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在本研究中,我們提供一種新流程,結(jié)合快速色譜,利用兩種規(guī)格的整體柱和高分辨Orbitrap質(zhì)譜儀,對(duì)完整及還原利妥昔進(jìn)行了分析,采用AIF,Multiplexed HCD自上而下的裂解,以及自下而上的分析方法進(jìn)行序列驗(yàn)證 即使抗體的上樣量低至500pg,我們?nèi)钥梢缘玫礁哔|(zhì)量的質(zhì)譜圖,該數(shù)據(jù)證明了LC-MS儀器的高靈敏度此外,為了分析還原型單克隆抗體,我們采用色譜的方法將抗體的重鏈和輕鏈分開,設(shè)置不同的分辨率對(duì)其進(jìn)行檢測(cè) 通過這個(gè)流程,我們可以測(cè)定完整抗體的分子量,對(duì)輕鏈和重鏈的氨基酸序列進(jìn)行確認(rèn)和驗(yàn)證,對(duì)該抗體不同糖基化形式的相對(duì)豐度進(jìn)行鑒定和評(píng)價(jià) 賽默飛Q Exactive Orbitrap LCMSMS系統(tǒng)

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