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應(yīng)用方案

儀器網(wǎng)/ 應(yīng)用方案/ HPLC測(cè)定葉酸-青霉素G酰化酶對(duì)N-苯乙酰化阿霉素的催化活性

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方法：
HPLC
基質(zhì)：
藥品
應(yīng)用編號(hào)：
102739
化合物：
青霉素G酰化酶, N-苯乙?；⒚顾?/dd>
色譜柱：
Diamonsil C18 5μm 250 x 4.6mm
色譜條件：

色譜柱：Diamonsil C18 250 mm× 4.6 mm, 5μm(Cat#:99903)

流動(dòng)相: 乙腈-水, 85%磷酸調(diào)節(jié)pH為2.4 梯度程序: 0~ 3 min 為24%乙腈, 3~15 min 為80%乙腈

流速: 1.0 mL/min

進(jìn)樣量: 10 μL

檢測(cè)器: UV 495 nm

文章出處：
ZG藥科大學(xué)學(xué)報(bào) 2005,36(6):535-537
關(guān)鍵字：
葉酸, 青霉素G?；? N-苯乙酰化阿霉素, 催化活性, Diamonsil C18, 鉆石一代, GX液相色譜法, HPLC
圖譜：

?

摘要：目的:利用GX液相色譜法測(cè)定葉酸-青霉素G?；?PGA)對(duì)N-苯乙酰化阿霉素(DOXP)的催化活性,為葉酸導(dǎo)向的酶催化前體藥物的腫瘤ZL(FDEPT)研究奠定理論基礎(chǔ)。方法:色譜柱為Diamonsil C18(250 mm×4.6 mm,5μm);流動(dòng)相為乙腈-水,用85%磷酸調(diào)節(jié)pH至2.4;梯度程序:0~3 min為24%乙腈,3~15min為80%乙腈;紫外檢測(cè)波長(zhǎng):495 nm;流速:1 mL/min。結(jié)果:DOXP和酶解產(chǎn)物阿霉素的tR分別為5.5 min和12.3 min,原酶PGA和葉酸-PGA偶聯(lián)酶對(duì)DOXP的Km和vmax分別為15μmol/mL,0.094μmol/(min.mg)和19μmol/mL,0.086μmol/(min.mg)。結(jié)論:DOXP為PGA的較好底物,葉酸與PGA偶聯(lián)對(duì)酶的催化活性的影響較小。

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