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應(yīng)用方案

儀器網(wǎng)/ 應(yīng)用方案/ 人參皂苷的檢測(cè)方法(HPLC)

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【概述】

人參皂苷(Ginsenoside)是一類(lèi)固醇類(lèi)化合物,又稱(chēng)三萜皂苷。主要存在于人參屬藥材中。人參皂苷被視為是人參中的活性成分,具有增加白細(xì)胞數(shù)量、提高人體免疫力、促進(jìn)物質(zhì)代謝、抗疲勞、 抗衰老等作用,因而成為研究的目標(biāo)。本方法可用于檢測(cè)人參、西洋參、花旗參等參類(lèi)及其制品中的人參皂苷,方法簡(jiǎn)單,易于操作。


【實(shí)驗(yàn)/設(shè)備條件】

儀器:液相色譜儀,ThermoFisher U3000

 色譜柱:Agilent ZORBAX SB-C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm)

 流動(dòng)相:A:水   B:乙腈

 洗脫方式:梯度洗脫,見(jiàn)表1

 流速:1.0 mL/min

 柱溫:35℃

 進(jìn)樣量:20 μL

 檢測(cè)器:紫外檢測(cè)器

 檢測(cè)波長(zhǎng):203 nm


【樣品提取】

稱(chēng)取1 g人參樣品,加水50 mL,超聲20 min,取出,離心后取上清液于另一干凈試管,重復(fù)提取一遍,合并提取液,搖勻,取10 mL,待凈化。

備注:加標(biāo)樣品為經(jīng)預(yù)處理不含本底的空白樣品。


【實(shí)驗(yàn)/操作方法】

活化:向大孔樹(shù)脂凈化柱中加入10 mL甲醇活化,10 mL水平衡大孔樹(shù)脂凈化柱。

上樣和洗脫:將待凈化液的樣品加入已經(jīng)活化好的大孔樹(shù)脂凈化柱中,用加入10 mL 水淋洗大孔樹(shù)脂凈化柱,棄去淋洗液。用25 mL 70%甲醇水溶液洗脫大孔樹(shù)脂凈化柱,

,收集洗脫液,水浴蒸干,殘?jiān)约状既芤憾ㄈ?,過(guò)PTFE濾膜,上機(jī)。

表1 梯度洗脫程序

時(shí)間/min

A/%

B/%

0.0

82

18

40.0

79

21

42.0

74

26

46.0

68

32

55.0

60

40

65.0

60

40

75.0

0

100

80.0

82

18

90.0

82

18


【實(shí)驗(yàn)結(jié)果/結(jié)論】

一、

(1)加標(biāo)回收實(shí)驗(yàn)結(jié)果

表2 三種人參皂苷的加標(biāo)回收結(jié)果

 

目標(biāo)物

加標(biāo)濃度 (mg/kg)

回收率(%)

平均回收率(%)

RSD(%,n=3)

RG1

500

89.34

87.03

85.74

87.37

2.09

RE

500

98.38

106.0

103.4

102.6

3.79

RB1

500

95.17

90.86

92.19

92.74

2.38

 

(2)三種人參皂苷色譜圖

 圖片1.png

 

圖1 三種人參皂苷的色譜圖


【儀器/耗材清單】


貨號(hào)

描述

包裝

COD101124000

Copure?D101大孔樹(shù)脂凈化柱,4g/12mL 

50支/盒

BN24

biocomma? 智能水浴氮吹儀

1臺(tái)/箱

SF130-22-PTFE

PTFE針式過(guò)濾器,直徑13 mm,孔徑0.22 μm,有機(jī)系

100個(gè)/盒

SC2-1

2 mL藍(lán)色聚丙烯蓋,白色PTFE/紅色硅膠墊,9-425

100個(gè)/盒

V2-AL

2 mL螺紋棕色樣品瓶,帶書(shū)寫(xiě)處11.6*32 mm,9-425

100個(gè)/盒


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