樣品溶劑：乙腈：冰醋酸：水=5:1:94

對照溶液的配置：分別取VB1（Thiamine hydrochloride）20 mg，VB2（Riboflavin）20 mg，VB3（Niacinamide）和VB5（Niacin）40 mg，VB6（Pyridoxine hydrochloride）20 mg，用200 ml樣品溶劑溶解，于65-70℃水浴中加熱10 min，溶解后在冷水中放置10 min，然后放置室溫。

色譜柱：Inspire C18，250×4.6 mm，5 μm (Cat#：81006)

流動相：甲醇：冰醋酸：水（含1.40 mg/ml的己烷磺酸鈉）=27:1:73

流速： 1.0 mL/min

柱溫： 30 ℃

檢測器：UV 280 nm

進樣量：10 μL

1-VB5 2-VB3 3-VB6 4-VB2 5-VB1