一環(huán)境污染源處理:
(1)稀酸處理法:對(duì)可疑器具用1mol/L鹽酸擦拭或浸泡,使殘余DNA脫嘌呤
(2)紫外照射法: 254/300nm波長(zhǎng)紫外線照射30分鐘適用于500bp以上長(zhǎng)片段核酸
二反應(yīng)液污染源處理:
(1)DNase I法:PCR混合液(未加模板和Taq聚合酶)加入0.5U DNase I,室溫反應(yīng)30 min后加熱滅活,然后加入模板和Taq聚合酶進(jìn)行正常PCR擴(kuò)增該方法的優(yōu)點(diǎn)是不需要知道污染DNA的序列
(2)內(nèi)切酶法:選擇識(shí)別4個(gè)堿基的內(nèi)切酶(如Msp I和Taq I等),可同時(shí)選擇幾種,以克服用一種酶只能識(shí)別特定序列的缺陷,室溫作用1h 后加熱滅活進(jìn)行PCR
(3)紫外照射法:未加模板和Taq聚合酶的PCR混合液進(jìn)行紫外照射,適用于500bp以上長(zhǎng)片段核酸 PCR基因擴(kuò)增儀|熒光定量基因擴(kuò)增儀|梯度PCR基因擴(kuò)增儀
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