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色譜柱:Diamonsil C18(2) 250×4.6 mm, 5μm (Cat#:99603)
流動相:A為乙腈,B為1%三乙胺(磷酸調節(jié)pH=2.2),梯度洗脫:0~15min,20%~35%
流速:1.0mL/min
柱溫:40 ℃
進樣量:20μL
檢測器:G1315B DAD 檢測器,280nm
摘要:目的建立反相GX液相色譜法測定人尿中右美沙芬及其代謝產物去甲右美沙芬濃度的方法.方法以非那西丁為內標,尿樣經水解,堿化后用正己烷-正丁醇(9:1)萃取,采用Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm,5μm)分析.色譜條件:流動相為乙腈(A)-1%三乙胺(磷酸調節(jié)pH=2.2,B),梯度洗脫,0~15min,20%~35%A,流速為1.0mL/min,檢測波長為280nm,柱溫40℃.結果右美沙芬在0.05~2.0μg/mL范圍內線性良好(r=0.9999,n=5),檢測限為0.04μg/mL;去甲右美沙芬尿樣濃度在0.5~20.0μg/mL范圍內線性良好(r=0.9999,n=5),檢測限為0.4μg/mL.兩者日內、日間精密度RSD均<10%,低、中、高濃度的提取回收率在94%~108%之間.結論此方法簡便準確、重復性好,適用于CYP2D6表型分析以及右美沙芬與其代謝產物的人體藥代動力學研究.
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