液相色譜儀是一種靈敏性和精度相當(dāng)高的檢測(cè)分析儀器,流動(dòng)相作為帶動(dòng)待測(cè)樣品組分在檢測(cè)系統(tǒng)中向前移動(dòng)的載體,而貫穿于色譜儀的整個(gè)檢測(cè)流路,因此,對(duì)于流動(dòng)相溶液的選擇和處理有著較高的要求Z常用的流動(dòng)相主要有乙腈-水溶液和甲醇-水溶液一般,在將購(gòu)買的或是自己配置的流動(dòng)相溶液輸入液相色譜儀之前,必不可少的操作是對(duì)流動(dòng)相溶液進(jìn)行脫氣處理
對(duì)流動(dòng)相溶液進(jìn)行脫氣處理的目的是排除氣泡對(duì)檢測(cè)結(jié)果的影響和對(duì)儀器的損傷溶解在流動(dòng)相中的氧還可能與樣品流動(dòng)相甚至固定相(如烷基胺)反應(yīng),或引起溶劑pH的變化,使柱中固定相發(fā)生降解而改變柱的分離性能,對(duì)分離或分析結(jié)果帶來(lái)誤差;氣泡會(huì)影響檢測(cè)器的靈敏度基線穩(wěn)定性,使檢測(cè)噪聲增大,基線不穩(wěn),突然跳動(dòng)甚至使無(wú)法檢測(cè);當(dāng)氣泡流經(jīng)泵時(shí),會(huì)使泵頭發(fā)生空轉(zhuǎn),損傷泵頭
常用的流動(dòng)相脫氣方法有氦氣脫氣法加熱回流法抽真空脫氣法超聲脫氣法在線真空脫氣法具體操作方法如下:
氦氣脫氣法:使用在液體中比空氣溶解度低的氦氣,在0.1Mpa壓力下,以約60ml/min流速通入流動(dòng)相10-15min以驅(qū)除溶解的氣體此法使用于所有的溶劑,脫氣效果較好,由于氦氣價(jià)格較貴,成本高,故此法使用較少;
加熱回流法:該方法采用加熱的方式去除流動(dòng)相中的氣泡,雖然效果很好,但是適用范圍較窄對(duì)于有機(jī)溶劑或混合流動(dòng)相不適合用此法,因?yàn)閾]發(fā)性組分會(huì)損失掉,且會(huì)改變流動(dòng)相的組成
抽真空脫氣法:抽真空脫氣法也是比較常用的脫氣方法,當(dāng)貯液器被抽成部分真空,溶入的氣體蒸發(fā)形成氣泡溢出由于抽真空易抽走有機(jī)相而引起混合溶劑組成的變化,故此法適用于單一溶劑體系脫氣對(duì)多元溶劑體系應(yīng)預(yù)先脫氣后再進(jìn)行混合,以保證混合后的比例不變
超聲脫氣法:是目前實(shí)驗(yàn)室使用Z廣泛的脫氣方法,將配制好的流動(dòng)相連同容器一起放入超聲波清洗機(jī)的水漕中脫氣10-20min即可該方法操作簡(jiǎn)便,效果相對(duì)較差,但基本能滿足日常分析的要求
在線真空脫氣法:在線脫氣是把真空脫氣裝置串聯(lián)到儲(chǔ)液系統(tǒng)中,并結(jié)合膜過(guò)濾器,實(shí)現(xiàn)了流動(dòng)相在進(jìn)入輸液泵前的連續(xù)真空脫氣智能控制,無(wú)需額外操作,成本低,脫氣效果明顯優(yōu)于以上幾種方法,并適用于多元溶劑體系
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