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DNA核酸濃度的測(cè)定實(shí)驗(yàn)應(yīng)用方案(超微量紫外分光法)
引言
寡核苷酸,單鏈、雙鏈DNA,以及RNA可以定量溶于緩沖液,構(gòu)成核酸的嘌呤堿和嘧啶堿具有共軛雙鍵,使核苷核和核酸在紫外線光具有特征性的吸收光譜,Zda吸收峰為260nm。窄光帶紫外分光光度計(jì),長260nm.,比色杯光徑1cm,1個(gè)吸光度值(1A)相當(dāng)于50ug/ml雙螺DNA,40ug/ml單螺旋DNA或RNA),20 ug/ml寡核苷酸。
測(cè)試前,選擇正確的程序,輸入原液和稀釋液的體積,爾后測(cè)試空白液和樣品液。然而,實(shí)驗(yàn)并非一帆風(fēng)順。讀數(shù)不穩(wěn)定可能是實(shí)驗(yàn)者Z頭痛的問題。靈敏度越高的儀器,表現(xiàn)出的吸光值漂移越大。
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