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糖基化蛋白,包括促紅細(xì)胞生成素、單克隆抗體和各種 激素等,構(gòu)成了目前已經(jīng)得到臨床使用的生物藥物主要 品種。通常附著于多糖分子的末端位置的唾液酸,在許 多生物過(guò)程如細(xì)胞識(shí)別和遷移中發(fā)揮重要作用。另外, 唾液酸也對(duì)蛋白質(zhì)藥物的特性,尤其對(duì)蛋白質(zhì)藥物的循環(huán) 半衰期有顯著影響。比如,唾液酸化的促紅細(xì)胞生成素的 循環(huán)半衰期是 5.6 小時(shí),而非唾液酸化的促紅細(xì)胞生成素 是 1.4 小時(shí)。1 因此,監(jiān)測(cè)蛋白質(zhì)的糖基化,包括唾液酸化, 對(duì)于糖蛋白的性質(zhì)研究和生物藥物的生產(chǎn)質(zhì)量控制有重 要意義。 監(jiān)測(cè)糖化蛋白質(zhì)常用的方法包括完整蛋白質(zhì)糖型和寡糖 譜分析。常見(jiàn)的寡糖譜分析(包括熒光標(biāo)記或未標(biāo)記兩 種方法)需要酶解釋放蛋白質(zhì)上的寡糖,所以比較費(fèi)時(shí) 費(fèi)力。而完整的蛋白糖基化監(jiān)測(cè)不需要酶解,相對(duì)方便 簡(jiǎn)單,而且對(duì)分離出來(lái)的不同糖型的蛋白質(zhì)可以進(jìn)行進(jìn) 一步的表征分析?,F(xiàn)在常用的毛細(xì)血管電泳用來(lái)分析完 整蛋白糖基化的分辨率稍差,也不易標(biāo)準(zhǔn)化。
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