體外診斷試劑-超級ELISA優(yōu)化方案 3 競爭YZELISA方法的建立 3.1 的酶標(biāo)記及質(zhì)量鑒定 本試驗(yàn)采用改良過碘酸鈉法將辣根過氧化物酶標(biāo)記在上[1]，標(biāo)記完后取上清用Sephedex G200 凝膠層析進(jìn)行純化，洗脫液為0.2mol/L pH7.4的PBS，流速為15ml/h，分步收集，每支3ml，以紫外分光光度計(jì)測A280吸光度值，以洗脫體積為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)做圖，收集**峰即為酶標(biāo)峰 標(biāo)記完后用紫外分光光度計(jì)在分別在280nm及403nm處測定酶標(biāo)記物的A值，計(jì)算免疫球蛋白量摩爾比值酶結(jié)合率以及標(biāo)記率 3.2 包被用緩沖液及Z適包被抗原濃度的優(yōu)化 3.2.1 包被緩沖液的優(yōu)化 包被抗原時(shí)，為了得到**的包被效果，我們采用了碳酸鹽緩沖液（50mM ph9.6 ）磷酸鹽緩沖液（50mM ph7.6）以及TRIS鹽酸緩沖液（50 mM ph7.6）三種緩沖液作為包被液，抗原包被濃度為5ug/ml，及2.5ug/ml,酶標(biāo)抗體工作濃度為1：400及1：300，用自動(dòng)酶標(biāo)儀分析，選擇**的包被緩沖液系統(tǒng)（表5）同時(shí)為了保證緩沖液能夠長期保存，我們在包被液中添加了0.01%的硫柳汞作為防腐劑