【概述】

本文建立了HPLC-UV-CAD 方法，對注射用頭孢吡肟的仿制藥物從雜質(zhì)譜和輔料等方面進(jìn)行了一致性評價初探。在UV 檢測基礎(chǔ)上，采用通用型的電霧式檢測器（CAD），結(jié)合混合基質(zhì)柱Trinity-P1，通過調(diào)整有機(jī)相、鹽濃度等，建立了輔料精氨酸的測定方法，并可同時對藥物主成分和成鹽離子完成測定。通過輔料、主成分、成鹽離子比例，以及雜質(zhì)譜綜合評價仿制藥一致性。

【實驗/設(shè)備條件】

2.1.1 Thermo UltiMate3000 GX液相色譜儀ChromeleonTM Chromatography Data System ，變色龍色譜軟件，版本7.2 SR6

2.1.2 Corona CAD VEO 電霧式檢測器

2.1.3 注射用頭孢吡肟： 參比制劑，Hopira， 批號：144H004；仿制廠家1#，規(guī)格：0.5g 和1g，批號分別為：012270702, 010270701；仿制廠家2#， 規(guī)格：1.0g，批號：6F03898

2.1.4 乙腈、甲醇 ( 色譜級，F(xiàn)isher 公司)， 去離子水(18.2MΩ，Millipore 純水機(jī))，磷酸二氫鉀，（色譜純，上海安譜實驗科技有限公司）；磷酸，（分析純AR，國藥集團(tuán)）；乙酸銨，（LC-MS， Fisher公司）；乙酸（LC-MS，F(xiàn)isher 公司）。

【樣品提取】

樣品溶液制備：取注射用頭孢吡肟制劑適量，精密稱定，加流動相A 溶解并制成濃度為1mg/mL 的樣品溶劑，直接進(jìn)樣分析。其中輔料精氨酸測定進(jìn)樣體積為2 μL，雜質(zhì)譜分析進(jìn)樣體積為50 μL。

【實驗/操作方法】

對藥物雜質(zhì)組成和含量進(jìn)行分析，是保證藥物安全性的重要方面。同時雜質(zhì)譜的也反映原料藥物的工藝等。本文對仿制藥物和參比制劑進(jìn)行雜質(zhì)譜的比較，參考USP40Cefepime injection 方法進(jìn)行對比分析，結(jié)果在UV254nm下，仿制藥廠家1# 與參比制劑的雜質(zhì)譜基本一致，且面積歸一化含量相近； 仿制藥廠家2# 與參比制劑相比，雜質(zhì)譜組成相近，但部分雜質(zhì)含量差異較大，其中RT=20.807，21.960，29.727 和30.570min 的雜質(zhì)峰含量極低或沒有，而RT=19.910，28.267min 的雜質(zhì)峰相對含量較高。這些差異特征峰需進(jìn)一步通過質(zhì)譜進(jìn)行定性指認(rèn)。

【實驗結(jié)果/結(jié)論】

本文采用HPLC-CAD 方法初步對注射用頭孢吡肟制劑從雜質(zhì)譜、輔料含量及其主成分、成鹽離子比例等方面對比了仿制藥物與參比制劑的一致性。結(jié)果采用賽默飛特有的Trinity P1 混合基質(zhì)柱結(jié)合CAD 檢測器，可同時完成主成分、成鹽離子和輔料的分析，另外實驗也對比了仿制藥和參比制劑的雜質(zhì)譜，實驗后續(xù)工作會對差異性較大雜質(zhì)進(jìn)行LC-MS 的定性分析。