1、提取

稱取5 g 飼料置于50 mL 塑料離心管中，加入30 mL 乙酸乙酯，超聲提取15 min，其間用手振動2 次。

取出離心管，4000 rpm 下離心5 min，將上清液轉(zhuǎn)入250 mL 平底燒瓶中。再向離心管中加入30mL 乙酸乙酯重復(fù)提取一次，合并提取液。30 oC 下將提取液減壓蒸餾至近干。

向平底燒瓶加入4 mL 甲醇氯化鈉溶液（甲醇：4% 氯化鈉水溶液=30：70）和4 mL 正己烷溶解殘渣， 混合液轉(zhuǎn)入10 mL 離心管。將離心管渦旋混合2 min，然后在4000 rpm下離心2 min，棄去上層的正己烷，再加入4 mL 正己烷，同上操作，棄去正己烷層。下層清液待凈化。

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2、凈化

a 活化： 依次用6 mL 甲醇和6 mL 水活化ProElut PLS 150 mg/6 mL (Cat.#68004)，流出液棄去；

b 上樣： 將待凈化的提取液加入柱中，流出液棄去；

c 淋洗： 用6 mL 20% 甲醇水溶液淋洗，淋洗液棄去，并將PLS 柱抽干；

d 洗脫： 用6 mL 甲醇洗脫，收集洗脫液；

e 重新溶解：在40 oC 下用氮氣將洗脫液吹至近干，然后用1 mL 40% 甲醇水溶液定容，供HPLC 分析

色譜柱：Diamonsil C18(2) 250 x 4.6 mm ID, 5 μm (Cat. #99603)

流動相：甲醇/ 水=40/60

流速：1 mL/min

進樣量：20 μL

檢測器：UV 280 nm

柱溫：30 oC

適用于預(yù)混飼料和配合飼料中氯霉素的檢測。

1. 氯霉素