖尾因子 | 分離度 |
1 | 49.749 | 2565150 | 371448 | 1059441.453 | 1.117 | -- |
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