1、提取

將15 mL 奶( 或3 g 奶粉+15 mL 水) 與15 mL 乙腈加入塑料離心管，渦旋混合2 min，6000 rpm下離心5 min ；

取20 mL 上清液于另一離心管，加15 mL 正己烷，渦旋混合2 min，6000 rpm 下離心2 min，棄去正己烷，加入15 mL 正己烷重新操作一次；

向下層清液中加入15 mL 乙酸乙酯，渦旋混合2 min，6000 rpm 下離心2 min，收集上層清液；

15 mL 乙酸乙酯重復(fù)提取一次，合并上清液。

將乙酸乙酯提取液在30 oC 下減壓蒸餾至近干，用10 mL 2% 磷酸溶液分兩次溶解殘?jiān)?，待凈化?/p>

2、凈化 ProElut PXC 200 mg/6 mL (Cat.#68212)

a 活化： 6 mL 甲醇活化、6mL 水平衡；

b 上樣： 將待凈化液( 相當(dāng)于10 mL 牛奶或2 g 奶粉) 加入小柱，流出液棄去；

c 淋洗： 依次用6 mL 水、6 mL 甲醇淋洗小柱，流出液棄去；

d 洗脫： 6 mL 5% 氨水甲醇溶液洗脫，收集洗脫液；

e 重新溶解：30 oC 下將洗脫液減壓蒸餾至近干，用1 mL 流動(dòng)相溶解殘?jiān)?，微孔濾膜過(guò)濾后供HPLC 分析

注：e 步驟是供參考的，使用者可根據(jù)自己使用的分析儀器進(jìn)行調(diào)整。

流速：1 mL/min

進(jìn)樣量：20 μL

檢測(cè)器：UV 270 nm

柱溫：35 oC

流動(dòng)相：梯度，A 乙腈 B 2% 乙酸水溶液

梯度設(shè)置 T 0 30 38 39 45 A 12 25 25 12 12 B 88 75 75 88 88?

注：本方法中，目標(biāo)化合物是由HPLC 測(cè)定的，但這并不表明其他儀器不適合。當(dāng)使用者采用其他方式進(jìn)行檢測(cè)時(shí)，同樣可以采用本方法進(jìn)行樣品前處理。其中T是時(shí)間。

適用于奶和奶粉中磺胺類藥物的檢測(cè)。

1. 磺胺吡啶；2. 磺胺甲基嘧啶；3. 磺胺二甲基嘧啶；4. 磺胺甲氧噠嗪；5. 磺胺甲惡唑；6. 磺胺異惡唑；7. 磺胺喹惡唑；8. 磺胺間二甲氧基嘧啶