紙色譜法 以紙為載體，用單一溶劑或混合溶劑進(jìn)行分配亦即以紙上所含水分或其他物質(zhì)為固定相，用流動相進(jìn)行展開的分配色譜法 所用濾紙應(yīng)質(zhì)地均勻平整，具有一定機(jī)械強(qiáng)度，必須不含會影響色譜效果的雜質(zhì)，也不應(yīng)與所用顯色劑起作用，以免影響分離和鑒別效果，必要時可作特殊處理后再用 試樣經(jīng)層析后可用比移值（Rf）表示各組成成分的位置（比移值=原點ZX至色譜斑點ZX的距離與原點ZX至流動相前沿的距離之比），由于影響比移值的因素較多，因此一般采用在相同實驗條件下對照物質(zhì)對比以確定其異同作為單體鑒別時，試樣所顯主色譜斑點的顏色（或熒光）與供置，應(yīng)與對照（標(biāo)準(zhǔn)）樣所顯主色的譜斑點或供試品-對照品（11）混合所顯的主色譜斑點相同作為質(zhì)量指標(biāo)（純度）檢查時，可取一定量的試樣，經(jīng)展開后，按各單體的規(guī)定，檢視其所顯雜質(zhì)色譜斑點的個數(shù)或呈色（或熒光）的強(qiáng)度作為含量測定時，可將色譜斑點剪下洗脫后，再用適宜的方法測定，也可用色譜掃描儀測定 1下行法 所用色譜缸一般為圓形或長方形玻璃缸，缸上有磨口玻璃蓋，應(yīng)能密閉，蓋上有孔，可插入分液漏斗，以加入流動相在近缸頂端有一用支架架起的玻璃槽作為流動相的容器，槽內(nèi)有一玻璃棒，用以支持色譜濾紙使其自然下垂，避免流動相沿濾紙與溶劑槽之間發(fā)生虹吸現(xiàn)象 取適當(dāng)?shù)纳V濾紙按纖維長絲方向切成適當(dāng)大小的紙條，離紙條上端適當(dāng)?shù)木嚯x（使色譜紙上端能足夠浸入溶劑槽內(nèi)的流動相中，并使點樣基線能在溶劑槽側(cè)的玻璃支持棒下數(shù)厘米處）用鉛筆劃一點樣基線，必要時色譜紙下端可切成鋸齒形，以便于流動相滴下 將試樣溶于適當(dāng)?shù)娜軇┲?，制成一定濃度的溶劑用微量吸管或微量注射器吸取溶劑，點于點樣基線上，溶液宜分次點加，每次點加后，俟其自然干燥低溫烘干或經(jīng)溫?zé)釟饬鞔蹈蓸狱c直徑一般不超過0.5cm，樣點通常應(yīng)為圓形 將點樣后的色譜濾紙上端放在溶劑槽內(nèi)，并用玻璃棒壓住，使色譜紙通過槽側(cè)玻璃支持棒自然下垂，點樣基線在支持棒下數(shù)厘米處色譜開始前，色譜缸內(nèi)用各單體中所規(guī)定的溶劑的蒸氣飽和，一般可在色譜缸底部放一裝有流動相的平皿，或?qū)⒔辛鲃酉嗟臑V紙條附著在色譜缸的內(nèi)壁上，放置一定時間，俟溶劑揮發(fā)使缸內(nèi)充滿飽和蒸氣然后添加流動相，使浸沒溶劑槽內(nèi)濾紙，流動相即經(jīng)毛細(xì)管作用沿濾紙移動進(jìn)行展開至規(guī)定距離后，取出濾紙，標(biāo)明流動相前沿位置，俟流動相揮散后按規(guī)定方法檢出色譜斑點 2上行法 色譜缸基本和下行法相似，唯除去溶劑槽和支架，并在色譜缸蓋上的孔中加塞，塞中插入玻璃懸鉤，以便將點樣后的色譜濾紙掛在鉤上色譜濾紙一般長約25cm，寬度則視需要而定必要時可將色譜濾紙卷成筒形點樣基線距底邊約2.5cm，點樣方法與下行法相同色譜缸內(nèi)加入適量流動相，放置，俟流動相蒸氣飽和后，再下降懸鉤，使色譜濾紙浸入流動相約0.5cm，流動相即經(jīng)毛細(xì)管作用沿色譜濾紙上升，除另有規(guī)定外，一般展開至15cm后，取出晾干，按規(guī)定方法檢視 色譜可以向一個方向進(jìn)行，即單向色譜；也可進(jìn)行雙向色譜，即先向一個方向展開，取出，俟流動相完全揮發(fā)后，將濾紙轉(zhuǎn)90°，再用原流動相或另一種流動相進(jìn)行展亦可多次展開，連續(xù)展或徑向色譜等