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以下介紹一種Z常用的方法: 堿裂解法:此方法適用于小量質(zhì)粒DNA的提取,提取的質(zhì)粒DNA可直接用于酶切PCR擴增銀染序列分析方法如下: 1接1%含質(zhì)粒的大腸桿菌細胞于2ml LB培養(yǎng)基 237振蕩培養(yǎng)過夜 3取1.5ml菌體于Ep管,以4000rpm離心3min,棄上清液 4加0.lml溶液I(1%葡萄糖,50mM/L EDTA pH8.0,25mM/L Tris-HCl pH8.0)充分混合 5加入0.2ml溶液 II(0.2 mM/L NaOH,1% SDS),輕輕翻轉(zhuǎn)混勻,置于冰浴5 min 6加入0.15m1預(yù)冷溶液III(5 mol/L KAc,pH4.8),輕輕翻轉(zhuǎn)混勻,置于冰浴5 min 7以10,000rpm離心20min,取上清液于另一新Ep管 湘儀H2050R臺式高速冷凍離心機

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