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       傳統(tǒng)的細(xì)胞鋪板一般采用手動的有限稀釋法來進行,這種方法在需要的操作簡單,只需要普通的排槍就能實現(xiàn),但是效果卻很不理想。主要體現(xiàn)在:一致性差,有效孔比例低下,費時間等。

        近年來,單抗藥物的開發(fā)領(lǐng)域又被推上了一個新的高度,越來越多的公司都紛紛投入到這個熱潮當(dāng)中,隨之而來的相關(guān)法規(guī)的要求也是越來越嚴(yán)格。在眾多的要求當(dāng)中,FDA對藥物來源的單克隆源性的要求非常嚴(yán)格,這就要求生產(chǎn)和研發(fā)的企業(yè)在細(xì)胞株開發(fā)階段做到嚴(yán)格的單克隆驗證。目前市面上已經(jīng)有幾款孔板掃描設(shè)備能夠得到FDA的認(rèn)可,他們的數(shù)據(jù)可以用來作為單克隆源性的證明。在這里我們要討論的是在驗證前的分離階段,如何快速、準(zhǔn)確、GX的獲得單細(xì)胞。除了上面提到的有限稀釋法之外,昂貴的流式細(xì)胞分選儀也可以用來作為單細(xì)胞鋪板工具之一,當(dāng)然流式除了操作復(fù)雜,需要專人維護之外,分選得到的細(xì)胞常常復(fù)蘇比例比較低。在流式分選中,細(xì)胞的損傷比較大。

       Namocell單細(xì)胞分離儀為細(xì)胞鋪板提供了全新解決方案。該設(shè)備采用Zxin的微流體ZL技術(shù)能夠?qū)崿F(xiàn)快速,GX,準(zhǔn)確的細(xì)胞鋪板工作。并且分離過程輕柔,不會影響細(xì)胞的后續(xù)生長。能廣泛應(yīng)用于單抗開發(fā)中的CLD環(huán)節(jié),以及單細(xì)胞測序等。

20180505-1227561457.jpg

      Namocell單細(xì)胞分離用于細(xì)胞鋪板的原理如下:

將細(xì)胞通過一次性的芯片上端加樣孔,注入到芯片腔體中。單細(xì)胞流在微流控通道中流過激光檢測區(qū)域,機器能對細(xì)胞進行識別,去除掉細(xì)胞碎片,死細(xì)胞以及狀態(tài)較差的細(xì)胞,使得Z終落到孔板中的細(xì)胞都具有很好的活性。高速電子閥門能夠極ng確捕獲每一個活性細(xì)胞,Z終形成1ul體積的液滴,輕柔地落進孔板中。整個過程對細(xì)胞的損傷可以忽略不計,所以分選得到的細(xì)胞絕大多數(shù)的細(xì)胞都能再次分裂生長。

整個過程非常快速,一般一塊9孔板分選需要1min左右,單個細(xì)胞一個孔的比例在85%~90%,一般細(xì)胞復(fù)蘇的比例在40%~65%(復(fù)蘇比例跟細(xì)胞本身有很大關(guān)系)。

 

特點:

快速---一塊96孔板1min

GX---單細(xì)胞鋪板比例近90%

活性---無損分選,高復(fù)蘇比例

無菌---一次性無菌芯片,可保證無菌分選,并且避免樣本交叉污染

有效性.jpg

Namocell單細(xì)胞分離儀細(xì)胞鋪板有效性

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Namocell單細(xì)胞分離儀鋪板的細(xì)胞生長情況

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