在反相色譜分離多肽和蛋白質(zhì)的實驗中，使用三氟乙酸 (TFA) 作為離子對試劑是常見的手段，流動相中的三氟乙酸通過與疏水鍵合相和殘留的極性表面以多種模式相互作用，來改善峰形、克服峰展寬和拖尾問題。同時反相色譜與電噴霧質(zhì)譜聯(lián)用已成為多肽和蛋白質(zhì)的分子量測定和結(jié)構(gòu)分析的重要工具，但是含有三氟乙酸的流動相對質(zhì)譜離子的產(chǎn)生具有抑zhi作用，一定程度上降低了液質(zhì)聯(lián)用技術(shù)的靈敏性和分析可靠性。目前常用的方法是降低流動相中 TFA 濃度，達到降低這種抑zhi作用，但是也會造成色譜分析質(zhì)量的降低；而如果用甲酸代替 TFA,會造成色譜分離柱效降低，達不到理想的分離效果。本文采用雙三元液相色譜系統(tǒng)(DGLC)，充分利用雙泵的優(yōu)勢，將兩個泵分別作為流動相的輸液泵和柱后溶液的傳輸泵，實現(xiàn)與質(zhì)譜的全自動連接。采用 TFA-Fix 技術(shù)或者抑zhi器技術(shù)降低流動相中TFA 對 MS 的離子產(chǎn)生的抑zhi作用，尤其是柱后抑zhi器技術(shù)大大提高了多肽樣品在質(zhì)譜上的靈敏度。測試條件一儀器：Ultimate DGP 3600 系列，包括帶有在線脫氣單元的雙三元梯度泵 DGP-3600RS、自動進樣器 WPS-3000TRS、柱溫箱 TCC-3000RS、檢測器 DAD-3000RS 和 MS TSQ Vantage。儀器連接裝置見圖1。色譜質(zhì)譜條件見表1