膽堿作為人類必需營(yíng)養(yǎng)素，在調(diào)節(jié)脂代謝、FZ脂肪肝和心血管疾病等疾病和促進(jìn)神經(jīng)發(fā)育等方面的作用已達(dá)成共識(shí)，但越來(lái)越多的研究發(fā)現(xiàn)膽堿水平升高與代謝綜合征、心血管疾病等的發(fā)生風(fēng)險(xiǎn)呈正相關(guān)，這與膽堿依賴腸道菌群的作用下生成氧化三甲胺有著密切關(guān)系，體內(nèi)高水平的TMAO可影響膽固醇代謝、促進(jìn)動(dòng)脈粥樣斑塊形成、加重脂代謝紊亂，在膽堿促心血管疾病的發(fā)生中起著關(guān)鍵作用。因此，評(píng)估體內(nèi)TMAO水平對(duì)探討膽堿在腸道的代謝情況及膽堿依賴腸道菌群代謝物與慢性疾病的關(guān)系有著重要的意義。目前測(cè)定TMAO的離子色譜法等方法檢測(cè)限為1~8μmol/L，靈敏度較低，不能滿足人體生物樣品的檢測(cè)要求：而應(yīng)用較多的氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法雖然靈敏度較高，但操作繁瑣、耗時(shí)長(zhǎng)，樣品衍生過(guò)程可使TMAO降解從而影響測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。因此，建立高靈敏度、準(zhǔn)確簡(jiǎn)便的測(cè)定TMAO水平的方法非常迫切。本課題組已建立的GX液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)血清膽堿的方法快速、準(zhǔn)確且靈敏，本研究將此方法應(yīng)用于測(cè)定血清TMAO的水平，以期為科研和臨床檢驗(yàn)提供參考。

儀器簡(jiǎn)介

    LC-600A智能全控液相色譜系統(tǒng)由P600高壓恒流泵與UV600紫外檢測(cè)器直接構(gòu)成等度分析系統(tǒng)。使用WS600工作站可以同時(shí)控制數(shù)臺(tái)P600高壓恒流泵、UV600紫外檢測(cè)器及恒溫柱箱等，實(shí)行多元高壓洗脫、波長(zhǎng)掃描等功能。

樣品處理：

取30μL血清或標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液，加入3倍體積的除蛋白液，旋渦混勻后4℃、13200r/min離心15min。取上清移至密封的樣品瓶后上機(jī)檢測(cè)，以保留時(shí)間和質(zhì)譜圖定性，內(nèi)標(biāo)法定量。

質(zhì)譜條件：

測(cè)定結(jié)果：