雞白細胞介素2（IL-2）酶聯(lián)免疫分析（ELISA） 試劑盒使用說明書 本試劑僅供研究使用 目的：本試劑盒用于測定雞血清，血漿及相關(guān)液體樣本中白細胞介素2（IL-2）的含量 實驗原理： 本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中雞白細胞介素-2（IL-2））水平用純化的雞白細胞介素-2（IL-2）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入雞白細胞介素-2（IL-2），再與HRP標記的IL-2抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合物，經(jīng)過徹底洗滌后加底物TMB顯色TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成Z終的黃色顏色的深淺和樣品中的雞白細胞介素-2（IL-2）呈正相關(guān)用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），通過標準曲線計算樣品中雞白細胞介素-2（IL-2）濃度 試劑盒組成： 試劑盒組成 48孔配置 96孔配置 保存 說明書 1份 1份 封板膜 2片（48） 2片（96） 密封袋 1個 1個 酶標包被板 1×48 1×96 2-8保存 標準品：360ng/L 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8保存 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶 2-8保存 酶標試劑 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8保存 樣品稀釋液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8保存 顯色劑A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8保存 顯色劑B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶 2-8保存 終止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8保存 濃縮洗滌液 （20ml×20倍）×1瓶 （20ml×30倍）×1瓶 2-8保存 樣本處理及要求： 1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）仔細收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應再次離心 2. 血漿：應根據(jù)標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應該再次離心 3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）仔細收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應再次離心胸腹水腦脊液參照實行 4. 細胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）仔細收集上清檢測細胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細胞懸液，細胞濃度達到100萬/ml左右通過反復凍融，以使細胞破壞并放出細胞內(nèi)成份離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）仔細收集上清保存過程中如有沉淀形成，應再次離心 5. 組織標本：切割標本后，稱取重量加入一定量的PBS，PH7.4用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆脴吮救诨笕匀槐３?-8的溫度加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標本勻漿充分離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）仔細收集上清分裝后一份待檢測，其余冷凍備用 6. 標本采集后盡早進行提取，提取按相關(guān)文獻進行，提取后應盡快進行實驗若不能馬上進行試驗，可將標本放于-20保存，但應避免反復凍融. 7. 不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3YZ辣根過氧化物酶的（HRP）活性