微量熱泳動(MST)是指分子在微觀的溫度梯度場中的定向運(yùn)動生物分子結(jié)構(gòu)/構(gòu)象變化會引起其水化層分子量電荷的變化,而這種變化會導(dǎo)致分子在溫度梯度場中運(yùn)動速度的改變,這種速度的改變可以用來分析分子間的相互作用以及各種化學(xué)計量學(xué)參數(shù)MST 可以直接在接近天然的環(huán)境任意生物溶液中溶液中測量分子間相互作用,而不需要一個固定的表面,每次實驗只需要6ul的樣品量,使用低費(fèi)用的毛細(xì)吸管來完成實驗,能夠在短短十分鐘之內(nèi)測量16個樣品的數(shù)據(jù),這些特點使得其成為一種Zxin的方便快速高通量的分子間相互作用的分析儀器而且,該技術(shù)極其靈敏,甚至可以檢測到像蛋白質(zhì)磷酸化或離子結(jié)合到蛋白質(zhì)和DNA/RNA的微小的變化
通過毛細(xì)吸管ZX的紅外激發(fā)和外圍的冷卻,毛細(xì)吸管中產(chǎn)生極ng確地微觀區(qū)域的溫度梯度差異,將所需要測量的溶液(緩沖液血清細(xì)胞裂解液和其它生物液體)填充到毛細(xì)吸管之中,然后通過監(jiān)測分子的熒光信號的移動進(jìn)而監(jiān)測分子在溫度梯度場中的運(yùn)動這個熒光信號可以使分子自發(fā)的熒光(如蛋白中的色氨酸)或者標(biāo)記到蛋白上的熒光染料或者融合表達(dá)的熒光蛋白(如GFP)任何一級二級三級和/或四級結(jié)構(gòu)的變化所導(dǎo)致的水化層的改變都會影響分子的熱泳動效應(yīng),可以準(zhǔn)確而靈敏測量分子間的相互作用以及分子結(jié)構(gòu)的變化,其靈敏度也是其他技術(shù)無法比擬的 分子間相互作用分析儀MST
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