目的：對人胰高血糖素樣肽-1（hGLP-1）進(jìn)行基因突變，構(gòu)建GST融合蛋白原核表達(dá)質(zhì)粒pGEX-4T/（Val8）hGLP-1，并在大腸桿菌中誘導(dǎo)表達(dá)方法：選擇大腸桿菌偏愛密碼子，將hGLP-1（7～37）第2位的丙氨酸（Ala8）定點(diǎn)突變?yōu)槔i氨酸（Val8），直接生物合成4個(gè)寡聚核苷酸片段并進(jìn)行基因拼接，形成完整的hGLP-1突變體基因（Val8）hGLP-1，并連接到載體pGEX-4T-1，轉(zhuǎn)化大腸桿菌BL21，BamH I與Xho I雙酶切電泳鑒定與序列測定，然后誘導(dǎo)表達(dá)其融合蛋白結(jié)果：經(jīng)酶切電泳鑒定與測序分析，證實(shí)所合成的突變體基因（Val8）hGLP-1已克隆到pGEX-4T-1中，經(jīng)SDS-PAGE分析可以誘導(dǎo)表達(dá)出融合蛋白結(jié)論：成功地構(gòu)建了GST融合蛋白原核表達(dá)質(zhì)粒pGEX-4T/（Val8）hGLP-1，為進(jìn)一步獲得重組hGLP-1蛋白奠定基礎(chǔ)，為產(chǎn)業(yè)化規(guī)模制備hGLP-1突變體提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)