近年來，適配體、向?qū)?RNA、小干擾 RNA、反義寡核苷酸等合成寡核苷酸已成為生命科學(xué)和診斷研究的關(guān)注焦點(diǎn)，其中許多寡核苷酸在病毒感染、癌癥治療和其他多種治療應(yīng)用中表現(xiàn)出潛力。但必須對合成工藝和降解過程所產(chǎn)生的雜質(zhì)加以監(jiān)測、鑒定和去除。目前，開發(fā)和生產(chǎn)核酸類治療藥物面臨的關(guān)鍵挑戰(zhàn)是需要建立能夠分離和鑒定雜質(zhì)的分析方法，以及可獲得高質(zhì)量和高目標(biāo)序列產(chǎn)率的純化方法。

AdvanceBio：寡核苷酸分析與純化創(chuàng)新解決方案

從分析級到半制備級和制備級應(yīng)用，Agilent AdvanceBio 寡核苷酸色譜柱、軟件和儀器都可以無縫配合，大幅減少方法優(yōu)化和停機(jī)時(shí)間。無論您使用的是 LC/MS 還是 UV 分析，AdvanceBio 寡核苷酸系列可擴(kuò)展的色譜柱填料以及配套的儀器和軟件平臺都可以推進(jìn)您的寡核苷酸分析工作流程，實(shí)現(xiàn)更出色的表征和純化。

從半制備到制備：輕松滿足各種純化需求

AdvanceBio 10mm 內(nèi)徑半制備柱（2.7/4μm 粒徑），搭配分析型液相色譜儀即可完成半制備純化與餾分分析，其柱加熱功能還能提升分離度與回收率。

圖 1. 半制備柱上進(jìn)樣 160 μL（柱上進(jìn)樣 3.2 mg）獲得的色譜圖（UV 260 nm）。紫色條表示 0.2 分鐘時(shí)間片段的餾分收集

圖 2. 餾分收集器中收集的 6 種餾分的再分析疊加色譜圖（UV 260 nm）。表格（插圖）顯示主峰的純度和產(chǎn)量

AdvanceBio 寡核苷酸 21.2mm 制備柱與分析柱，無需繁瑣方法轉(zhuǎn)移，且用相同固定相做分析表征；其新型 4μm 填料（同系列鍵合相），能平衡載樣量與分離度。

圖 3. 使用 DBA/TRIS 和聚焦梯度對短 ON 進(jìn)行制備型純化運(yùn)行。綠色條代表餾分收集的時(shí)間片段

安捷倫制備型液相色譜放大計(jì)算器

如需了解此計(jì)算器如何提供幫助，請單擊鏈接：放大計(jì)算器

寡核苷酸純化解決方案

AdvanceBio 寡核苷酸柱以 4μm 核-殼填料（優(yōu)于傳統(tǒng) 5μm 全多孔填料）解決分離效率低問題；安捷倫獨(dú)特填料修飾耐高 pH 且鍵合封端 C18 固定相，可以在高 pH 與溫度條件下保障寡核苷酸分析；同時(shí)還提供 2.7μm、4μm 粒徑應(yīng)對方法放大難，適配各類分析與制備需求。

圖 4. 寡核苷酸純化工作流程

圖 5. 在不同規(guī)模下運(yùn)行的安捷倫系統(tǒng)的分析物數(shù)量和流速比較

其他制備純化填料/ 色譜柱選擇

Agilent PLRP-S 色譜柱

反相填料 – 用于離子對反相模式

五種孔徑：100?、200?、300?、1000? 和 4000?

填料粒徑范圍從 3μm 到 50μm

Agilent PL-SAX 色譜柱

出眾的聚合物陰離子交換填料

兩種孔徑：1000? 和 4000?

填料粒徑范圍從 5μm 到 30μm

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