背景
USP <643> 提供注射用水和純化水TOC分析的指南和要求。該方法提出了一個(gè)系統(tǒng)適應(yīng)性測試，比較蔗糖(相對(duì)容易氧化的化合物)的標(biāo)準(zhǔn)溶液(rs)和1,4-苯醌(較難氧化的化合物)的系統(tǒng)適宜性溶液(rss)的回收率。從每個(gè)溶液的響應(yīng)中減去試劑水(rw)的響應(yīng)得到一個(gè)正確的響應(yīng)。然后對(duì)校正后的響應(yīng)進(jìn)行比較，每個(gè)響應(yīng)的誤差必須在15%以內(nèi)，以驗(yàn)證該系統(tǒng)將徹底氧化具有不同親和力的有機(jī)碳化合物。根據(jù)圖1中的等式，散裝水和無菌水標(biāo)準(zhǔn)的響應(yīng)效率必須為85%-115%，以滿足USP<643>的要求。

TeledyneTekmar應(yīng)用概述：簡化流程:使用下一代TOC分析儀，自動(dòng)使用USP< 643 >/ EP 2.2.44所規(guī)范的純化水和注射水的測試，展示了Fusion技術(shù)輕松通過USP Method<643>所要求的0.500 ppmC標(biāo)準(zhǔn)，并說明了Fusion的有幫助意義的軟件功能特點(diǎn)。Z近USP<643> 有更新， 這不僅需要0.500 ppmC濃度的蔗糖和1,4-苯醌(代表“散裝水”)，而且需要額外的8.000 ppmC濃度的“無菌水”。該方法不需要在相同的校準(zhǔn)下計(jì)算散裝和無菌標(biāo)準(zhǔn)品，但為了方便使用和減少校準(zhǔn)時(shí)間，將形成散裝和無菌標(biāo)準(zhǔn)品的一條校準(zhǔn)曲線。

儀器方法
典型的藥物或低碳含量的Fusion方法，使用9.0 ml的樣本量，加入無菌標(biāo)準(zhǔn)下的8.000 ppmC的蔗糖和1,4-苯醌，在Fusion 軟件中樣本量減少到4.5 ml(圖2)。紫外反應(yīng)器預(yù)沖洗也設(shè)置為“開”，每次注射時(shí)，預(yù)沖洗體積設(shè)置為5.0 ml沖洗水，以減少殘留。

系統(tǒng)適用性時(shí)間表

以鄰苯二甲酸氫鉀(KHP)為原料，按照《Fusion用戶手冊(cè)》中的程序配制0.100 ppmC-10.000 ppmC范圍的校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)品。制備了0.500 ppmC蔗糖、0.500 ppmC 1,4-苯醌、8.000 ppmC蔗糖和8.000 ppmC 1,4-苯醌體系適宜性標(biāo)準(zhǔn)。兩組標(biāo)準(zhǔn)都在Fusion上運(yùn)行，如圖3所示。

校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)果

標(biāo)定曲線線性回歸值為0.99956。雖然USP<643>不需要線性回歸，但是有一個(gè)好的線性值(>0.995),對(duì)于獲得準(zhǔn)確的系統(tǒng)適用性結(jié)果是很重要的(圖4)。

系統(tǒng)適用性結(jié)果

• 散裝水

對(duì)于蔗糖和1,4-苯醌標(biāo)準(zhǔn)，散裝水濃度均以0.5 ppmC表示。標(biāo)準(zhǔn)是按照USP<643> 指導(dǎo)制備。通過<643>根據(jù)圖1的公式，試劑水必須小于0.100 ppmC，蔗糖和1,4-苯醌的響應(yīng)效率必須在85-115%之間。反應(yīng)效率確定了系統(tǒng)中難氧化化合物和易氧化化合物反應(yīng)的緊密程度，理想情況下，它應(yīng)該盡可能接近。如圖5所示，F(xiàn)usion TekLink軟件計(jì)算并識(shí)別標(biāo)準(zhǔn)是否通過或失敗。

• 無菌水

無菌水濃度用8.000 ppmC蔗糖和8 ppmC 1,4-苯醌標(biāo)準(zhǔn)來表示。根據(jù)美國藥典USP<643> 規(guī)定，試劑水必須小于0.100 ppmC， 百分比響應(yīng)效率必須為85% ~ 115%。無菌水在KHP標(biāo)準(zhǔn)的15%以內(nèi)作為檢查標(biāo)準(zhǔn)運(yùn)行。Fusion TekLink軟件計(jì)算并識(shí)別標(biāo)準(zhǔn)是否通過或失敗(圖6)。使用圖1中的公式計(jì)算%響應(yīng)效率

結(jié)論
Teledyne Tekmar Fusion UV/過硫酸鹽TOC分析儀，通過一條校準(zhǔn)曲線，成功運(yùn)行USP Method <643> 要求的散裝和無菌標(biāo)準(zhǔn)濃度，節(jié)省寶貴的分析時(shí)間。對(duì)難氧化的1,4-苯醌和易氧化的蔗糖的響應(yīng)效率為85% - 115%，符合USP<643> 的要求。