蛋白質(zhì)分離純化方法的展望
近年來隨著各學科的迅猛發(fā)展,對蛋白純化技術的需求不斷增長,已有的純化方法被日益改進,新型的
近年來隨著各學科的迅猛發(fā)展,對蛋白純化技術的需求不斷增長,已有的純化方法被日益改進,新型的純化方法也相 繼涌現(xiàn).羥磷灰石是磷酸鈣的結晶,由于其理化性質(zhì)不夠穩(wěn)定,結合能力差,很難用于層析.進來Bio-Rad公司對其進行了改進,提高了鈣和磷的比例,使形成球形,多孔,性質(zhì)穩(wěn)定的陶瓷羥磷灰石顆粒,其帶正電的鈣離子和負電性的磷酸根離子可分別與蛋白的羧基及氨基結合.通過調(diào)整緩沖液的pH值,酸性及堿性氨基酸可選擇性地與此樹脂結合,改變緩沖液的鹽濃度可將蛋白洗脫分離.
親和純化方面,Sigma發(fā)展了利用FLAG標簽的純化方法,FLAG分子量小且親水性,與其融合表達的蛋白不易形成包涵體,活性也不受影響.其它新型標簽及相應純化系統(tǒng)還有CBP,BCCP標簽和親和素一生物素純化系統(tǒng),麥芽糖結合蛋白標簽等.相信隨著時間的推移,會有更多更好的方法出現(xiàn)冶理充分地應用這些方法廁科研,生物制藥,疫苗,診斷試劑研制等工作都會有很大幫助.
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