糖基化是蛋白質(zhì)翻譯后修飾的Z常見的類型之一。多糖側(cè)鏈（聚糖）在免疫細胞信號傳導(dǎo)的生理、病理現(xiàn)象中起著重要作用。除了對糖蛋白的糖基化模式進行結(jié)構(gòu)/功能上的分析外，糖基化的全面表征也是生物藥物生產(chǎn)中的一個主要的質(zhì)量參數(shù)。親水相互作用色譜法（HILIC）一直以來都是公認的有效分離和定量游離聚糖的分析方法。

糖蛋白分析包括對N-糖鏈結(jié)構(gòu)和O-糖鏈結(jié)構(gòu)的表征。除質(zhì)譜技術(shù)外，利用酰胺固定相的HILIC法高分辨率分離糖蛋白的N-聚糖，是許多實驗室常用的一種成熟穩(wěn)定的分析技術(shù)。通過2-AB或PA等熒光試劑標記聚糖，可以進行飛摩爾水平的糖的檢測。

TSKgel Amide-80色譜柱的化學(xué)特性使其能夠在單次色譜運行中分離中性聚糖和帶電聚糖。將TSKgel Amide-80色譜柱上標記多糖的保留時間與標記葡聚糖同聚物梯度進行比較，可以識別聚糖結(jié)構(gòu)，計算出聚糖的葡萄糖單元值（GU值）。對外切糖苷酶消化物進行分離后獲得的GU值通過查詢聚糖數(shù)據(jù)庫（Glycobase，autoGU）預(yù)測聚糖結(jié)構(gòu)。

多年來，3 μm與5 μm的TSKgel Amide-80色譜柱已經(jīng)被許多QC實驗室用來分析糖類物質(zhì)。2 μm粒徑的Amide-80色譜柱不僅具有相同的分離選擇性，而且可以提高(U)HPLC和LC-MS分析的峰容量和靈敏度，可將HPLC分析方法順利轉(zhuǎn)移至UHPLC。

此款色譜柱特別適用于UHPLC系統(tǒng)，因為2 μm的小粒徑有助于減少系統(tǒng)死體積、優(yōu)化檢測器靈敏度，可以獲得更高分辨率的分離效果！

01 應(yīng)用實例：采用TSKgel Amide-80(2μm)色譜柱對標記的聚糖進行糖基化分析（熒光檢測）

02 應(yīng)用實例：采用TSKgel Amide-80(2μm)色譜柱進行2-AB糖原UHPLC-MS分析

標簽：色譜柱