操作步驟 1. 編號：將樣品對應(yīng)微孔按序編號，每板應(yīng)設(shè)陰性對照2 孔陽性對照2 孔空白對照1 孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同） 2. 加樣：分別在陰陽性對照孔中加入陰性對照陽性對照50l然后在待測樣品孔先 加樣品稀釋液40l，然后再加待測樣品10l加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不 觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻， 3. 溫育：用封板膜封板后置37溫育30 分鐘 4. 配液：將30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水30 倍稀釋后備用 5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30 秒后棄去，如此 重復(fù)5 次，拍干 6. 加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50l，空白孔除外 7. 溫育：操作同3 8. 洗滌：操作同5 9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50l，再加入顯色劑B50l，輕輕震蕩混勻，37避光顯色 15 分鐘. 10. 終止：每孔加終止液50l，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色） 11. 測定：以空白空調(diào)零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值） 測定應(yīng)在加終止 液后15 分鐘以內(nèi)進(jìn)行注意事項(xiàng) 1．操作嚴(yán)格按照說明書進(jìn)行，本試劑不同批號組分不得混用 2．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30 分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未 用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存 3．濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果 4． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染 5．底物請避光保存 6．試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)，使用雙波長檢測時(shí)，參考波長為630nm 7．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理終止液為2M 的硫酸，使用時(shí)必須 注意安全