摘要 目的 研究VEB-3型超廣譜-內(nèi)酰胺酶（ESBL）的生化特性，并與VEB-1型ESBL進行比較方法 將blaVEB-3和blaVEB-1基因連接至pET28a載體上，并用重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸埃希菌BL21進行克隆表達(dá)，分別挑選blaVEB-3或blaVEB-1陽性表達(dá)的菌落測定-內(nèi)酰胺類抗生素對其ZdiYJ濃度（MIC），同時提取酶蛋白進行等電點和酶動力學(xué)分析 結(jié)果 VEB-3和VEB-1型ESBL具有基本一致MIC和相同的等電點（pI 7.45），但兩者的酶動力學(xué)性質(zhì)存在一定的差異：對頭孢他啶和頭孢噻肟，VEB-3較VEB-1表現(xiàn)出更高的親和力，兩者Km相差一倍左右；對頭孢噻吩，VEB-1比VEB-3更具親和力；而對阿莫西林，VEB-1型ESBL表現(xiàn)出很高的親和力，而VEB-3僅有低的親和力，兩者Km相差20多倍 結(jié)論 VEB-3和VEB-1型ESBL具有相同的等電點，不同的動力學(xué)參數(shù)，blaVEB-1基因中Leu56 Phe突變可能導(dǎo)致了兩者酶動力學(xué)性質(zhì)的差異 關(guān)鍵詞 -內(nèi)酰胺酶 等電點 酶動力學(xué) 紫外-可見分光光度計