病毒的超低溫保存法
大多數(shù)微生物可用超低溫保存,超低溫保存法是適用范圍Z廣的微生物保存法需要復(fù)雜營養(yǎng)的微生物種,如用其他的貯存方法不能保持其活力( 如植物的病原性真菌),通??捎贸蜏氐姆椒ū4妫ˋTCC 1983;Halliday,Baker 1985)此法是將凍存在小管或安瓿里的細胞以較慢的冷凍速率(1/分鐘)冷凍,直至150,再將這些小管貯存在150~-196的液氮中
超低溫的冷凍保護劑不同于凍干法所用的冷凍劑ATCC 常用一種由甘油(10%)二甲
亞砜(5%)和培養(yǎng)液制成的混合劑保存多數(shù)的細胞株這些化學(xué)試劑進入細胞內(nèi)可避免內(nèi)
膜的冷凍損傷
貯存在低溫容器內(nèi)的細胞復(fù)蘇時必須小心操作當小管被加熱時,所形成的冰晶會將細
胞殺死,正確操作就可避免這種事故只要迅速將樣品解凍就能減少活力的丟失,做法是:將封口的小管迅速放入37的水中,直至所有的冰融化,然后打開管口,將內(nèi)容物移入培養(yǎng)基
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