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1 測試原理
人參皂苷屬于三萜類皂苷化合物,易溶于甲醇、乙醇,且含有糖鏈數(shù)量多的人參皂苷水溶性優(yōu)于含有糖鏈數(shù)量少的人參皂苷或苷元。混合的人參皂苷隨流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱,含有糖鏈結(jié)構(gòu)較少的人參皂苷先流出色譜柱,此外隨著流動(dòng)相中有機(jī)相所占比例的增加,人參皂苷的保留時(shí)間會(huì)變短,但是結(jié)構(gòu)相似的人參皂苷分離度降低。因此,需要適合的梯度洗脫程序才能實(shí)現(xiàn)不同人參皂苷在較短的時(shí)間內(nèi)的分離。
2 儀器設(shè)備與測試條件
人參皂苷屬于三萜類皂苷化合物,易溶于甲醇、乙醇,且含有糖鏈數(shù)量多的人參皂苷水溶性優(yōu)于含有糖鏈數(shù)量少的人參皂苷或苷元?;旌系娜藚⒃碥针S流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱,含有糖鏈結(jié)構(gòu)較少的人參皂苷先流出色譜柱,此外隨著流動(dòng)相中有機(jī)相所占比例的增加,人參皂苷的保留時(shí)間會(huì)變短,但是結(jié)構(gòu)相似的人參皂苷分離度降低。因此,需要適合的梯度洗脫程序才能實(shí)現(xiàn)不同人參皂苷在較短的時(shí)間內(nèi)的分離。
儀器配置

試劑耗材
人參皂苷Rg1、Re、Rb1、Rd、Rf、Rc、Rb2和Rb3;磷酸;甲醇;乙腈;超純水。
測試條件
C18色譜柱柱溫:25℃±1℃
進(jìn)樣量:20μL
流動(dòng)相:乙腈(A)—0.1%磷酸水溶液(B)
流速:1mL/min
梯度洗脫程序:

3 測試結(jié)果
色譜分離

8種人參皂苷的色譜分離圖
線性關(guān)系
8種人參皂苷的線性關(guān)系考察結(jié)果

精密度
精密度測試曲線

精密度數(shù)據(jù)表

精密度加標(biāo)回收率
空白加標(biāo)回收率數(shù)據(jù)表

4 結(jié)論
本方案使用SY-9100液相色譜儀,在25℃±1℃柱溫條件下,以乙腈—0.1%磷酸水溶液為流動(dòng)相,按一定的梯度洗脫程序,實(shí)現(xiàn)了對8種人參皂苷的分離分析測定。標(biāo)準(zhǔn)溶液的校正曲線線性良好,相關(guān)系數(shù)r均大于0.999;8種人參皂苷混合標(biāo)樣重復(fù)6次進(jìn)樣的峰面積RSD<1.0%;空白加標(biāo)回收試驗(yàn)的回收率均在96.08%~107.59%,RSD≤4.59%,該方法具有良好的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確度。
與2020版ZG藥典和《GB/T 22996-2008 人參中多種人參皂苷的測定 液相色譜-紫外檢測器》中對人參總皂苷的檢測方法相比,該方案增加了可同時(shí)檢測的人參皂苷的種類;與目前文獻(xiàn)中人參皂苷檢測方法相比,本方案能夠達(dá)到更低的定量限,為市場上人參皂苷產(chǎn)品質(zhì)量控制提供了更GX準(zhǔn)確的解決方案。
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