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1、血液處理 制備3 - 5 mL 血漿,移取2 mL,加入1 mL 20% 氯化鈉水溶液,混勻,待凈化。
2、硅藻土柱凈化
a 上樣: 將樣品加入ProElut LLE+ 3 mL* (Cat.#62503),樣品在重力的作用下滲入填料;
b 平衡: 靜置10 min,使樣品在硅藻土表面充分浸潤(rùn);
c 洗脫: 向柱中加入15 mL ,打開(kāi)控制閥,調(diào)節(jié)流速使洗脫液成滴流下,接收洗脫液;
d 重新溶解:25 oC 下將洗脫液減壓蒸餾至干,用1 mL 甲醇溶解殘?jiān)⑷芙庖涸?18 oC 下放置3 h,用微孔濾膜過(guò)濾后,HPLC 分析
注: “3 mL” 是指硅藻土柱的Zda上樣量,如果樣品量超過(guò)這一數(shù)值,樣品會(huì)流出小柱;添加樣品量應(yīng)盡量接近Zda上樣量,否則會(huì)有部分洗脫液被扣留,影響回收率;樣品量一定時(shí),應(yīng)選擇Zda上樣量稍大于樣品量的小柱,差值用20% 氯化鈉水溶液補(bǔ)足。
色譜柱:Diamonsil C18(2) 250 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99603)
流動(dòng)相:甲醇/ 水=98/2
流速:1.0 mL/min
進(jìn)樣量:20 μL
柱溫:35oC
檢測(cè)器:UV 300 nm
適用于血漿中維生素A 和維生素E 的檢測(cè)。

1. 維生素A;2. a- 維生素E
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